侯金超
- 作品数：22 被引量：57H指数：5
- 供职机构：浙江大学医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金宁波市自然科学基金河北省科技厅攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 苏拉明对脂多糖致小鼠急性肺损伤的防治作用被引量：5
- 2015年
- 目的 探讨苏拉明（suramin）对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱发小鼠急性肺损伤的防治作用及其分子机制.方法 24只健康清洁级雄性C57BL/6小鼠以随机数字法分为生理盐水对照组和苏拉明治疗组,分别于生理盐水和苏拉明处理后静脉注射LPS（5 mg/kg）建立肺损伤模型,并于造模后0h、24h及72 h,取肺组织进行苏木精-伊红染色（HE染色）评估生理盐水对照组和苏拉明治疗组的肺脏病理损伤程度;采用RT-PCR检测肺组织中肿瘤坏死因子（TNF-α）和白介素-6 （IL-6） mRNA的表达水平.体外分别用生理盐水和苏拉明处理人单核细胞白血病细胞（THP-1细胞株）后,给予100 ng/mL LPS刺激,建立体外脓毒症模型,应用Western Blot法检测LPS刺激后10 min、20 min、30 min细胞内丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinase,MAPK）信号转导通路关键分子ERK1/2、JNK及P38蛋白的磷酸化水平.组间数据比较采用独立样本t检验分析,P ＜0.05为差异具有统计学意义.结果 与生理盐水对照组相比,苏拉明可明显减轻LPS对小鼠（72 h）肺组织的损伤程度（生理盐水组,3.90 ±0.35;苏拉明组,2.50 ±0.12）（t =7.668,P＜0.01）,且显著性降低LPS处理24 h后肺组织TNF-α的表达水平（生理盐水组,8.35±1.63;苏拉明组,4.62±0.70）（t=4.187,P＜0.01）和IL-6 mRNA的表达水平（生理盐水组,10.53±2.10;苏拉明组,5.53±1.10）（=4.224,P＜0.01）;苏拉明可显著下调LPS刺激THP-1细胞后10 min、20 min及30 min胞内MAPK信号通路ERK1/2、JNK、P38蛋白的磷酸化水平.结论 苏拉明对LPS诱发的肺损伤具有保护作用,其下调促炎因子表达的机制可能与抑制单核细胞MAPK通路的活化有关.
- 郑君刚侯金超张凯黄长顺方向明
- 关键词：肺损伤脂多糖苏拉明炎性反应单核细胞MAPK
- Myristoyl—glycine修饰的S1PR3特异性激动肽跨膜激活效应研究被引量：2
- 2017年
- 目的拟通过合成1-磷酸鞘氨醇受体3（sphingosine 1-phosphate Receptor 3, S1PP,3）特异性激动肽并经肉豆蔻酰甘氨酸（myristoyl—glycine）修饰，研究其激活丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinases, MAPKs）通路的效应。方法设计合成源自七次跨膜受体S1PR3胞内第2个环的短肽，并经Myristoyl—glycine修饰，命名为GPS-725．017。Westernblot检测GPS-725．017对单核巨噬细胞（THP一1）MAPKs通路关键分子细胞外调节蛋白激酶 （ extracellularregulated protein kinase, ERK）及应激活化蛋白激酶（stress-activated protein kinase, JNK）磷酸化水平的影响。组内或组问不同浓度和不同时间点蛋白灰度值比较采用多因素方差分析。结果与溶剂对照组相比，30Ixmol／L或50μmol／L的GPS-725．017处理THP-1细胞10min，P-ERK水平显著升高[30μmol／L组：（3．10±0．27）vs．（7．98±0．45），P〈0．01；50μmol／L组：（4．78±0．44）vs．（25．98±2．32），P〈0．01]；50μmo]／L的GPS-725．017处理THP-1细胞5min、10min、20min和30min，与溶剂组相比，各时间点p-ERK或p-JNK水平均显著上升（均为P〈0．01）。结论源于S1PR3胞内第2个环并经Myristoyl—glycine修饰的短肽GPS-725．017，可跨膜显著活化MAPKs通路，本研究为临床靶向调控S1PR3，治疗炎症及脓毒症提供理论依据。
- 陈悦陈悦侯金超方向明
- 关键词：G蛋白单核巨噬细胞
- 脓毒症早期预警及干预治疗的基础和临床研究
- 方向明陈炯程宝莉徐志南陈齐兴侯金超陆新江吴水晶李会宋胜文虞朝辉黄磊谢郭豪
- 脓毒症是重症患者常见的死亡原因，全球每年有近2000万人罹患脓毒症，死亡率高达30-40％。因此，深入解析脓毒症的病理生理机制，探寻早期预警/靶向治疗措施，规范救治策略是亟待解决的难题。课题组历经10年余的攻关，取得了以...
- 关键词：
- 关键词：脓毒症生物标志物
- S1PR3激动剂KRX-725促进细菌清除影响脓毒症小鼠预后被引量：5
- 2016年
- 目的通过合成特异性S1PR3激动剂KRX-725，探讨S1PR3参与细菌清除的功能及其分子机制。方法20只健康清洁级雄性C57BL/6小鼠以随机数字法分为S1PR3特异性激动剂KRX-725治疗组和对照组。采用大肠杆菌（3×10^6）腹腔注射诱导脓毒症模型，治疗组小鼠于模型后立即腹腔注射KRX-725（10mg／kg），对照组给予等体积的溶剂，比较两组小鼠48h生存率（n=12）。模型后24h检测腹腔及血液细菌负荷（n=5），并取肺组织进行苏木精-伊红染色（HE染色）评估KRX-725治疗组及对照组的肺脏病理损伤程度（n=3）。体外采用大肠杆菌刺激腹腔巨噬细胞（细胞：细菌=1：10），分别加入KRX-725及其对照溶剂，采用CM—H2DCFDA探针标记细胞内活性氧，酶标仪检测检测不同时间点巨噬细胞活性氧水平。庆大霉素保护实验观察KRX-725对巨噬细胞的清除细菌能力的影响。生存率分析采用Log—rank test，组间数据比较采用独立样本t检验分析，P〈0．05为差异有统计学意义。结果KRX-725治疗组脓毒症小鼠48h生存率较对照组显著提高（P〈0．05）。脓毒症模型后24h，KRX-725治疗组较对照组血液及腹腔灌洗液中的细菌负荷显著降低（血液：t=3．17，P〈0．05；腹腔灌洗液：t=4．07，P〈0．01），同时KRX-725可显著降低脓毒症模型肺组织损伤程度（肺损伤评分：KRX-725组1．4±0．25，对照组2．4±0．25）（t=2．89，P〈0．05）。体外实验，KRX-725治疗组较对照组可迅速上调大肠杆菌刺激后20min及30min细胞内活性氧的水平（20min荧光强度：KRX-725组522．9±38．76，对照组385．9±15．90，P〈0．05；30min荧光强度：KRX-725组519．7±25．02，对照组384．5±15．28，P〈0．01）。庆大霉素保护实验发现，KRX-725可显著降低细菌吞噬后3h及6h巨噬细胞内存活的大肠杆菌的数量（3h：KRX-725组286．5±98．35，对照组710．8±107．8，P〈0．05；6h：KRX-7
- 张坚侯金超徐孟龙方向明
- 关键词：脓毒症活性氧细菌清除
- S1PR3特异性激动剂RY-15促进细菌清除的作用研究被引量：1
- 2018年
- 目的通过合成S1PR3特异性激动剂RY-15，研究其促进巨噬细胞清除细菌的作用，为临床转化研究提供依据。方法带FITC的RY-15与THP-1细胞共培养5min、10min、20min、30min，激光共聚焦显微镜下观察RY-15的入胞情况。庆大霉素保护实验观察GY-5和RY-15对巨噬细胞清除细菌能力的影响。Western Blot检测GY-5和RY-15分别对THP-1细胞ERK通路的磷酸化水平。结果激光共聚焦显微镜观察显示，RY-15作用THP-1细胞10min后，开始入胞；30min后，入胞效果显著。庆大霉素保护实验发现，RY-15可以显著降低细菌被吞噬后巨噬细胞内存活的大肠杆菌数量（P〈0．05），而GY-5则对巨噬细胞清除细菌作用没影响（P〉0．05）。Western Blot实验结果显示，GY-5、RY-15均可以使ERK通路磷酸化，而RY-15对其活化的作用更显著。结论S1PR3特异性激动剂RY-15可以进入到细胞内，促进巨噬细胞清除细菌，这一作用可能是通过ERK通路磷酸化来实现的。
- 王俊王俊侯金超侯金超郑君刚
- 关键词：巨噬细胞细菌清除
- C反应蛋白和原发性高血压血管内皮损伤标志物的研究进展被引量：17
- 2008年
- 炎症在原发性高血压血管内皮损伤的病理过程中发挥重要作用。C反应蛋白由肝脏产生并分泌,是评价炎性反应的一项敏感指标。C反应蛋白在血液循环中的含量和活性与原发性高血压患者某些血管内皮损伤标志物的浓度存在正相关,成为原发性高血压治疗的新靶点。
- 侯金超王发亮薄爱华
- 关键词：C反应蛋白原发性高血压血管性假性血友病因子血栓调节蛋白内皮素
- 苏拉明对脓毒症小鼠肺组织和循环炎症反应的抑制作用被引量：1
- 2015年
- 目的：观察苏拉明对脓毒症小鼠肺组织和循环炎症反应的抑制作用，并初步探讨其相关分子生物学机制。方法：①体内实验：将24只雄性C57BL／6小鼠按数字表法分为苏拉明组和生理盐水组，苏拉明组给予静脉注射5mg／kg苏拉明预处理。生理盐水对照组给予等体积0．9％氯化钠溶液，30min后采用静脉注射5mg／kg脂多糖（LPS）建立脓毒症小鼠模型，检测不同时间点肺组织和外周血TNF．仅和IL-15水平。②体外实验：苏拉明或生理盐水预处理人单核细胞系THP-1细胞30min后，用100ng／mL LPS刺激建立脓毒症细胞模型，于不同时间点收集THP-1细胞，提取RNA，定量PCR检测TNF—α和IL-6表达水平，并分离细胞浆和细胞核蛋白，蛋白质印迹法检测核因子KB（NF-kB）活性。结果：LPS干预后小鼠肺和外周血TNF—α和IL-6水平增加，提示成功建立脓毒症小鼠模型。与生理盐水组比较，苏拉明干预脓毒症小鼠模型作用24h时小鼠肺组织及外周血TNF—α和IL-6的水平降低（均P〈0．01）；而苏拉明作用72h时各组小鼠肺组织及外周血TNF-α和IL-15的水平差异无统计学意义（均P〉0．05）。体外实验结果显示：苏拉明预处理减少LPS刺激THP-1细胞后TNF-α和IL-6的表达水平（均P〈0．01），苏拉明预处理还减少LPS刺激30min、60min和90min后THP-1细胞NF-kB的活化水平（均P〈0．01）。结论：苏拉明可减轻小鼠全身及肺组织炎症反应，在对脓毒症肺损伤模型中具有保护作用，其炎症反应的调控可能与抑制脓毒症单核细胞的过度活化有关。
- 韩亮侯金超方向明
- 关键词：肿瘤坏死因子-ΑNF-KB
- 1-磷酸鞘氨醇在脓毒症单核细胞免疫炎症反应中的作用及机制研究
- 程宝莉金悦顾强侯金超方向明
- 肿瘤标志物Bcl-2和c-erbB-2在乳腺癌中的表达及其临床意义被引量：5
- 2008年
- 目的探讨肿瘤标志物Bcl-2和c-erbB-2在乳腺癌中的表达和两者的相关性。方法应用免疫组化方法对70例乳腺恶性肿瘤标本和24例纤维腺瘤标本进行Bcl-2和c-erbB-2癌基因蛋白检测。结果Bcl-2和c-erbB-2在乳腺癌中的阳性率分别为68.1%和67.1%;在纤维腺瘤中的阳性率分别为87.5%和0%。Bcl-2和c-erbB-2的阳性表达与有无淋巴结转移呈显著相关。乳腺癌中Bcl-2和c-erbB-2的阳性表达呈负相关(r=-0.28)。结论乳腺癌中Bcl-2的高表达提示患者的预后较好,c-erbB-2的高表达提示患者预后较差。
- 侯金超薄爱华王发亮吴力娟吴迎爽周宁
- 关键词：基因,BCL-2基因,ERBB-2
- TET2基因单核苷酸多态性与脓毒症易感性和预后的相关性研究被引量：3
- 2019年
- 目的探讨DNA羟甲基化酶TET2(ten-eleven translocation 2)基因多态性与脓毒症易感性及其预后的相关性。方法采用病例-对照关联研究方法,将99例脓毒症患者和107例对照者纳入本研究中,其中,脓毒症患者按照住院28 d转归不同分为存活组(56例)和死亡组(43例),对照组为外科大手术后未发生脓毒症的患者。根据现有的遗传关联和流行病学研究报道以及NCBI网站SNP database数据库筛选具有较高最小等位基因频率的遗传变异,与TET2基因功能密切相关的5个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP)位点rs6839705、rs7670522、rs7679673、rs7698522和rs10010325作为研究对象,通过TaqMan探针法实时荧光定量PCR技术检测5个SNPs位点在两组中的基因型和等位基因,用遗传分析法计算其分布频率,采用χ^2检验和Fisher精确概率法分析TET2基因5个位点多态性与脓毒症的易感性和预后的相关性。结果TET2基因5个SNPs位点基因型的分布频率在脓毒症组与对照组之间、脓毒症患者中存活组与死亡组之间差异均无统计学意义(P> 0.05);5个位点等位基因分布频率在脓毒症组与对照组之间、脓毒症患者中存活组与死亡组之间差异亦无统计学意义(P> 0.05)。结论本研究结果显示,TET2基因5个SNPs位点的多态性与脓毒症的易感性和预后均无显著相关性,结果尚需更大样本实验数据进一步证实。
- 张艳吴晓梁侯金超程宝莉陈齐兴方向明
- 关键词：脓毒症单核苷酸多态性基因型等位基因病例对照研究
