孟令楠
- 作品数:5 被引量:8H指数:2
- 供职机构:军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金:公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学更多>>
- H5N1亚型流感病毒血凝素(HA)蛋白的表达鉴定及免疫原性研究被引量:5
- 2016年
- 目的为了获得H5N1HA蛋白,利用昆虫杆状病毒表达系统表达了A/meerkat/Shanghai/SH-1/2012(clade2.3.2.1)的HA基因并获得重组H5N1亚型流感病毒HA蛋白。方法将H5N1亚型2.3.2.1谱系的HA蛋白基因扩增并克隆到pFastBacⅠ载体中,构建重组穿梭质粒,转染昆虫sf9细胞后获得重组杆状病毒,对大量培养后表达的H5N1HA蛋白进行SDS-PAGE、Western blot和间接免疫荧光检测。分别在0d和14d用纯化的表达产物HA蛋白免疫小鼠,免疫两周后进行H5N1攻毒试验,记录小鼠体重变化率及生存率。结果测序鉴定重组表达载体构建正确;SDS-PAGE显示纯化的表达蛋白分子质量为65ku;Western blot分析该蛋白能够被兔抗流感病毒IgG识别;鸡抗流感病毒抗体间接免疫荧光法测定HA蛋白的表达,在感染HA的昆虫细胞中出现特异性荧光;攻毒试验表明HA蛋白能够在小鼠体内诱导产生免疫应答并且保护H5N1流感病毒的致死性攻击。结论成功的表达了H5N1的HA蛋白,并且此HA蛋白能成功的诱导小鼠体内的免疫反应,并起到良好的保护作用。
- 孟令楠任志广冀显亮于竟杰李元果李胜楠于志君孙伟阳国娇赵永坤王铁成冯娜王化磊杨松涛高玉伟夏咸柱胡桂学
- 关键词:流感病毒疫苗杆状病毒表达系统
- 重组H7N9亚型流感病毒血凝素(HA)的表达及鉴定被引量:3
- 2016年
- 目的为了获得H7N9HA蛋白,利用昆虫杆状病毒表达系统表达了H7N9HA基因并获得重组H7N9亚型流感病毒HA蛋白。方法将H7N9亚型流感病毒的HA蛋白基因扩增并克隆到pFastBacⅠ载体中,构建重组穿梭质粒,转染昆虫sf9细胞后获得重组杆状病毒,对大量培养后表达的H7N9HA蛋白进行SDS-PAGE、Western blot和间接免疫荧光检测。分别在0d和14d用纯化的表达产物HA蛋白免疫小鼠。结果测序鉴定重组表达载体构建正确;SDS-PAGE显示纯化的表达蛋白分子质量为67ku;Western blot分析该蛋白能够被鸡抗流感病毒IgG识别;鸡抗流感病毒抗体间接免疫荧光法测定HA蛋白的表达,在感染HA的昆虫细胞中出现特异性荧光。结论成功的表达了H7N9的HA蛋白,并且此HA蛋白能成功的诱导小鼠体内的免疫反应,并起到良好的保护作用。
- 孟令楠任志广冀显亮李元果李胜楠于志君孙伟洋国娇赵永坤王铁成冯娜王化磊杨松涛高玉伟胡桂学夏咸柱YU Jing-jie
- 关键词:流感病毒杆状病毒表达系统
- 提供流感病毒异源保护的病毒样颗粒及其方法和应用
- 一种提供流感病毒异源保护的病毒样颗粒及其方法和应用,由依据昆虫细胞偏爱密码子优化后的H5N1流感NA‑HA‑M1基因与经酶切的pFastBac1载体连接,制得重组杆状病毒Bacmid质粒,并转染昆虫细胞得到重组杆状病毒,...
- 夏咸柱任志广高玉伟冀显亮孟令楠郑学星王化磊魏玉荣王铁成冯娜杨松涛赵永坤
- 文献传递
- 提供流感病毒异源保护的病毒样颗粒及其方法和应用
- 一种提供流感病毒异源保护的病毒样颗粒及其方法和应用,由依据昆虫细胞偏爱密码子优化后的H5N1流感NA-HA-M1基因与经酶切的pFastBac1载体连接,制得重组杆状病毒Bacmid质粒,并转染昆虫细胞得到重组杆状病毒,...
- 夏咸柱任志广高玉伟冀显亮孟令楠郑学星王化磊魏玉荣王铁成冯娜杨松涛赵永坤
- 马抗H7N9亚型流感特异免疫球蛋白F(ab’)<Sub>2</Sub>及其制备方法
- 本发明提供马抗H7N9亚型流感特异免疫球蛋白F(ab’)<Sub>2</Sub>及其制备方法,是将H7N9亚型流感病毒株A/shanghai2/2013的病毒灭活液与免疫佐剂混合作为免疫原,免疫健康马匹,获得高免血浆,分...
- 赵永坤杨松涛王承宇王化磊高玉伟万忠海张国利吴永魁黄耕李楚芳罗琴芳王铁成郑学星冯娜任志广王超孟令楠程楠冀显亮夏咸柱
- 文献传递