王啸
- 作品数:1 被引量:6H指数:1
- 供职机构:杭州市质量技术监督检测院更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程更多>>
- 小麦球蛋白单克隆和多克隆抗体制备及建立酶联免疫吸附法快速检测技术被引量:6
- 2015年
- 目的建立小麦球蛋白的ELISA检测技术,用于蛋白质掺假以及过敏原成分的快速检测。方法从麦胚粉中提取球蛋白,抗原免疫Balb/c小鼠进行4次免疫后,通过脾脏细胞杂交瘤技术及间接ELISA筛选制备单克隆抗体,同时制备兔抗小麦球蛋白的多克隆抗体。通过棋盘滴定法,初步确定单克隆抗体和多克隆抗体的最佳工作浓度,建立双抗夹心ELISA。结果通过免疫和杂交瘤技术获得了抗小麦球蛋白的单克隆抗体,纯化后抗体的效价均达到1:107,通过免疫兔制备的多克隆抗体经纯化后效价在1:2.4×105左右,所建立的双抗体夹心ELISA方法最低检测限为10 ng/m L,与其他物种的蛋白不发生交叉反应。结论本文建立的双抗体夹心ELISA方法具有良好的特异性和灵敏度,为建立乳品中小麦成分掺假及过敏原成分快速检测提供理论依据。
- 赵凯贾彦博王啸丁枫芸肖海龙黄建萍
- 关键词:多克隆抗体酶联免疫吸附法