唐玉玲
- 作品数：8 被引量：10H指数：3
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 1,25(OH)_2D_3对人肾小球系膜细胞增殖及mTOR/p70s6K表达的影响
- 2015年
- 目的：探讨1,25-二羟基维生素D3[1,25（OH）2D3]对人肾小球系膜细胞增殖的影响及其在肾小球系膜细胞调控中对mTOR/p70s6K信号通路的作用。方法体外培养人肾小球系膜细胞，取传代培养至3～7代细胞分为4组：正常对照组（加含5%胎牛血清DMEM培养基），VD组[加1,25（OH）2D310-8 mol/L]，R组（加雷帕霉素5 mg/L），R＋VD组[加雷帕霉素5 mg/L及1,25（OH）2D310-8 mol/L]，干预48 h。采用细胞增殖与活性检测试剂盒CCK-8检测细胞增殖情况，流式细胞术检测细胞周期时相分布，免疫荧光法检测细胞中mTOR、p70s6K的表达情况。结果正常对照组、VD组、R组、R＋VD组：（1）吸光度值（A450）依次降低，组间多重比较差异均有统计学意义（均P＜0.05）；抑制率（IR）依次升高。（2）G1期细胞比例依次增加，S期、G2/M期依次减少，增殖指数（PI）依次降低，除R组与VD组比较差异无统计学意义外，其余组间多重比较差异均有统计学意义。（3）系膜细胞中mTOR、p70s6K蛋白表达强度均依次降低，除R组与VD组比较差异无统计学意义外，其余组间多重比较差异均有统计学意义。结论1,25（OH）2D3可显著抑制人系膜细胞增殖，且其可能通过抑制mTOR/p70s6K信号通路调控肾小球系膜细胞增殖。
- 唐玉玲马莉赵丹贾林杨锐杨晓萍
- 关键词：肾小球系膜细胞细胞增殖细胞周期1,25-二羟基维生素D3
- 活性维生素D3对人肾小球系膜细胞中mTOR/p70s6K表达的影响
- 目的: 探讨mTOR/p70s6K信号通路在人肾小球系膜细胞中的表达;阐明活性维生素D3在肾小球系膜细胞中对mTOR/p70s6K信号通路的调控作用，为临床上使用活性维生素D3治疗慢性肾脏病提供坚实的理论基础。 方法...
- 唐玉玲
- 关键词：慢性肾脏病人肾小球系膜细胞活性维生素D3蛋白表达
- 1,25-二羟基维生素D_3对人肾小球系膜细胞增殖、周期的影响及其机制被引量：3
- 2016年
- 目的观察1,25-二羟维生素D_3(1,25-(OH)_2D_3)对人肾小球系膜细胞株增殖及细胞周期的影响,并探讨其可能作用机制。方法对数生长期人肾小球系膜株细胞分为A、B、C、D组,分别加入终浓度为10^(-8)mol/L的1,25(OH)_2D_3+含5%FBS的L-DMEM培养基、5 mg/L雷帕霉素+含5%FBS的L-DMEM培养基、5 mg/L雷帕霉素+终浓度为10^(-8)mol/L 1,25(OH)_2D_3+含5%FBS的L-DMEM培养基。给药48 h时观测各组细胞增殖及细胞周期分布,检测各组细胞真核细胞翻译起始抑制因子4E结合蛋白(4E-BP1)、磷酸化4E-BP1蛋白。结果给药48h时A、B、C组的细胞凋亡率分别为38.02%、55.62%、99.23%,组间比较,P均<0.05。给药48 h时,A、B、C组G_1期细胞所占比例明显高于D组(P均<0.05),S、G_2/M期细胞所占比例明显低于D组(P均<0.05);B、C组G_1期细胞所占比例明显高于A组(P均<0.05),S、G_2/M期细胞所占比例明显低于D组(P均<0.05);C组G_1期细胞所占比例明显高于B组(P均<0.05),S、G_2/M期细胞所占比例明显低于B组(P均<0.05)。A、B、C组细胞4EBP1、磷酸化4E-BP1蛋白相对表达量及磷酸化4E-BP1/4E-BP1均低于D组(P均<0.05);B、C组细胞4E-BP1、磷酸化4E-BP1蛋白相对表达量及磷酸化4E-BP1/4E-BP1均低于A组(P均<0.05);C组细胞4E-BP1、磷酸化4EBP1蛋白相对表达量及磷酸化4E-BP1/4E-BP1均低于B组(P均<0.05)。结论 1,25(OH)_2D_3可抑制人肾小球系膜细胞株的增殖,阻滞细胞周期于G_1期,其机制可能为1,25-(OH)_2D_3下调4E-BP1的表达。
- 聂晴晴唐玉玲赵丹张春江杨晓萍
- 关键词：1,25-二羟维生素D3细胞增殖
- 整合素连接激酶抑制剂在人近端小管上皮细胞转分化中的作用
- 2016年
- 目的观察不同浓度整合素连接激酶（ILK）抑制剂QLT0267对高糖诱导的人近端肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化（TEMT）的作用及其机制。方法体外培养人近端肾小管上皮细胞（HK-2），建立TEMT模型，排除高浓度渗透压对TEMT的影响后，将HK-2细胞分为6组，分别给予不同浓度葡萄糖（GS）及QLT0267干预48h。四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖情况，计算细胞增殖抑制率；免疫荧光法检测细胞ILK、α平滑肌肌动蛋白（d．SMA）的表达；Western印迹法检测细胞ILK、蛋白激酶B（AKT）、磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）、α-SMA、E钙黏蛋白（E．eadherin）的表达。结果（1）与对照组相比，高糖组细胞ILK、p-AKT、α—SMA表达增高（均P〈0．05），E-cadherin表达降低（P〈0．05）。（2）与高糖组相比，浓度大于5Izmol／LQLT0267处理组的细胞增殖抑制率降低（P〈0．05）。（3）与高糖组相比，随着QLT0267浓度的增加，HK．2细胞P—AKT、ILK、α-SMA表达量逐渐降低（均P〈0．05），E—cadherin表达量逐渐增高（P〈0．05）。结论高糖可诱导HK-2细胞TEMT；ILK抑制剂QLT0267可能通过阻止ILK下游蛋白活化，部分抑制细胞增殖，延缓HK-2细胞TEMT进程。
- 贾林林智峰马莉唐玉玲杨锐杨晓萍
- 关键词：糖尿病肾病细胞转分化蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶
- 整合素连接激酶抑制剂QLT0267对TEMT过程中P38MAPK表达的影响被引量：1
- 2016年
- 目的探讨在高糖诱导肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化(TEMT)过程中,整合素连接激酶(ILK)抑制剂QLT0267对P38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)表达的影响。方法体外培养人近端肾小管上皮细胞(HK-2),分10组,每组给予不同浓度葡萄糖及QLT0267,干预48h。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况,计算半数抑制浓度(IC50);随后选取对照组、高糖组、DMSO组、QLT0267(IC50)组(使用QLT0267后,HK-2细胞数量减少一半所需的QLT0267药物浓度),免疫荧光法检测各组ILK、P-P38MAPK的表达;Western blot检测各组ILK、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化-蛋白激酶B(P-AKT)、PP38MAPK、P38MAPK、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,观察各组表达差异性,探讨在TEMT过程中QLT0267对P38MAPK的影响。结果 30mmol/L的葡萄糖干预48h HK-2细胞增殖显著,同时上调细胞中ILK、P-AKT、P-P38MAPK、α-SMA的表达;QLT0267在抑制HK-2细胞增殖的同时,可以通过下调ILK下游P-AKT的表达,阻止P38MAPK活化,进而减少HK-2细胞中α-SMA的表达,延缓TEMT进程。结论 QLT0267可能通过部分阻止P38MAPK的活化,从而延缓HK-2细胞TEMT进程。
- 林智峰贾林赵丹马莉唐玉玲杨锐杨晓萍
- 关键词：近端小管上皮细胞转分化整合素连接激酶P38丝裂原活化蛋白激酶
- 1,25 (OH)_2D_3对人系膜细胞增殖及PI3K/Akt信号通路的影响被引量：3
- 2016年
- 目的观察1,25-二羟维生素D_3〔1,25（OH）_2D_3〕对人系膜细胞（HMC）增殖及Akt、mTOR表达的影响,探讨PI3K/Akt信号通路在1,25（OH）_2D_3对HMC增殖调控中的作用。方法体外培养HMC,取传代培养至第3~7代细胞分为4组：正常对照组（N组）、1,25（OH）_2D_3组（10-8mol/L,VD组）、PI3K抑制剂干预组（LY294002 2μg/ml,LY组）,LY294002（2μg/ml）联合1,25（OH）_2D_3组（10-8mol/L）组（LY＋VD组）,干预48 h,倒置相差显微镜观察各组细胞生长,CCK-8法检测各组细胞增殖,流式细胞术检测各组细胞周期时相分布,Western blotting检测各组Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR表达的情况。结果各实验组吸光度值（A值）比较,差异有统计学意义（F=281.641,P〈0.01）,其中VD组、LY组和LY＋VD组A值均低于N组,LY＋VD组A值均分别低于VD组和LY组,差异均有统计学意义（P〈0.01）。各实验组G_2/M期比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。各实验组G_1期、S期和PI比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）;其中VD组、LY组和LY＋VD组G_1期均高于N组,S期和PI均低于N组,LY＋VD组G1期均高于VD组,S期和PI均低于VD组,差异均有统计学意义（P〈0.05）。各实验组Akt/β-actin、mTOR/β-actin灰度值比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。各实验组p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR灰度值比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;其中VD组、LY组和LY＋VD组p-Akt/Akt、p-nmTOR/mTOR灰度值均低于N组,LY＋VD组p-Akt/Akt、p-nmTOR/mTOR灰度值均低于VD组和LY组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论1,25-（OH）_2D_3可通过PI3K/Akt信号通路抑制体外培养HMC的增殖。
- 唐玉玲张春江马莉贾林杨锐杨晓萍
- 关键词：骨化三醇AKT肾小球系膜细胞细胞增殖
- P38MAPK抑制剂SB203580对高糖诱导HK-2细胞转分化的影响被引量：3
- 2016年
- 目的探讨不同浓度P38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)抑制剂SB203580在高糖诱导肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化(TEMT)过程中的机制及其较佳作用浓度。方法体外培养人近端肾小管上皮细胞(HK-2)并分为对照组(5.5 mmol/L GS)、DMSO组(5.5 mmol/L GS+30μmol/L SB203580等体积的DMSO)、高糖组(30mmol/L GS),以及30 mmol/L GS+5、10、20、30μmol/LSB203580处理的S5、S10、S20及S30组,干预48 h。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况,计算半数抑制浓度(IC50);选取对照组、高糖组、S30组,Western blot法检测P38MAPK、P-P38MAPK及α-平滑肌肌动蛋白(SMA)的表达、免疫荧光法检测α-SMA的表达。结果 (1)与对照组相比,DMSO对HK-2细胞增殖无显著抑制作用(P>0.05);高糖组、S5组HK-2细胞增殖增多(P<0.05);S20、S30组HK-2细胞增殖减少(P<0.05)。与高糖组相比,S5、S10、S20、S30组细胞增殖均受到抑制(P<0.05)。(2)与对照组相比,高糖组、S30组P-P38MAPK表达量增高(P<0.05)。与高糖组相比,S30组P-P38MAPK的表达量降低(P<0.05)。3组P38MAPK表达量无显著差异(P>0.05)。(3)与对照组相比,高糖组、S30组α-SMA表达量增高(P<0.05)。与高糖组相比,S30组α-SMA表达量降低(P<0.05)。结论 30 mmol/L GS可以诱导HK-2细胞TEMT;30μmol/L SB203580是抑制HK-2细胞TEMT的较佳抑制浓度,SB203580可能通过下调P-P38MAPK表达,从而抑制HK-2细胞增殖及胞浆中α-SMA的表达,延缓TEMT进程。
- 贾林林智峰马莉唐玉玲杨锐杨晓萍
- 关键词：上皮间质转分化P38丝裂原活化蛋白激酶SB203580
- 整合素连接激酶抑制剂QLT0267对肾小管上皮细胞转分化的影响被引量：1
- 2016年
- 目的观察不同浓度整合素连接激酶(ILK)抑制剂QLT0267在高糖下诱导人近端肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化(TEMT)的作用。方法体外培养人近端肾小管上皮细胞,分为4组:对照组、高糖组、QLT0267组、高渗组,干预48h。逆转录聚合酶链式反应检测纤维粘连蛋白(FN)m RNA及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)m RNA的表达,Western blot检测ILK、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化-蛋白激酶B(P-AKT)及α-SMA的表达,比较组间差异,探讨QLT0267对近端TEMT过程的影响。结果 130 mmol/L高糖可以上调人近端肾小管上皮细胞细胞中ILK、P-AKT、FN、α-SMA的表达。230 mmol/L甘露醇不能引起人近端肾小管上皮细胞细胞中ILK、P-AKT、FN、α-SMA表达变化。310μmol/L QLT0267抑制高糖诱导的人近端肾小管上皮细胞细胞AKT、FN及α-SMA的m RNA和蛋白表达。结论 130 mmol/L葡萄糖可以诱导人近端TEMT。2QLT0267通过抑制人近端肾小管上皮细胞细胞中ILK下游AKT的活化,进而抑制FN及α-SMA的表达,10μmol/L QLT0267可以抑制人近端TEMT。
- 林智峰贾林赵丹马莉唐玉玲杨锐杨晓萍
- 关键词：转分化近端小管上皮细胞整合素连接激酶
