梅圆圆 作品数:12 被引量:15 H指数:2 供职机构: 南开大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技重大专项 天津市自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 更多>>
大豆氨基酸透性酶基因GmAAP2-like 1的克隆及功能初探 被引量:2 2016年 氨基酸透性酶(amino acid permeases)在植物不同器官的氨基酸转运过程中发挥着重要作用,但迄今为止,大豆中氨基酸透性酶相关的研究甚少。本文利用大豆初生叶水培系统对大豆(Glycine max)品种‘Williams 82’进行缺氮处理后,发现与足氮对照相比,大豆初生叶中Gm AAP2-like 1基因的表达明显上调。对大豆不同器官中Gm AAP2-like 1的转录水平进行RTPCR检测,结果显示该基因在花、叶和茎中的表达量较高而在根和种子中表达量很低。构建Gm AAP2-like 1(无内含子)过表达植物表达载体,在转化农杆菌时发现,该载体转化农杆菌GV3101致死;改进载体构建策略,采用融合PCR方法,在Gm AAP2-like 1的第一个外显子后插入一段内含子序列,改进的载体可以成功转化农杆菌。应用农杆菌介导的花苞浸泡法转化拟南芥,对所获得的转基因拟南芥抗性苗进行基因组PCR和RT-PCR鉴定,共检测到8个Gm AAP2-like 1不同程度表达的转基因拟南芥株系,且其中的内含子都得到了正确的剪切。氨基酸有毒类似物(MSX)处理实验表明:转基因拟南芥对MSX处理比野生型更为敏感,暗示Gm AAP2-like 1具有运输谷氨酸等酸性氨基酸的功能。 李美美 夏铜梅 王丹 梅圆圆 王宁宁关键词:大豆 缺氮 融合PCR AtSARK关键自磷酸化位点的鉴定与功能研究 蛋白激酶和蛋白磷酸酶所催化的蛋白质可逆磷酸化反应常常作为调控植物特定发育信号通路的'开关',也是调控叶片衰老的重要因素。我们实验室在前期研究中分离鉴定了一个通过生长素和乙烯的协同作用正向调控拟南芥叶片衰老的LRR型双底物... 郭朝霞 龚雅茹 肖冬 徐欣欣 梅圆圆 王丹 王宁宁关键词:拟南芥 自磷酸化 类受体蛋白激酶 蛋白磷酸酶 叶片衰老 文献传递 PSA2在SSPP介导的衰老信号传递路径中的作用 2017年 利用半定量PCR实验证明了PSA2在叶片衰老过程中表达下调,同时发现psa2-1突变体较野生型早衰,并且荧光定量PCR显示其衰老相关标识基因均表达上调。另外,还利用酵母双杂交技术和植物体内双分子荧光互补技术验证了PSA2全长蛋白或不含信号肽的成熟蛋白均能与SSPP发生直接互作。本研究证明PSA2为叶片衰老的负调节因子且为AtSARK和SSPP介导的衰老信号传递路径的重要组分,为深入解析AtSARK和SSPP介导的叶片衰老分子机制奠定了基础。 温泽文 周洁 肖冬 曹庆玉 梅圆圆 王宁宁关键词:植物学 叶片衰老 叶绿体 ‘Micro-Tom’番茄SlSARK-like基因克隆及初步功能分析 被引量:1 2015年 从‘Micro-Tom’番茄(Solanum lycopersicum)中分离克隆了一个与叶片衰老相关、编码LRR型类受体蛋白激酶(receptorlike protein kinase,RLK)的基因。序列分析显示,该基因的编码产物与大豆和拟南芥中的SARK(SENESCENCE-ASSOCIATED RECEPTOR-LIKE KINASE)类似,都具有典型的LRR-RLK结构,且可能具有丝/苏氨酸和酪氨酸双底物特异性激酶活性,因此命名为SlSARK-like。半定量RT-PCR分析表明,无论是自然衰老还是AtSARK过表达诱导衰老的‘Micro-Tom’叶片中,SlSARK-like基因的表达水平都明显提高。进一步利用农杆菌介导的番茄转化技术获得了6个GVG:SlSARK-like转基因‘Micro-Tom’株系,发现DEX诱导SlSARK-like基因过表达导致转基因植株早衰,说明SlSARK-like基因对‘Micro-Tom’叶片衰老起正向调控作用。上述研究结果进一步支持了编码LRR-RLK的SARK基因参与叶片衰老调控的机制普遍存在于高等植物中。 王凤凤 赵曦娟 王丹 苏杨起 梅圆圆 王宁宁关键词:叶片衰老 一个大豆氨基酸透性酶基因功能的研究 氨基酸透性酶(amino acid permeases,AAPs)是一类在植物不同器官的氨基酸转运过程中均发挥着重要作用的氨基酸转运蛋白。无论是在植物的营养生长还是种子发育过程中,氨基酸的吸收和由'源'向'库'的转运都离... 徐伟 夏铜梅 刘生 梅圆圆 王丹 王宁宁关键词:大豆 游离氨基酸 文献传递 GmSARK^(⊿LRR)过表达拟南芥衰老相关的表型分析与分子鉴定 被引量:1 2021年 前期研究发现,大豆GmSARK基因编码一个典型的LRR型类受体蛋白激酶,并且为叶片衰老的正调控因子.构建了LRR结构域缺失型GmSARK(即GmSARK^(⊿LRR)),并通过农杆菌介导的遗传转化方法获得了3个诱导型启动子GVG驱动GmSARK^(⊿LRR)过表达的转基因拟南芥独立株系.衰老相关的表型分析和分子鉴定结果表明,GVG:GmSARK^(⊿LRR)丧失早衰表型,暗示着LRR基序在与配基结合和衰老信号传递中起重要作用.本论文的研究结果为深入解析SARK介导的衰老信号通路奠定了重要基础. 王亚南 孟涛 徐凡 梅圆圆 王宁宁关键词:叶片衰老 拟南芥 SAUR72在拟南芥叶片衰老调控中的作用机制 被引量:3 2018年 植物激素在叶片衰老过程中起着重要的调控作用。本课题组在前期利用拟南芥cDNA文库筛选叶片衰老负调节因子SSPP互作组分的过程中,发现一个生长素响应基因家族成员SAUR72可能与SSPP发生互作。本文首先利用酵母双杂交技术对SAUR72和SSPP之间的蛋白互作进行了验证,并进一步发现SAUR72基因的表达受到衰老诱导和SSPP过表达抑制;过表达SAUR72基因不但造成拟南芥成苗叶片早衰,还能促进幼苗下胚轴和主根伸长、根系等部位pH值下降,暗示着这一生长素响应基因是拟南芥叶片衰老的正调节因子,并可能通过抑制特殊磷酸酶活性、间接促进H^+-ATPase的活性上升而发挥作用。上述研究结果的取得,为明确生长素在叶片衰老调控中的功能奠定了基础。 周洁 温泽文 梅圆圆 王宁宁关键词:生长素 叶片衰老 拟南芥 过表达GmATG8c基因提高大豆的低氮耐受性和产量 被引量:6 2017年 大豆是一种高需氮素作物,其籽粒发育所需氮素在很大程度上来源于"源"器官中氮素的再动员,而细胞自噬是植物进行氮素再动员的主要形式之一。为了研究大豆细胞自噬关键基因GmATG8c的功能,本文利用35S启动子驱动GmATG8c基因在大豆中过表达。通过农杆菌介导的大豆子叶节转化法获得了3个独立的单拷贝35S:GmATG8c转基因大豆株系,半定量RT-PCR结果显示,所有转基因株系中目的基因均得到了高效表达。进一步对转基因大豆株系进行的低氮耐受性和产量相关性状分析结果表明,在低氮培养条件下,35S:GmATG8c转基因大豆的生长速率加快,二级分枝数和单株粒数增多,百粒重增加,单株产量显著提高。说明GmATG8c是一个具有提高NUE(nitrogen use effi ciency)育种潜力的基因。 徐伟 刘生 游翔 梅圆圆 王丹 王宁宁关键词:大豆 细胞自噬 参与叶片衰老调控的E3泛素连接酶KPIL基因的功能研究 衰老(Senescence)是植物叶片发育的最后一个阶段。做为一个受遗传程序严格调控的生命过程,衰老不仅对调节植物营养分配和增强环境适应性意义重大,更跟作物产量和品质息息相关。叶片衰老的严格有序调控表现在多种层次,其中蛋... 温泽文 梅圆圆 周洁 肖冬 柴文婷 王丹 王宁宁关键词:拟南芥 叶片衰老 E3泛素连接酶 乙烯 文献传递 大豆韧皮部氨基酸的提取方法及测定 2023年 大豆是一种重要的高需氮素经济作物,在其生长发育过程中“源”器官中的氮素以氨基酸的形式通过韧皮部转运至幼叶、根和种子等“库”器官,对大豆苗期的生长发育和最终产量性状的形成具有重要的作用.测定大豆“源”器官韧皮部汁液中氨基酸的含量和组成,对于解析大豆氮素的“源”、“库”输送能力,选育具有高氮素输送能力的大豆品种具有重要的意义.建立了一种大豆子叶叶柄韧皮部氨基酸的提取工艺,通过此方法对大豆幼苗子叶韧皮部氨基酸进行提取和测定,检测出19种氨基酸,其中天冬酰胺的含量最高,也验证了天冬酰胺是韧皮部的主要运输形式.此方法对筛选具有高氮素:“源”-“库”输送能力的大豆品种具有重要意义. 张宇擎 张小雪 刘生 梅圆圆 王丹 王宁宁关键词:大豆 子叶 氨基酸