- 丙酮酸乙酯对滑膜细胞HMGB1的影响及机制被引量：3
- 2014年
- 目的探讨丙酮酸乙酯对类风湿关节炎(RA)滑膜细胞高迁移率族蛋白-1(HMGB1)表达的影响及分子机制。方法将培养的RA滑膜细胞分为正常对照组、TNF-α组和丙酮酸乙酯+TNF-α组;采用RT-PCR法检测细胞HMGB1 mRNA表达;ELISA法检测细胞培养上清液中HMGB1、IL-6和IL-8含量;采用Western blot法分别检测滑膜细胞胞质和核内NF-κB变化;采用免疫荧光法观察NF-κB在细胞中的分布。结果 丙酮酸乙酯可抑制TNF-α诱导滑膜细胞IL-6、IL-8、HMGB1的分泌和HMGB1 mRNA的表达,以及NF-κB(p65)在滑膜细胞核内的表达和移位。结论丙酮酸乙酯能下调滑膜细胞HMGB1表达和抑制NF-κB信号通路活化,可能对RA发挥抗炎作用。
- 金小福蒋琼罗心静
- 关键词：类风湿关节炎高迁移率族蛋白-1滑膜细胞核因子-ΚB丙酮酸乙酯
- 低氧和IL-1β联合刺激对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞基质金属蛋白酶表达的影响及机制研究
- 2023年
- 目的探讨低氧和IL-1β联合刺激对类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)基质金属蛋白酶(MMP)-1、MMP-3、MMP-9水平的影响,并分析缺氧诱导因子1α(HIF-1α)通路和NF-κB通路在其中的调控作用。方法应用组织块法从临床RA患者滑膜组织分离原代FLS,一阶段实验中,细胞分为常氧组、低氧组、IL-1β组、IL-1β+低氧组;二阶段实验中,细胞分为IL-1β+低氧组、YC组、BAY组、YC+BAY组。采用ELISA法和Real-time PCR法分别检测MMP-1、MMP-3、MMP-9水平及MMP-1、MMP-3、MMP-9 mRNA表达水平,采用Western blot法检测HIF-1α和磷酸化NF-κB p65(p-p65)的表达,采用免疫荧光法检测p-p65的表达及核移位。结果与常氧组比较,IL-1β组MMP-1、MMP-3、MMP-9水平均升高(均P<0.05);而与IL-1β组比较,IL-1β+低氧组MMP-1、MMP-3、MMP-9水平均升高(均P<0.05)。与常氧组比较,低氧组、IL-1β组MMP-1、MMP-3、MMP-9 mRNA表达水平均升高(均P<0.05);而与IL-1β组、低氧组比较,IL-1β和IL-1β+低氧组MMP-1、MMP-3、MMP-9水平均升高(均P<0.05)。与常氧组比较,低氧组、IL-1β组HIF-1α和p-p65核移位明显增加,而IL-1β+低氧组HIF-1α和pp65蛋白表达水平及核移位进一步增加。YC或BAY预处理细胞后,IL-1β+低氧组MMP-1、MMP-3、MMP-9水平和mRNA表达水平均下降(均P<0.05)。结论低氧和IL-1β能协同促进RA关节滑膜组织中FLS生成MMP,而HIF-1α和NF-κB通路在RA炎症缺氧微环境病变机制中起重要作用。
- 蒋琼姚瑞峰伍启阳王国芬王俊松罗心静
- 关键词：滑膜细胞低氧缺氧诱导因子基质金属蛋白酶
