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广西巴马小型猪Glut4基因克隆和真核表达研究: 葡萄糖转运蛋白4(Glut4)介导的葡萄糖转运是肌糖代谢的主要限速步骤.本研究旨在克隆广西巴马小型猪Glut4基因,构建真核表达载体,转染细胞研究Glut4功能.以广西巴马小型猪背最长肌组织作为实验材料,通过RT-PCR...; 刘嘉琪程晓芳周亭亭严雪瑜韦玲静蒋钦杨黄艳娜; 关键词：葡萄糖转运蛋白4 基因克隆真核表达

广西巴马小型猪Glut4基因克隆和真核表达被引量：1: 2016年; 葡萄糖转运蛋白4(Glut4)是调控肌肉葡萄糖代谢的关键因子。本研究旨在克隆广西巴马小型猪Glut4基因,构建真核表达载体,转染C2C12细胞,研究Glut4功能。以广西巴马小型猪背最长肌组织作为实验材料,通过RT-PCR技术扩增出Glut4基因编码序列,连接入PMD18-T克隆载体,测序鉴定正确后提取克隆质粒。用Bam HⅠ和HindⅢ限制性内切酶双酶切克隆质粒,获得Glut4片段,连接至p EGFP-N1载体上,构建p EGFP-N1-Glut4表达载体,提取p EGFP-N1-Glut4重组质粒转染至C2C12细胞,观察细胞荧光表达情况,并检测转染24 h和48 h时培养液的葡萄糖水平。实验结果表明:广西巴马小型猪Glut4基因编码区序列长1 530 bp,编码509个氨基酸,与参考序列(序列号为EU590115.1)的同源性为99.7%;重组质粒转染C2C12细胞能表现出绿色荧光。转染24 h和48 h时,p EGFP-N1-Glut4组细胞培养液的葡萄糖浓度均显著低于空载体组(16.08±0.49 vs.17.13±0.13,4.93±0.19 vs.6.28±0.12,p<0.01)。在C2C12成肌细胞中过表达广西巴马小型猪Glut4基因,能增加细胞的葡萄糖摄入量。; 刘嘉琪程晓芳周亭亭严雪瑜韦玲静司景磊蒋钦杨黄艳娜; 关键词：广西巴马小型猪基因克隆真核表达

陆川猪脂酰辅酶A氧化酶1基因克隆及序列分析被引量：6: 2017年; 本研究旨在对陆川猪脂酰辅酶A氧化酶1(acyl-coenzyme A oxidase 1,ACOX1)基因进行克隆及生物信息学分析。根据GenBank中猪ACOX1基因序列设计特异性引物,利用RT-PCR技术对陆川猪ACOX1基因进行克隆、测序和生物信息学分析。结果表明,陆川猪ACOX1基因CDS全长1 986bp,编码661个氨基酸,陆川猪ACOX1基因与猪、牛、人、斑马鱼、鸡、猕猴、大鼠、小鼠、爪蟾序列同源性分别为99.5%、85.5%、87.1%、66.3%、75.6%、84.0%、82.3%、81.1%和69.1%。系统进化树分析结果表明,ACOX1基因在不同物种及进化的过程中具有高度保守性,蛋白质二级结构预测结果表明,陆川猪ACOX1蛋白没有信号肽,没有形成跨膜结构。本研究成功克隆了陆川猪ACOX1基因,为阐明其在陆川猪脂肪沉积及代谢方面的调控研究奠定了理论基础。; 关志惠陈宝剑潘天彪覃兆鲜刘嘉琪马青艳农素群谢炳坤; 关键词：陆川猪克隆

杜洛克、大白猪、长白猪纯种后代胴体品质及肌内氨基酸含量的比较被引量：4: 2016年; 该研究主要对杜洛克、大白猪、长白猪进行屠宰测定和背最长肌氨基酸含量及组成分析。结果表明,杜洛克、大白猪、长白猪的屠宰率分别为76.32%、76.54%、77.27%;眼肌面积分别为43.07 cm^2、53.96 cm2、50.94 cm^2;胴体瘦肉率分别为63.96%、64.84%、66.84%;背最长肌中的氨基酸总量分别为23.33%、23.26%、23.69%;鲜味氨基酸含量分别为17.05%、16.99%、17.34%;必需氨基酸含量分别为8.96%、8.98%、9.14%;3个品种猪的肌肉中均以谷氨酸含量最高,其次为天冬氨酸、赖氨酸、亮氨酸、精氨酸等,而胱氨酸、蛋氨酸含量最低。; 黄培超覃小荣梁龙华刘嘉琪覃桂额; 关键词：屠宰率眼肌面积胴体瘦肉率

猪繁殖与呼吸综合征病毒重组N蛋白原核表达及间接ELISA方法的建立: 2024年; 为制备猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)N蛋白多克隆抗体,建立检测PRRSV N蛋白抗体的间接ELISA方法,通过PCR扩增N蛋白基因,将N蛋白基因克隆至原核表达载体pET-32a(+),构建重组质粒pET-32a-N。将重组质粒转化至BL21(DE3)感受态细胞中,通过IPTG诱导N蛋白表达,将纯化后的重组N蛋白免疫小鼠,获得N蛋白多克隆抗体。将纯化后的N蛋白作为抗原,建立检测PRRSV N蛋白抗体的间接ELISA方法,并评估该方法的特异性、重复性和准确性。结果表明,表达的重组N蛋白呈可溶性,制备的N蛋白多克隆抗体ELISA效价能达到1∶2048000,IFA和Western blot结果表明制备的鼠多克隆抗体能特异性识别PRRSV N蛋白。建立的间接ELISA方法特异性良好,重复性试验变异系数均小于10%,且与同类型商品化试剂盒结果比较,符合率达到91.10%,可为PRRSV N蛋白的免疫学检测和结构功能的研究提供参考。; 覃建光姚静刘文波刘嘉琪陈国昌任同伟陈樱欧阳康欧阳康韦祖樟; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 N蛋白原核表达间接ELISA

妊娠母猪氨基酸需要的研究进展被引量：2: 2016年; 随着养猪业的不断发展,母猪日粮的营养配比也越来越精细化。妊娠母猪在整个妊娠期的营养需求是动态变化的,妊娠母猪的饲料从单一的配方,发展到妊娠前后期的不同饲料配方,再到如今的分阶段、分胎次的营养标准,妊娠母猪的饲料配方可谓是越来越精细化。若使用单一的饲料配方,不考虑妊娠前后期,必然出现母猪妊娠早期营养过剩,后期营养不足的现象;同样地,; 龙运艳邹知明覃小荣卢昱屹刘嘉琪; 关键词：妊娠母猪饲料配方胎次初产母猪营养需要量

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刘嘉琪