- SOCS3基因敲除促进小鼠脊髓损伤处巨噬细胞向M2型分化被引量:1
- 2016年
- 目的探讨条件性敲除细胞因子信号转导抑制蛋白3(socs3)基因后小鼠脊髓损伤处巨噬细胞表型变化及运动功能恢复情况。方法以神经系统条件性敲除SDCS3基因的基因工程小鼠(Socs 3fvft Nescre)(实验组)及未敲除SDCS3基因的同窝小鼠(Socs3ft)(对照组)为研究对象,每组40只。2组小鼠分别各取35只对T10节段脊髓施以钳夹伤,另5只仅做假手术对照。每组分别取15只损伤模型小鼠在术后3、7、14d用于免疫荧光染色检测Arginasel(巨噬细胞M2a型、M2c型表型标志物)及CD86(巨噬细胞M1型、M2b型表型标志物)表达;每组分别取剩余20只损伤模型小鼠在术后1、3、7、14d用于荧光定量RT-PCR检测Arg/nase1、CD206(巨噬细胞M2型表型标志物)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、CD32(E噬细胞M1型表型标志物1及SOCS3、信号传导与转录激活因子3(STTAT3)基因表达,并以假手术对照小鼠为基线;在术后1、3、7、14d采用BMS量表评价小鼠后肢及躯干运动功能。结果行为学实验结果显示:实验组小鼠BMS评分在术后3、7、14d明显高于对照组,差异均有统计学意义(p〈0.05)。对Iba1与CD86及Arginasel共染色细胞进行计数半定量分析发现:实验组中Ibal与Arginasel共染色阳性细胞在术后3、7、14d明显多于对照组,差异均有统计学意义(P〈O.05);实验组中Ibal与CD86共染色阳性细胞在术后7、14d明显少于对照组,差异均有统计学意义(P〈0.05)。荧光定量PCR结果显示:术后1、3d,实验组SOCS3基因表达量较对照组明显减低,差异均有统计学意义(P〈0.05)。术后3、7、14d,实验组STAT3基因表达量较对照组明显增高,差异均有统计学意义(P〈O.05)。与对照组相比,术后7d实验组Arginase1及CD206基因表达量明显增加,差异均有统计学意义(P〈0.05);与对照组相比,术后14d实验组CD206基因表达量
- 党圆圆张洪钿籍新潮吴翠莹陈晨杨艺徐如祥
- 关键词:脊髓损伤巨噬细胞
- 两种干细胞对颅脑创伤炎症反应调控作用的对比研究被引量:4
- 2015年
- 目的比较神经干细胞(neural stem cells,NSCs)与间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植对颅脑创伤(traumatic brain injury,TBI)后炎症反应的调控作用。方法将264只成年雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为假手术组(54只)和TBI组(162只),采用自由落体脑打击装置制备TBI模型并于伤后12 h进行NSS评分,将3~7分者按随机数字表法分为3组,每组54只,于伤后24 h将离体培养的同品系小鼠成体NSCs、MSCs和PBS分别定向注射到创伤模型鼠脑内。于移植后24、72 h和7 d处死动物,取脑组织病理切片染色,观察脑损伤修复和免疫细胞浸润情况;分别提取脑组织mRNA和蛋白检测细胞因子表达量。结果 1NSCs或MSCs移植7 d后,脑损伤较PBS处理组局限,组织内渗出减少。2NSCs或MSCs移植72 h和7 d后,脑组织内浸润的小胶质细胞/巨噬细胞数量明显少于PBS处理组(P〈0.05);NSCs移植7 d后,脑内浸润的T细胞数量明显少于PBS处理组(P〈0.05)。3MSCs移植后IL-6和TNF-αmRNA和蛋白水平在各时间点均低于PBS处理组(P〈0.05);NSCs移植后IL-10 mRNA水平在24 h和72 h明显高于PBS处理组(P〈0.05),其蛋白水平在72 h和7 d也较PBS处理组和MSCs移植组明显升高(P〈0.05)。结论 NSCs与MSCs可影响TBI后炎症反应中免疫细胞浸润和细胞因子表达,二者调控作用既有相同之处,也有明显差异。
- 高谋徐如祥杨志军董勤姚慧张洪钿杨阳刘宁陈晨朱建伟邹明明籍新潮
- 关键词:神经干细胞间充质干细胞颅脑创伤炎症反应细胞因子