张鹏飞
- 作品数:23 被引量:10H指数:3
- 供职机构:广西大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学经济管理更多>>
- 水牛附睾不同部位精子超微结构及荧光标记差异分析被引量:1
- 2021年
- 哺乳动物精子经过附睾成熟后才能获得运动及受精的能力,为解释水牛精子在附睾中的成熟过程,本研究选用性成熟期的沼泽型水牛附睾,利用乙烯吡咯烷酮包裹的硅胶微小颗粒(Percoll)梯度离心纯化分别提取附睾头、体和尾部精子,应用计算机辅助精子分析系统(CASA)检测精子活力,透射电镜观察附睾不同部位精子的超微结构,对精子进行荧光标记后,利用流式细胞仪和荧光显微镜观察检测不同部位精子质膜完整率、线粒体鞘膜电位和顶体差异。结果表明,Percoll分离得到附睾头、体和尾3部位精子的纯度达95%,不同部位精子活力分别为8.35%、20.21%和65.60%;附睾不同部位精子都存在着结构完整的精子以及相同的畸形类型,附睾尾部精子线粒体鞘高膜电位比率最高,精子质膜完整率从附睾头部到尾部逐渐升高,精子顶体完整率从附睾头部到尾部逐渐升高。本研究直观地展示了水牛附睾不同部位精子特征以及差异,为研究水牛精子成熟机理提供理论依据。
- 何翁潭张鹏飞黄愉淋肖凯黄良凤陆阳清张明
- 关键词:附睾精子超微结构观察荧光分子探针顶体
- 抑制小鼠Iqcf5基因表达的shRNA及其干扰重组表达载体、构建方法和应用
- 张明赵秀玲潘宏王焕景濮黎萍张鹏飞陈富
- 精子发生是一个复杂精细的过程,在此过程中存在着严格的同源群现象和周期变化规律,受众多因素的协同调控。然而,对于哺乳动物精子发生的分子事件人们依然知之甚少。近年来,受各种因素影响,越来越多的人受到不育症的困扰,其中一半左右...
- 关键词:
- 关键词:精子发生基因表达男性不育症
- 珠江—西江经济带城市经济效率研究
- 2024年
- 文章以珠江—西江经济带11市为研究对象,构建随机前沿分析(SFA)模型对其2005—2021年的城市经济效率进行实证分析,结果表明:劳动力、资本对各市经济效率具有明显正向作用,土地具有负向作用;各市经济产出效率明显不均衡;能源消耗、对外开放程度有利于提高各市的经济效率,产业结构优化程度、基础设施完善程度、政府干预程度会抑制各市的经济效率提升。基于研究结果提出对策建议:完善区域合作机制,加强区域协调发展;合作共建园区平台,积极探索跨区域合作新模式;推进南宁强首府战略全面落地,提高南宁首位度;完善人才培养机制,发挥人才引领作用;强化用地保障,提高城市土地利用效率;加快基础设施互联互通,打造高效便捷的立体交通体系;深化经济体制改革,发挥市场在资源配置中的决定性作用;扩大对外开放合作,提高开放外商投资质量。
- 邹华玲张鹏飞
- 关键词:城市经济效率随机前沿模型
- 抑制小鼠Iqcf5基因表达的shRNA及其干扰重组表达载体、构建方法和应用
- 本发明公开了抑制小鼠Iqcf5基因表达的shRNA,该shRNA为shRNA‑Iqcf5‑107、shRNA‑Iqcf5‑257、shRNA‑Iqcf5‑425或shRNA‑Iqcf5‑500,它们分别具有序列表SEQ....
- 张明赵秀玲潘宏王焕景濮黎萍张鹏飞陈富美
- 文献传递
- 水牛热休克蛋白70基因克隆及其表达分析被引量:3
- 2021年
- 【目的】克隆水牛热休克蛋白70基因(HSP70)并进行生物信息学分析,同时明确HSP70基因在水牛成熟卵母细胞(MII期)和2-细胞期胚胎中的表达情况,为研究HSP70在水牛卵母细胞成熟及着床前早期胚胎发育中的作用机理提供理论依据。【方法】根据NCBI已公布的水牛HSP70基因mRNA预测序列(MH814759.1)设计引物,通过RT-PCR克隆水牛HSP70基因,运用DNAStar、MEGA 7.0、TMHMM 2.0及SignalP 4.1 Server等在线软件进行生物信息学分析;同时采用细胞免疫荧光分析HSP70在水牛成熟卵母细胞及2-细胞期胚胎中的表达情况。【结果】水牛HSP70基因编码区(CDS)长度为1926 bp,共编码641个氨基酸残基。克隆获得的水牛HSP70基因序列与NCBI已公布水牛HSP70基因mRNA预测序列(MH814759.1)的相似性高达97.7%;与牛、家犬、山羊、小鼠、绵羊和大鼠的HSP70基因序列具有较高的相似性,其中与牛的相似性高达99.1%。基于HSP70基因核苷酸序列相似性构建的系统发育进化树也显示,水牛与牛的亲缘关系最近。水牛HSP70分子量为70.27 kD,分子式为C3088H4967N8670972S15,理论等电点(pI)为5.67,不稳定系数为32.84,属于稳定蛋白;不存在跨膜结构及信号肽,主要定位于细胞质(60.9%)、细胞核(30.4%)及线粒体(8.7%),其亲水性较强;水牛HSP70蛋白结构以α-螺旋和β-折叠为主。HSP70在水牛成熟卵母细胞及2-细胞期胚胎中均有表达,且主要集中在细胞质。【结论】水牛HSP70基因在进化过程中具有高度的保守性,在水牛成熟卵母细胞和着床前早期胚胎中均有表达,且主要集中在细胞质,属于结构型HSP70。
- 汤玉燕姚顺濮黎萍赵秀玲陈东荣张鹏飞张明
- 关键词:水牛基因克隆细胞质
- 水牛睾丸曲精细管蛋白质组双向电泳方法的建立及优化被引量:3
- 2019年
- 建立并优化了沼泽型水牛睾丸曲精细管蛋白质分离的双向电泳体系,为后续水牛睾丸曲精细管蛋白质表达谱的鉴定和研究奠定基础。比较不同IPG胶条(线性与非线性)、胶条pH范围和蛋白质上样量这三个参数对双向电泳结果的影响。结果显示,采用上样量350μg的曲精细管总蛋白、24 cm且pH值4~7的线性IPG胶条能够更好地分离水牛睾丸曲精细管蛋白质,获得质量较好且分辨率较高的双向电泳图谱,得到大约486个蛋白点。双向凝胶电泳技术能够对水牛睾丸曲精细管蛋白质进行有效分离,并通过对双向电泳体系的优化可获得蛋白质点清晰且分辨率更高的双向电泳图谱。
- 张鹏飞黄愉淋耿双双陈富美付强黄凤玲陆阳清张明
- 关键词:水牛蛋白质组双向电泳
- 水牛卵巢黄体形成和退化的差异蛋白质初步研究
- 引言/目的卵巢作为雌性动物的重要生殖器官,在卵泡成熟排卵后形成黄体(corpus luteum,CL)。黄体能够分泌孕酮维持妊娠;如果未受精,则发生退化,开始下一次的发情周期。我国南方水牛不正常的发情周期较多,发情周期长...
- 陈富美王焕景赵秀玲濮黎萍张鹏飞张明
- 细胞荧光原位杂交方法
- 本发明公开了一种细胞荧光原位杂交方法,包括预处理和杂交,预处理采用75%的低渗液进行低渗处理;杂交之前进行鱼精DNA的预杂交试验,预杂交时间为1‑2h。实际使用表明,该法能够得到更为清晰、直观、准确的染色结果,实现了快速...
- 张明赵秀玲左二伟濮黎萍张鹏飞陈富美候振徐壮壮
- 文献传递
- 一种促进番茄开花结果的栽培方法
- 本发明属于农业栽培技术领域,具体涉及一种促进番茄开花结果的栽培方法,包括如下步骤:(1)选地、整地,(2)壮苗,(3)搭架,(4)修剪与促苗,(5)促花,(6)开花结果期,本发明所述的技术方案,能很好地促进花芽分化效果好...
- 张鹏飞
- 文献传递
- 水牛卵巢黄体形成和退化的蛋白质表达谱构建及生物信息学分析
- 2018年
- 本研究构建了水牛卵巢黄体形成及退化过程的定量蛋白质表达谱,从中寻找与水牛发情周期相关的重要蛋白质。为研究水牛卵巢周期性变化的分子机制提供蛋白质水平的数据支撑,进而为提高水牛繁殖效率奠定实验基础。以水牛排卵后的红体期(corpus hemorrhagicum,CH)、黄体期(corpus luteum,CL)和白体期(corpus fibrosum,CF)的卵巢作为研究对象,利用串联质谱标签(tandem mass tag,TMT)标记结合液质联用((liquid chromatography/mass spectrometry,LC-MS/MS)的定量蛋白质组学技术,采用相关软件对得到的差异表达蛋白质进行生物信息学分析。同时对与水牛发情周期相关的重要差异蛋白质:单核巨噬细胞分化抗原(CD14)、通用转录因子Ⅱ-Ⅰ(GTF2I)、羟基类固醇(17β)脱氢酶1(HSD17B1)、U6 sn RNA相关Sm样蛋白质(LSM1)和纤溶酶原激活物抑制物(SERPINE1)进行了qRT-PCR分析验证。结果显示,共鉴定得到2 343种蛋白质,其中差异表达蛋白质有284种(差异倍数≥2.0),初步构建了水牛卵巢黄体形成和退化的定量蛋白质表达谱。对其中的五种重要差异蛋白质(CD14、GTF2I、HSD17B1、LSM1和SERPINE1)进行qRT-PCR验证,结果有四种(CD14、HSD17B1、LSM1和SERPINE1)的qPCR结果与质谱结果相一致,仅GTF2I与质谱结果不一致,可能是由于GTF2I存在转录后调控。本研究首次从蛋白质水平对水牛卵巢排卵后的周期性变化的分子机制进行了探究,同时为其他家畜品种发情周期的研究提供了新的研究思路。
- 陈富美姚顺陈东荣徐壮壮候振濮黎萍张鹏飞赵秀玲张明
- 关键词:水牛发情周期定量蛋白质组学生物信息学