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显齿蛇葡萄实时荧光定量PCR内参基因的筛选与验证被引量：19: 2017年; 目的筛选适用于显齿蛇葡萄Ampelopsis grossedentata实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,qRT-PCR)的内参基因。方法设计简并引物,采用RT-PCR从显齿蛇葡萄中克隆6个候选内参基因片段,包括肌动蛋白基因(Actin)、3-磷酸甘油醛脱氢酶基因(GAPDH)、18 S核糖体rRNA基因(18 S-rRNA)、α-微管蛋白基因(α-Tubulin)、β-微管蛋白基因(β-Tubulin)和多聚泛素酶基因(UBQ)。应用qRT-PCR技术检测这6个候选内参基因在显齿蛇葡萄不同组织器官中(茎尖、嫩叶、成熟叶、老叶、茎和根)的表达情况。借助Ge Norm、Norm Finder和Best Keeper 3种统计学软件综合评价6个内参基因的表达稳定性。通过苯丙氨酸解氨酶基因(Ag PAL)的表达分析对筛选出的内参基因进行稳定性验证。结果 18 S-rRNA、GAPDH和Actin的表达稳定性较好,适合作为显齿蛇葡萄不同组织基因表达研究的内参基因,以这3个基因为内参基因分析Ag PAL基因的相对表达量,结果发现它们在各组织器官中的表达变化趋势基本一致。结论确定显齿蛇葡萄qRT-PCR分析的合适内参基因,为后续相关基因表达研究奠定基础。; 许明伊恒杰赵帅张玉文杨志坚郑金贵; 关键词：实时定量PCR 内参基因肌动蛋白基因

巨胚稻OsGAD_3基因启动子的序列及活性分析被引量：1: 2015年; 本研究以富含γ-氨基丁酸的巨胚稻"Tge B"基因组DNA为模板,利用PCR技术扩增得到GABA合成关键酶基因Os GAD3的上游959 bp启动子序列。序列分析表明:Os GAD3启动子不仅含有转录必备的TATA box、CAAT box元件,还含有分生组织特异性表达调控元件CAT-box、CCGTCC-box以及一些非生物胁迫和激素响应元件等。将该启动子序列与GUS基因融合构建表达载体,转化水稻后进行GUS组织化学染色分析,结果显示,Os GAD3启动子驱动的GUS基因在转基因植株的根、茎中具有较高的表达活性,且在根尖和茎初生韧皮部区域的表达更为明显,在种胚及叶片切口处也能检测到GUS表达。浸水后种胚中的GUS活性显著提高,且随着浸水时间的延长呈逐渐增加趋势。研究结果为了解巨胚稻Os GAD3的表达调控机制提供了依据。; 许明赵帅林志明尹恒杰张玉文廖素凤郑金贵; 关键词：OS 启动子

一种从火龙果果皮中联合提取红色素和果胶的方法: 本发明公开了一种从火龙果果皮中联合提取红色素和果胶的方法，其具体是先将火龙果果皮切碎、漂烫、干燥、粉碎后，加乙醇浸提、过滤，分别收集滤液和滤渣；将滤液依次用聚乙二醇/硫酸铵双水相体系、三氯甲烷萃取纯化，得到粘稠膏状的火龙...; 许明郑金贵伊恒杰赵帅杨志坚程祖锌

藤茶香树脂醇合成酶基因编码区克隆及表达分析被引量：2: 2017年; 为研究藤茶(Ampelopsis grossedentata)三萜类化合物的生物合成,采用RT-PCR方法,从藤茶叶片cDNA中扩增得到香树脂醇合成酶(amyrin synthase)基因,命名为AgAS。该基因编码区长2 250bp,编码750个氨基酸,与葡萄的同源蛋白亲缘关系最近。亚细胞定位和Southern blot结果表明,AgAS编码蛋白主要定位于细胞核与细胞膜,在藤茶基因组中存在2个拷贝。实时荧光定量PCR结果显示,AgAS基因在紫芽藤茶的根、茎和叶均有表达,其中叶片中表达最高,茎次之,根中表达量最少,且随着叶片成熟程度的增加,表达量呈先升后降趋势;而在绿芽藤茶中,AgAS基因在叶片中的表达量随着成熟程度的增加呈上升趋势,根与茎中表达量相对较少。; 张玉文伊恒杰赵帅郑金贵许明; 关键词：中草药藤茶亚细胞定位荧光定量

一种从火龙果果皮中联合提取红色素和果胶的方法: 本发明公开了一种从火龙果果皮中联合提取红色素和果胶的方法，其具体是先将火龙果果皮切碎、漂烫、干燥、粉碎后，加乙醇浸提、过滤，分别收集滤液和滤渣；将滤液依次用聚乙二醇/硫酸铵双水相体系、三氯甲烷萃取纯化，得到粘稠膏状的火龙...; 许明郑金贵伊恒杰赵帅杨志坚程祖锌; 文献传递

青花菜MYB28、MYB29基因克隆与功能分析: 脂肪族芥子油苷（aliphatic glucosinolates，AGSL）是一种广泛存在于十字花科植物中的含氮、含硫的植物次生代谢产物，其降解产物（如萝卜硫素）不仅在植物防御、响应生物或非生物胁迫的生理过程中具有重要的...; 赵帅; 关键词：青花菜转录因子亚细胞定位功能分析

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赵帅