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胆盐水解酶基因在植物乳杆菌KLDS1.0386中的表达研究被引量：4: 2016年; 本文从转录水平上研究了四种胆盐水解酶基因在植物乳杆菌KLDS1.0386中不同生长阶段的表达情况,并且分别以不同浓度的牛磺脱氧胆酸盐和甘氨脱氧胆酸盐为底物,以16s r RNA作为内参基因,利用实时荧光定量PCR技术研究不同浓度底物下的胆盐水解酶基因（bsh1、bsh2、bsh3、bsh4）表达的变化规律。结果显示,内参基因和目的基因的扩增效率均在90%~105%之间,说明目的基因的表达量可以被很好的反应出来。通过实时荧光定量PCR结果分析可知,植物乳杆菌KLDS1.0386中的4种胆盐水解酶基因随着生长时间的延长,表达量显著增加,而且在两种胆盐中都表达,基因表达量都被不同剂量（1%、2%、3%）的胆盐上调,上升幅度随着胆盐浓度的增加表现出极显著的增加趋势,而且胆盐不同,同浓度时每个基因的表达量也各不相同,在甘氨脱氧胆盐中的表达量普遍高于牛磺脱氧胆盐。; 唐雅茹李柏良李婉于上富霍贵成; 关键词：胆盐水解酶基因表达

乳酸菌CRISPR-Cas系统同源性分析: 2016年; CRISPR-Cas系统为乳酸菌抵抗噬菌体等外源基因元件提供获得性免疫,利用生物信息学方法分析了CRISPR序列及cas基因在乳酸菌种间的同源性关系。利用生物信息学方法预测NCBI中已测序的部分乳酸菌所含CRISPRCas系统,并对重复序列和Cas蛋白序列进行系统发生学分析。结果显示,嗜热链球菌、德氏乳杆菌和瑞士乳杆菌标准菌株均含不同数目的 CRISPR-Cas系统,各类型的重复序列高度保守,Cas蛋白序列同源性较高。CRISPR-Cas系统的同源性与其亚型密切相关,而与菌种亲缘关系有较大差异,证明了CRISPR-Cas系统能够通过基因水平转移传播这一结论。; 李婉张丹青王娜娜霍贵成; 关键词：乳酸菌 SHORT 同源性

乳酸乳球菌KLDS4.0325产细菌素最佳培养条件的研究被引量：3: 2016年; 以分离自新疆牧民家庭自制酸马奶中的乳酸乳球菌KLDS4.0325为研究对象,以大肠杆菌为指示菌,以抑菌圈直径为考察指标,考察了不同温度、p H、转速及培养时间等培养条件对该菌株细菌素产量的影响,经单因素实验优化得出乳酸乳球菌KLDS4.0325在培养温度33℃,培养基初始p H7.0,120 r/min摇床培养20 h的条件下,无细胞发酵上清液对大肠杆菌的抑菌圈直径最大,抑菌活性最强,细菌素产量最高。在此条件下,抑菌圈直径为25.26 mm,细菌素效价可达5383.07 IU/m L。; 王娜娜李婉杜金城霍贵成; 关键词：乳酸乳球菌细菌素

一株高产齐墩果酸的野生大豆内生真菌: 一株高产齐墩果酸的野生大豆内生真菌，它涉及一株内生真菌。本发明一株产齐墩果酸的野生大豆内生真菌为齐墩果酸原料的生产提供新的方法。产齐墩果酸的野生大豆内生真菌YsyS1，它为黑附球菌(Epicoccum nigrum)已在...; 肖佳雷来永才李炜毕影东李婉李强吉彪董慧孙立杰边爽; 文献传递

L.lactis KLDS4.0325产细菌素发酵培养基的响应面优化被引量：1: 2016年; 以分离自新疆牧民家庭自制酸马奶中的乳酸乳球菌KLDS4.0325为研究对象,以大肠杆菌为指示菌,以抑菌圈直径为考察指标,通过单因素实验(碳源、氮源及复合氮源)、Plackett-Burman、最陡爬坡实验和Box-Behnken实验优化其产细菌素培养基。PB实验结果表明,对细菌素产量影响显著的因素有蔗糖、蛋白胨、抗坏血酸钠;经Box-Behnken实验优化后培养基配方为:128.99 g/L蔗糖,17.59 g/L蛋白胨,10 g/L酪蛋白胨,10 g/L磷酸氢二钾,60 g/L碳酸钙,1.5 g/L硫酸镁,1.49 g/L抗坏血酸钠,1.5 g/Lβ-甘油磷酸钠,乙酸钠、氯化钠、硫酸锰各为1.0 g/L;该条件下抑菌圈直径为24.76 mm,效价可达5000 U/m L,比优化前提高了3.31倍。并经验证实验证明该配方下的实验结果与预测值吻合,因此该回归模型是切实可行的。; 王娜娜李婉于上富刘飞霍贵成; 关键词：细菌素乳酸乳球菌响应面分析法

产细菌素乳酸菌的筛选及相关基因分析被引量：1: 2016年; 以Escherichia coli为指示菌,采用双层平板法从7株乳酸菌中筛选出一株高产细菌素的优良菌株KLDS 4.0325;通过菌体形态观察及16S r RNA序列分析鉴定菌株KLDS 4.0325为乳酸乳球菌,通过分析该菌株全基因组序列,预测其细菌素合成基因簇有AOI_1和AOI_2,并分别做了简要介绍,在细菌素数据库中比对,均属于二类细菌素中的Lactococcin_B_(LCN-B)型细菌素;最后通过向指示菌菌液中添加无细胞发酵上清液进一步证明了该菌株所产细菌素对指示菌的作用方式是杀菌。; 王娜娜梁宏彰李婉李柏良丁秀云霍贵成; 关键词：细菌素

嗜热链球菌CRISPR-Cas系统的检测被引量：3: 2016年; 【目的】CRISPR-Cas系统为嗜热链球菌抵抗噬菌体等外源基因元件提供获得性免疫,分析NCBI中已公开发表全基因组序列的9株嗜热链球菌所含CRISPR-Cas系统的数目和类型,对实验室相应菌株的CRISPR-Cas系统进行检测。【方法】利用生物信息学方法对NCBI中9株已测序嗜热链球菌所含CRISPR-Cas系统进行分析,根据其Cas基因序列设计引物,对实验室嗜热链球菌菌株的Cas基因进行扩增、测序,分析实验室6株嗜热链球菌的CRISPR-Cas系统情况。【结果】9株标准菌株均含不同数目的CRISPR-Cas系统,其类型主要为Ⅱ-A型、Ⅲ-A型和Ⅰ-E型,各类型的标志Cas基因高度保守。6株供试菌中,S4仅含Cas9基因,其它5株均含有Cas9基因、Cas10基因和Cas9*基因,79和KLDS3.0207还含有Cas3基因。【结论】可根据标准菌株高度保守的Cas基因设计引物,预测未知嗜热链球菌所含CRISPRCas系统的数目和类型。S4仅含1个Ⅱ-A型CRISPR-Cas系统,其它5株均含有2个Ⅱ-A型CRISPR-Cas系统和1个Ⅲ-A型CRISPR-Cas系统,此外,79和KLDS3.0207均含有1个Ⅰ-E型CRISPR-Cas系统。; 李婉梁宏彰张丹青王娜娜唐雅茹李柏良霍贵成; 关键词：嗜热链球菌 CAS 生物信息学分析

一株高产齐墩果酸的野生大豆内生真菌: 一株高产齐墩果酸的野生大豆内生真菌，它涉及一株内生真菌。本发明一株产齐墩果酸的野生大豆内生真菌为齐墩果酸原料的生产提供新的方法。产齐墩果酸的野生大豆内生真菌YsyS1，它为黑附球菌(Epicoccum？nigrum)已在...; 肖佳雷来永才李炜毕影东李婉李强吉彪董慧孙立杰边爽; 文献传递

乳酸菌CRISPR-Cas系统研究进展被引量：3: 2016年; 对乳酸菌CRISPR-Cas系统(即:成簇的、规律间隔的短回文重复序列及相关Cas蛋白系统)抗噬菌体机制以及噬菌体进化出的相应免疫逃逸机制进行综述,旨为进一步研究噬菌体抗性乳酸菌发酵剂奠定基础。; 李婉边鑫王娜娜李柏良霍贵成; 关键词：乳酸菌噬菌体

嗜热链球菌CRISPR-Cas系统的分析及抗噬菌体机制的研究: 随着社会经济的不断发展，发酵乳制品在国内市场的需求量逐年增加。然而，在发酵过程中乳酸菌有时会遭受噬菌体的侵染，导致发酵失败。乳酸菌自身的噬菌体防御机制能够抵抗噬菌体的侵染，其中CRISPR-Cas系统广泛存在于细菌和古细...; 李婉; 关键词：乳品加工发酵乳制品嗜热链球菌

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李婉