孟宝玺
- 作品数：10 被引量：23H指数：3
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- 人脂肪干细胞与软骨脱细胞基质3D打印构建三维细胞生物支架的研究被引量：2
- 2022年
- 目的人脂肪干细胞(hASCs)与软骨脱细胞基质(CAM)3D打印构建适合细胞生长的三维细胞生物支架。方法从郑州大学第二附属医院10例抽脂患者的脂肪组织中提取脂肪干细胞进行体外培养,取第3代hASCs进行软骨诱导,用阿利新蓝染色检测hASCs的软骨分化。通过脱细胞方法对猪耳软骨进行脱细胞,后对脱细胞效果进行检测。利用制备的CAM和海藻酸钠(SA)按(CAM∶SA 7∶3、6∶4、5∶5、4∶6)进行混合,用3D打印机打印成个性化三维生物支架,通过细胞计数试剂盒(CCK-8)进行支架细胞毒性检测,对不同比例支架的生物学特性如孔隙率、力学性能、降解率进行比较,找出最优的支架混合比例。用上述最优比例接种hASCs(1×10^(6)个)行3D打印,三维细胞生物支架体外培养1周后在倒置显微镜下观察细胞存活情况。组间采用t检验。结果hASCs传代后在显微镜下观察呈梭形、多角形,胞质丰富,胞核清楚。hASCs经软骨诱导剂诱导后,hASCs可向软骨分化。猪耳软骨经脱细胞后效果良好,内部无细胞残留,DNA残留量和未脱细胞软骨比较,差异有统计学意义(t=65.420,P<0.05)。支架浸提液和完全培养液分别培养hASCs比较,培养后第2、4、6天时间点,细胞增殖数量比较,差异无统计学意义(t=1.750、2.365、2.106、P>0.05)。3D打印不同比例的支架,CAM含量越多,降解速率越快,力学强度和孔隙率越小。其中5∶5和4∶6混合比例形成的支架生物学性能更优。hASCs(1×10^(6)个)混合这两种比例支架经3D打印形成个性化三维支架,活死细胞染色显示,第3天和第7天时间点,5∶5支架混合的hASCs活细胞更多。细胞增殖比较,第3天和第7天时间点,5∶5支架混合的hASCs增殖数量多余4∶6比例组,差异有统计学意义(t=4.350、4.922,P<0.05)。结论比例为5∶5的CAM-SA经3D构建的三维生物支架最适合细胞生长。
- 杨磊吴冲韩璞郭腾孟宝玺简玉洛马富廉王璐
- 关键词：人脂肪干细胞海藻酸钠3D打印细胞支架
- 3D打印技术在颅颌面多发性骨折患者治疗中的应用被引量：2
- 2021年
- 目的探讨3D打印技术(3DP)在颅颌面多发性骨折治疗中的应用效果。方法选择2018年9月至2021年1月郑州大学第二附属医院整形外科收治的48例颅颌面多发性骨折患者,术前运用计算机辅助设计,所有患者术前均行颅颌面部三维重建,将数据输入3D打印机,智能化地模拟颅颌面多发性骨折内固定手术,并打印3D模型。利用模型设计复位治疗方法:如设计手术切口,置入固定钛板的长度、定位及数目等,完成内固定置入手术。术前、术前3D模拟复位模型和术后分别测量:额结节至鼻根部点直线距离(双侧Fr-N),下颌角点至髁突点直线距离(双侧Co-Go),双侧额结节点直线距离(Fr-Fr′),鼻根部点至颏下点直线距离(N-Me),下颌角点至颏下点直线距离(双侧Go-Me),鼻根部点至眶下点直线距离(双侧N-Or)。对比分析患者术前、术前3D模拟复位模型和术后左右两侧Go-Me/Co-Go、Fr-N/N-Or、Fr-Fr′/N-Me及Or-Or′/N-Me,采用t检验进行数据分析,各组数据均服从正态分布。结果患者术后面部外观对称,颞颌关节功能得到改善,与术前设计吻合度较高,所有患者术后均未发生感染、神经损伤、咬合功能受限等并发症。患者术前与术后左右侧Go-Me/Co-Go比较差异有统计学意义(t=0.012、0.006,P<0.05),术前3D模拟复位模型与术后左右侧Go-Me/Co-Go比较差异无统计学意义(t=0.131、0.167,P>0.05);患者术前与术后左右两侧Fr-N/N-Or比较差异有统计学意义(t=0.050、0.044,P<0.05),术前左右两侧3D模拟复位模型Fr-N/N-Or比较差异无统计学意义(t=0.155、0.003,P>0.05);患者术前、术后Fr-Fr′/N-Me比较差异有统计学意义(t=0.065,P<0.05),术前3D模拟复位模型与术后Fr-Fr′/N-Me比较差异无统计学意义(t=0.119,P>0.05);术前及术后Or-Or′/N-Me比较差异有统计学意义(t=0.076,P<0.05),术前3D模拟复位模型与术后Or-Or′/N-Me比较差异无统计学意义(t=0.079,P>0.05)。结论 3D打印技术在颅颌面�
- 吴冲简玉洛孟宝玺马富廉郭腾王璐
- 关键词：3D打印三维重建
- 探讨分期同时手术矫正耳畸形与轻度半侧颜面短小的方法与效果被引量：2
- 2018年
- 目的探讨分期同时手术矫正耳畸形与轻度半侧颜面短小的方法与效果。方法对6例耳畸形伴半侧颜面短小患者,Ⅰ期在行自体肋软骨耳支架耳后皮下包埋的同时,取肋骨术区筋膜组织瓣填充患侧颌面发育不良处。6个月后Ⅱ期在行耳支架掀起耳廓成形的同时,行脂肪注射填充局部颜面凹陷。观察术后患者的颜面改善效果。结果所有患者术后面部整体形态均明显改善。1例耳部软骨支架吸收较多,5例耳部和面部形态均良好。结论分期同时手术矫正耳畸形与轻度半侧颜面短小,手术方法简单,效果良好,患者满意度高。
- 马富廉孟宝玺王璐简玉洛王传伟
- 关键词：耳畸形
- 矫正大疱性表皮松解症手部瘢痕挛缩畸形的手术方法探讨被引量：5
- 2021年
- 目的探讨两种矫正大疱性表皮松解症患者手部瘢痕挛缩畸形治疗方法的优劣。方法回顾性分析自2014—2019年,郑州大学第二附属医院整形外科收治的遗传性大疱性表皮松解症手部瘢痕挛缩畸形患者29例,分别采用纱布绷带固定法(10例,A组)和克氏针固定法(19例,B组)矫正瘢痕挛缩手指。术后随访6~24个月,统计手部再次出现瘢痕挛缩的时间,取平均复发时间,采用t检验比较的方法,运用SPSS 21.0统计软件分析两种方法的优劣。结果应用纱布绷带固定法的患者手部瘢痕挛缩再次复发的平均时间为(11.56±4.00)个月;应用克氏针固定法的患者手部瘢痕挛缩再次复发的平均时间为(16.47±2.95)个月。结果表明,应用纱布绷带固定法明显优于克氏针固定法。结论大疱性表皮松解症手部瘢痕挛缩矫正术,采用克氏针固定法维持时间长,且再次出现挛缩的时间晚,优于纱布绷带固定法。
- 孟宝玺简玉洛王璐刘怡伶马富廉焦心荷
- 关键词：大疱表皮松解症手部瘢痕挛缩手术方法
- 脱细胞基质与脂肪干细胞构建兔耳软骨的研究被引量：4
- 2019年
- 目的观察脂肪干细胞(adipose tissue-derived stem cells)与软骨脱细胞基质构建兔耳软骨的效果。方法从32例抽脂减肥患者的脂肪组织中提取脂肪干细胞体外传代培养。通过脱细胞方法用猪耳软骨制备天然生物支架材料,再用二代ADSC以5.0×107个/ml的细胞浓度接种于预成型的天然生物材料支架上,体外培养3d,形成细胞支架复合物。采用随机数字表法将32只新西兰大白兔分为对照组A、对照组B、对照组C和实验组,每组8只,均行耳软骨缺损建模。实验组、对照组A、对照组B分别将细胞支架复合物、脂肪干细胞、软骨脱细胞基质支架移植于耳软骨缺损处,对照组C则直接逐层缝合耳前组织和皮肤。术后16周后兔耳廓软骨取材,观察修复效果。新生软骨标本行甲苯胺蓝染色、HE染色、Ⅱ型胶原免疫组化及番红O染色观察,并行Ⅱ型胶原阳性染色结果定量分析以及耳软骨组织弹性检测。应用SPSS17.0软件进行统计学分析。结果大体观察见对照组(A、B、C)软骨缺损处由肉芽样组织充填,而实验组软骨缺损修复良好。实验组与对照组软骨缺损修复区组织湿重比较,差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色显示,3个对照组仅有纤维组织充填耳软骨缺损处,实验组耳软骨缺损处可见软骨陷窝形成。3个对照组修复区甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原免疫组化及番红O染色均为阴性,而实验组为阳性。耳软骨弹性常数检测,实验组新生软骨与正常耳软骨比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论脂肪干细胞与软骨脱细胞基质结合构建的兔耳新生软骨的力学和组织学已接近正常耳软骨。软骨脱细胞基质材料复合脂肪干细胞,对耳软骨缺损具有较好的修复重建能力,具有潜在的临床应用价值。
- 王璐任曼曼简玉洛孟宝玺马富廉王皖军郭淑英
- 关键词：耳软骨干细胞脂肪组织
- 脂肪干细胞与脱细胞基质在修复重建软骨中的研究被引量：2
- 2018年
- 临床上患者软骨缺损的修复重建、软骨的移植、器官的再造等采用取自体软骨的方法，存在新创伤、并发症多且创伤大等缺点，增加了患者的伤残和痛苦，限制了其临床应用。我们应用脂肪干细胞与脱细胞基质进行修复重建软骨的研究，探讨其修复重建软骨的可行性。
- 王璐简玉洛孟宝玺马富廉王皖军郭淑英
- 关键词：软骨缺损脱细胞基质脂肪干细胞自体软骨并发症
- 小分子干扰RNA沉默组蛋白去乙酰化酶1基因对皮肤鳞状细胞癌细胞增殖和凋亡的影响被引量：7
- 2016年
- 目的观察沉默组蛋白去乙酰化酶1（HDAC1）基因对人皮肤鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法人皮肤鳞状细胞癌细胞株（A431）分为3组：空白对照组（不予任何处理）、阴性对照小干扰RNA（siRNA）组（予以30nmol／L阴性siRNA）、siRNA组（予以30nmol／LHDAC1siRNA）。siRNA转染48h后，用反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）法和Western blot分别检测3组细胞HDAC1、p21和细胞周期蛋白（Cyclin）E的表达；噻唑蓝（MTF）法检测阴性对照组和siRNA组细胞增殖；流式细胞术检测3组细胞周期和凋亡变化。结果转染HDAC1siRNA48h后A451中HDAC1mRNA表达量为0．22±0．04，显著低于空白对照组（1．01±0．05）和阴性对照siRNA组（1．03±0．05），差异有统计学意义（P〈0．05）；Westernb lot显示HDAC1和CyclinE表达减少（P〈0．05），而p21表达增加（P〈0．05）；MTr法检测显示细胞增长抑制率增加呈时间依赖性，差异有统计学意义（P〈0．05）；流式细胞术检测结果显示细胞阻滞于G2／M期（P〈0．05），细胞凋亡增加（P〈0．05）。结论HDAC1siRNA能抑制A4S1HDAC1的表达、抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡。
- 王璐简玉洛李钢赵丽孟宝玺马富廉
- 关键词：皮肤鳞状细胞癌增殖
- 大疱性表皮松解症挛缩手与烫伤瘢痕手畸形的形态学对比研究
- 2022年
- 目的比较大疱性表皮松解症(EB)挛缩手与烫伤后瘢痕挛缩手的形态学异同。方法将大疱性表皮松解症挛缩手(A组,10例)与烫伤后瘢痕挛缩手(B组,10例)进行大体观察,手部行三维CT成像影像学检查,取挛缩组织行苏木精-伊红(HE)及马松(Masson)组织病理学检测,将大体观察、检测、检查结果比较。组间采用t检验。结果大体观察结果显示:A组各指均出现粘连挛缩,成握拳状,手部大部分功能受限;B组受累手指瘢痕挛缩,手及指功能部分受限。手部三维成像结果显示:两组受累手指都会出现相应的屈曲畸形,关节脱位。HE染色结果显示:A组组织表皮内、表皮与真皮交界均可见裂隙,真皮内胶原纤维均质淡粉红色,玻璃样变;B组组织胶原纤维纵横交错,均质淡粉红色,玻璃样变;Masson染色结果显示:A组胶原纤维密度(++),B组胶原纤维密度(++);阳性面积比值,A组为(70.55±18.06)%,B组为(61.06±8.18)%,差异无统计学意义(t=0.217,P>0.05)。结论大疱表皮松解症挛缩手与烫伤瘢痕挛缩手的临床及病理变化具有相似形态学变化。
- 孟宝玺马富廉郭腾王璐简玉洛
- 关键词：大疱性表皮松解症手部瘢痕挛缩形态学
- 负载真皮脱细胞基质的聚乳酸静电纺丝纤维敷料制备及检测
- 2024年
- 目的:聚乳酸(PLA)静电纺丝纤维与真皮脱细胞基质(ADM)结合制备适宜伤口愈合的敷料。方法:利用静电纺丝工艺制备不同质量浓度(10%、12%、14%)的聚乳酸(PLA)纤维膜,筛选出最佳浓度后测定一系列生物学性能。采用4%过氧化氢-6%氢氧化钠溶液浸泡法制备兔ADM,评价脱细胞程度。将纤维膜在质量浓度为5%的ADM溶液中孵育24 h,经干燥、辐照灭菌制成负载ADM的PLA纤维膜,评价生物相容性。动物实验:在新西兰兔背部皮肤制造急性创面研究纤维膜促进创面愈合的效果。结果:12%浓度PLA纤维膜性能最佳,平均孔隙率79.37%,纤维直径分布主要范围为0.4~1.0μm,平均吸水率为550.484%,最大拉伸强度可达5.74 MPa,完全培养基孵育12周失重率为12.47%。制备的ADM无细胞残留,DNA残留量(47.528±0.419)ng/mg,与未脱细胞真皮比较,DNA去除率高达96.01%,脱细胞效果良好,差异有统计学意义(t=47.750,P<0.01)。细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测脂肪干细胞增殖能力,48 h复合纤维膜浸提液培养吸光度值(1.121±0.013)与完全培养基培养吸光度值(0.934±0.043)比较,差异有统计学意义(t=7.181,P<0.01),说明复合纤维膜生物相容性良好。且动物实验复合纤维膜覆盖创面收缩速度最快,14 d时复合纤维膜组相对伤口面积分别与PLA组、ADM组、纱布对照组比较,差异有统计学意义(t=5.908、15.540、23.640,P<0.01)。结论:本研究制备负载ADM的PLA纤维膜性能良好,可促进兔表皮急性创面修复。
- 韩璞李钢简玉洛孟宝玺马富廉王璐
- 关键词：静电纺丝聚乳酸纳米纤维创面修复
- 不同阿片类药物用于先天性大疱表皮粘连松解术的麻醉效果观察
- 2021年
- 目的比较地佐辛、纳布啡与舒芬太尼用于先天性大疱表皮松解症(EB)粘连松解术的麻醉效果。方法选取择期行粘连松解术的27例EB患儿,性别不限,年龄3~10岁,ASAⅠ~Ⅱ级,体质量14~20 kg。采用随机数字表法分为3组(n=9例):S组(舒芬太尼0.2μg/kg)、D组(地佐辛0.2 mg/kg)和N组(纳布啡0.2 mg/kg)行麻醉诱导。3组均泵注丙泊酚8~10 mg·kg^(-1)·h^(-1)和瑞芬太尼0.2~0.3μg^(-1)·kg^(-1)·min^(-1)维持麻醉。记录麻醉前(T_(0))、麻醉诱导后(T_(1))、手术开始时(T_(2))、分离手指时(T_(3))、手术结束时(T_(4))的HR、RR、SpO_2。统计瑞芬太尼用量、苏醒时间,以及术中、术后不良反应发生率。结果与S组比较,D组和N组RR、SpO_2在T_(1)、T_(3)时间点增高,差异有统计学意义(P<0.05);D组RR、SpO_2在T_(1)、T_(3)时高于N组,但差异无统计学意义(P>0.05),HR在各时间点差异无统计学意义。3组瑞芬太尼用量、苏醒时间,以及体动例数差异均无统计学意义(P>0.05)。S组呼吸抑制发生率高于D组和N组,差异有统计学意义(P<0.05);D组和N组差异无统计学意义(P>0.05)。D组术后恶心、呕吐的发生率低于N组、S组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论地佐辛应用于EB粘连松解术,对患儿呼吸功能影响小,不良反应少,是一种效果好、安全性高的麻醉药物。
- 董真真白倩袁峰孟宝玺
- 关键词：粘连松解术地佐辛
