秦海彬
- 作品数：12 被引量：10H指数：2
- 供职机构：浙江工业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金浙江省教育厅科研计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 酿酒酵母ZJS10041及其在发酵产S-腺苷蛋氨酸中的应用
- 本发明公开了一种酿酒酵母ZJS10041及其在发酵产S‑腺苷蛋氨酸中的应用，将酿酒酵母ZJS10041接种至初始发酵培养基，在28‑32℃、100‑200rpm下发酵培养至OD<Sub>600</Sub>＝13‑15，补...
- 胡忠策潘俊超王远山秦海彬郑裕国
- 文献传递
- 产S-腺苷蛋氨酸酵母菌的诱变选育被引量：2
- 2020年
- 以选育产S-腺苷蛋氨酸的高产酿酒酵母菌株为目标,利用常温常压等离子体和137 Csγ-射线对菌株进行诱变。通过5轮常温常压等离子体诱变和4轮γ-射线诱变,结合乙硫氨酸、制霉菌素抗性筛选,获得突变株AC-10,摇瓶发酵48 h,其S-腺苷蛋氨酸产量达到1.15 g/L,与出发菌株相比提高了130.0%。摇瓶发酵最适条件为30℃、初始pH 5.5。经5 L发酵罐分批补料发酵68 h,S-腺苷蛋氨酸产量达到5.62 g/L。
- 秦海彬牛坤牛坤
- 关键词：S-腺苷蛋氨酸酿酒酵母诱变选育
- 一种生产3-羟基丙酸的重组大肠杆菌及应用
- 本发明公开了一种生产3-羟基丙酸的重组大肠杆菌及应用，所述重组大肠杆菌是将甘油脱水酶基因dhaB123、甘油脱水酶再激活因子基因gdrA、α-酮戊二酸半醛脱氢酶突变体编码基因TUkgsadh和甘油三磷酸脱氢酶编码基因gp...
- 郑裕国牛坤熊涛秦海彬黄建峰柳志强
- 文献传递
- α-酮戊二酸半醛脱氢酶的定点突变及酶学性质变化被引量：2
- 2017年
- 3-HP是一种性质优良的化学中间体,以甘油为底物生产3-HP的研究备受青睐,而限制3-HP产量的主要原因是Ald H活力过低。对源于Azospirillam brasilense的α-酮戊二酸半醛脱氢酶(KGSADH)基因同源建模和结构分析,采用定点突变方法得到高活力KGSADH,将突变酶表达纯化,探讨酶学性质的变化。结果表明,TU-KGSADH(E120D/P219A)酶活力达6.03U/mg,比原始酶比酶活提高了322%,最适温度由35℃降低为30℃,且热稳定性降低,最适p H为8.0,在p H 6.0-8.0条件下酶活力有所提高。Zn^(2+)对KGSADH的酶活有较强的抑制作用,而Co^(2+)、Fe^(3+)、Fe^(2+)对KGSADH的酶活有较大的激活作用。在酶的动力学方面,TU-KGSADH对乙醛的K_m由7.58降为6.28 mmol/L,V_(max)由10.6提高为12.3 U/mg。对酶学性质改变的因素分析发现,120位突变与最适p H下降和p H稳定性向酸性偏移有关,219位突变可能是最适温度和热稳定性降低的原因,为醛脱氢酶进一步定向改造提供参考。
- 秦海彬熊涛张博牛坤
- 关键词：定点突变表达纯化酶学性质
- 5 L发酵罐中棘白菌素B发酵工艺参数优化被引量：3
- 2018年
- 棘白菌素B(Echinocandin B,ECB)是抗真菌药物阿尼芬净的前体物质,主要通过微生物发酵合成。实验对构巢曲霉(Aspergillus nidulans ZJB09223)在5 L发酵罐中的培养条件进行了初步探索,考察了不同的搅拌桨类型、搅拌转速以及通气量等对棘白菌素B发酵过程的影响,为实现阿尼芬净的工业化大规模生产探明基本条件。结果表明,与双折叶式搅拌桨和框式搅拌桨相比,六直叶圆盘涡轮搅拌桨更适合ECB的发酵过程。在5 L机械搅拌式发酵罐中,最佳通气量为1. 7 VVM,在发酵前6 d,搅拌转速控制为600 r/min,后9 d搅拌转速控制为400 r/min,可以提高ECB的发酵产量。在该工艺条件下ECB发酵产量为608 mg/L,比优化前提高了193%。
- 胡晓龙秦海彬吴旭萍毛健邹树平牛坤
- 关键词：构巢曲霉搅拌转速
- 3-羟基丙酸生产菌关键酶的分子改造及其构建表达
- 3-羟基丙酸(3-HP)是一种重要的平台化学品,能够利用基因工程菌以甘油为底物进行发酵法生产。目前,文献报道的3-HP最高发酵产量为71.9 g/L,而有机酸的商业化生产需要达到100 g/L以上。因此,为了尽快实现3-...
- 秦海彬
- 关键词：3-羟基丙酸醛脱氢酶甘油脱水酶
- 文献传递
- 一种重组大肠杆菌及合成3-羟基丙酸中的应用
- 本发明公开了一种重组大肠杆菌及合成3-羟基丙酸中的应用，所述重组大肠杆菌是将甘油脱水酶基因dhaB123、甘油脱水酶再激活因子基因gdrA、α-酮戊二酸半醛脱氢酶突变体编码基因TUkgsadh和甘油三磷酸脱氢酶编码基因g...
- 牛坤郑裕国熊涛秦海彬黄建峰柳志强
- 文献传递
- 不同醛脱氢酶对重组克雷伯氏菌生产3-羟基丙酸的影响
- 2017年
- PCR扩增Cupriavidus necator Gab D4和Azospirillum brasilense KGSADH醛脱氢酶基因,分别与经改造获得卡那霉素抗性的p UC19质粒(p UC19Kan)连接,再转化至Klebsiella pneumoniae DSM2026,获得重组菌KpKan/KGSADH和KpKan/Gab D4。经摇瓶发酵,KpKan/KGSADH和KpKan/Gab D4的最高3-羟基丙酸(3-HP)产量分别为3.66与2.56 g/L,与未导入醛脱氢酶的K.pneumoniae对照菌相比,分别提高了352%与216%。对其他产物的研究表明,2株重组菌的1,3-丙二醇(1,3-PDO)的产量低于对照菌,而2,3-丁二醇(2,3-BD)和乙酸产量高于对照菌。该研究首次将C.necator Gab D4醛脱氢酶基因导入K.pneumoniae,并对比了KpKan/KGSADH与KpKan/Gab D4的3-HP产量,实验中确定的性能优良的发酵菌株为继续提高3-HP产量提供了帮助。
- 贾东旭陈铁男周佳锋牛坤秦海彬金利群
- 关键词：克雷伯氏菌甘油醛脱氢酶3-羟基丙酸
- 代谢工程改造Escherichia coli生产3-羟基丙酸
- 2017年
- 以提高3-羟基丙酸的产量为目标,对实验室构建的基因工程大肠杆菌进行改造,敲除形成副产物1,3-丙二醇的主要酶基因——乙醛脱氢酶基因yqh D,得到E.coli W3110Δyqh D(p CDFDuet-tac-gpd1-TUkgsadh/p ACYCDuet-tac-dha B1-4),该工程菌摇瓶发酵产量达到2.53 g/L,相比未敲除yqh D基因的菌株,产量提高了5.8倍。另外,敲除了甘油代谢途径中的抑制因子glpR基因,得到E.coli W3110ΔglpR(p CDFDuet-tac-gpd1-TUkgsadh/p ACYCDuet-tac-dha B1-4),该工程菌摇瓶发酵产量达到2.86 g/L,相比未敲除glpR基因的菌株,产量提高了6.7倍。后经5 L罐发酵培养后,3-羟基丙酸的产量提升到15.4 g/L。该实验为进一步利用大肠杆菌工程菌发酵生产3-羟基丙酸提供了研究基础。
- 程秀丽秦海彬熊涛牛坤
- 关键词：3-羟基丙酸基因敲除重组大肠杆菌
- 一种生产3-羟基丙酸的重组大肠杆菌及应用
- 本发明公开了一种生产3‑羟基丙酸的重组大肠杆菌及应用，所述重组大肠杆菌是将甘油脱水酶基因dhaB123、甘油脱水酶再激活因子基因gdrA、α‑酮戊二酸半醛脱氢酶突变体编码基因TUkgsadh和甘油三磷酸脱氢酶编码基因gp...
- 郑裕国牛坤熊涛秦海彬黄建峰柳志强
- 文献传递
