刘文丽
- 作品数:8 被引量:13H指数:3
- 供职机构:北京大学公共卫生学院更多>>
- 发文基金:北京市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- MnCl2和MPP^+诱导SK-N-SH细胞氧化应激及自噬的比较被引量:4
- 2017年
- 目的 研究锰和1-甲基-4-苯基吡啶(MPP^+)引起人神经母细胞瘤(SK-N-SH)细胞氧化应激和自噬的异同,进一步探讨锰神经毒性机制.方法 以0.0625、0.125、0.25、0.5、1.0和2.0 mmol/L MnCl2和MPP^+分别处理SK-N-SH细胞24 h,采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)试验检测细胞存活率;0.125、0.25、0.5 mmol/L MnCl2和MPP^+分别处理细胞24 h,采用流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)含量,激光共聚焦显微镜观察细胞自噬体,蛋白免疫印迹(Western blotting)法检测自噬相关蛋白P62和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达.结果 与对照组比较,0.0625-2.0 mmol/L MnCl2和0.125-2.0 mmol/L MPP^+处理组SK-N-SH细胞存活率均明显降低,且0.25-2.0 mmol/L MnCl2处理组SK-N-SH细胞存活率明显低于相同剂量MPP^+处理组(均P〈0.05);与对照组比较,0.125-0.25 mmol/L MnCl2和0.125-0.5 mmol/L MPP^+处理组SK-N-SH细胞内ROS含量均明显增加,0.25-0.5 mmol/L MPP^+处理组细胞内ROS含量明显高于相同剂量MnCl2处理组(均P〈0.05);与对照组比较,0.25-0.5 mmol/L MnCl2和MPP^+处理组细胞自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值均明显增加,P62表达均明显下降,且0.125-0.5 mmol/L MPP^+处理组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值明显高于相同剂量MnCl2处理组,0.125和0.25 mmol/L MPP^+处理组P62表达水平明显低于相同剂量MnCl2处理组(均P〈0.05).结论 MnCl2和MPP^+均可引起SK-N-SH细胞氧化应激,诱导自噬,且MPP^+对SK-N-SH细胞自噬的诱导作用明显高于MnCl2.
- 刘文丽窦长松王裕赵鹏傅娟玲姚碧云周宗灿
- 关键词:1-甲基-4-苯基吡啶自噬SK-N-SH细胞MPP+
- 氯化锰诱导原代星形胶质细胞的过度活化被引量:4
- 2016年
- 目的探讨氯化锰(MnCl_2)对于原代星形胶质细胞的影响。方法原代分离星形胶质细胞,培养后用星形胶质细胞特异性蛋白胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的抗体鉴定细胞,用不同剂量的MnCl_2处理24 h后MTT法检测星形胶质细胞的存活率,高内涵分析仪检测细胞面积和GFAP的表达,流式细胞仪检测细胞内ROS的变化。结果原代分离的细胞鉴定为星形胶质细胞,不同剂量的MnCl_2处理24 h后,星形胶质细胞的存活率随MnCl_2剂量的升高呈现剂量依赖性下降,细胞面积缩小,GFAP表达增加,细胞内ROS增多。结论 MnCl_2可以导致星形胶质细胞的过度活化。
- 董莉莎李学会刘文丽赵鹏姚碧云周宗灿
- 关键词:氯化锰星形胶质细胞过度活化GFAP
- MnCl2诱导SH-SY5Y细胞PINK1/parkin介导的线粒体自噬研究
- 【研究目的】探讨PINK1/parkin介导的线粒体自噬,在MnCl2诱导SH-SY5Y细胞毒性中的作用,以进一步阐明锰中毒的机制【研究方法】以人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞为模型,不同剂量的MnCl处理细胞24 h,...
- 张洪涛刘文丽董丽莎姚碧云
- 关键词:锰SH-SY5Y细胞PINK1PARKIN
- 文献传递
- 锰引起星形胶质细胞活化及其对锰诱导的SH-SY5Y细胞损伤的影响
- 【目的】探讨在锰引起的神经毒性中,活化的星形胶质细胞对神经元的影响及可能的影响机制。【方法】以新生24 h内的SD大鼠分离星形胶质细胞,并给予不同剂量的MnCl处理,MTT法检测MnCl对星形胶质细胞存活率的影响;以星形...
- 李学会董莉莎刘文丽姚碧云
- 关键词:锰星形胶质细胞活化AKTSH-SY5Y细胞
- 文献传递
- 基于高分化PC12细胞的神经毒性物质高内涵筛选方法的研究被引量:3
- 2016年
- 目的建立基于高分化PC12细胞模型的神经毒性物质高内涵筛选方法,并对该方法进行评价。方法应用高内涵筛选技术定量检测11种药物对高分化PC12细胞的细胞数量、线粒体质量、细胞核面积、细胞膜通透性、Mn SOD水平、γH2A.X水平、细胞面积、细胞圆度、细胞宽度、细胞长度和细胞宽长比等参数的影响。结果安眠酮、多虑平和地西泮等在抑制细胞存活的同时,引起线粒体质量改变,膜通透性增大,Mn SOD水平、γH2A.X水平升高,细胞长度减小、圆度增大、面积减小等;苯巴比妥、异戊巴比妥能够促进细胞存活或促进细胞神经突起生长。结论与文献已有数据进行比较,神经毒性检测正确率高,多参数表征的一般毒性较单一参数表征的一般毒性检测正确率要高。可使用高分化PC12细胞作为高内涵筛选的神经毒性评价模型,以细胞数量、线粒体质量、Mn SOD水平和γH2A.X水平作为细胞毒性指标,以细胞宽长比作为神经毒性指标,对神经毒性物质进行有效筛选。
- 祁妍敏李学会董莉莎高雅刘文丽赵鹏姚碧云
- 关键词:神经毒性
- α-synuclein、Parkin蛋白及自噬在锰和MPP+致神经毒性中的比较研究
- [目的]探讨α-syn、Parkin蛋白及自噬在锰致神经毒性和MPP+引起的PD中作用的异同。[材料和方法]以人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞为模型,MTT法检测不同剂量MnCl2、MPP+处理细胞24h对细胞存活率的影...
- 窦长松刘文丽智翠娜姚碧云
- 关键词:锰MPP+自噬PARKINSK-N-SH细胞
- 锰中毒和PD模型小鼠神经行为改变及损伤部位的比较研究被引量:3
- 2018年
- 目的探讨锰中毒和PD模型小鼠神经行为学及组织病理学的异同,为锰中毒的诊断和防治提供依据。方法成年C57BL/6雄性小鼠共80只,随机分为5组,每组16只,MnCl2低、中、高剂量组分别腹腔注射5、10、20 mg/kg MnCl2,PD模型组腹腔注射30 mg/kg MPTP,对照组注射等量生理盐水,5次/周,连续4周,每天观察动物一般情况。注射结束1周后,通过爬杆实验、旷场实验、水迷宫实验检测小鼠平衡协调能力、焦虑抑郁状态以及学习记忆等神经行为学改变;处死动物,显微镜下观察纹状体及黑质H-E染色病理切片,检查神经细胞病理变化。结果与对照组比较,MnCl2高剂量组小鼠体重明显降低,差异有统计学意义(P〈0.01)。与对照组比较,MnCl2和MPTP组小鼠爬杆实验总时间和转身时间明显增加差异均有统计学意义(P〈0.05),MnCl2中、高剂量组和MPTP组小鼠旷场实验穿过格子数、站立次数以及中央场活动时间明显减少(P〈0.05),MnCl2高剂量组及MPTP组小鼠水迷宫实验逃避潜伏时间增加且目标象限活动时间减少,差异均有统计学意义(P〈0.05)。与MPTP组比较,MnCl2高剂量组逃避潜伏时间明显增加,差异有统计学意义(P〈0.05);病理结果显示,与对照组比较,MnCl2及MPTP组嗜酸性水平增高,其中纹状体嗜酸性细胞数MnCl2高剂量组高于MPTP组,差异有统计学意义(P〈0.01),黑质嗜酸性细胞MnCl2组少于MPTP组,差异有统计学意义(P〈0.01)。结论锰和MPTP均可引起多巴胺能神经系统损伤,锰中毒导致的神经行为学改变及损伤部位与MPTP诱导的PD模型不完全一致。
- 窦长松智翠娜刘文丽付娟玲姚碧云
- 关键词:6-四氢吡啶神经行为学C57BL/6小鼠
- MnC12诱导SH-SY5Y细胞PINK1/parkin介导的线粒体自噬研究
- [研究目的]探讨PINK1/parkin介导的线粒体自噬,在MnCl2诱导SH-SY5Y细胞毒性中的作用,以进一步阐明锰中毒的机制[研究方法]以人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞为模型,不同剂量的MnCl2处理细胞24h,...
- 张洪涛刘文丽董丽莎姚碧云
- 关键词:锰PINK1PARKIN