唐芳
- 作品数：2 被引量：10H指数：1
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- 重组诺如病毒GⅠ．1和GⅡ．4型类病毒颗粒免疫效果初步评价被引量：10
- 2016年
- 目的初步评价基于汉逊酵母表达系统的重组诺如病毒（norovirus，NoV）GⅠ.1和GⅡ.4型VP1蛋白类病毒颗粒（virus-like particles，VLPs）的免疫效果。方法将纯化后VLPs经SDS-PAGE和Western blot分析及鉴定，透射电镜观察颗粒形态，动态光散射仪分析颗粒粒径大小及分布情况。将GⅠ.1和GⅡ.4型VLPs按照不同的免疫方案免疫BALB/c小鼠，组织血清抗原（histo-blood group antigen，HBGA）-VLPs阻断试验检测50%阻断滴度（50% of blocking titer，BT50）。结果纯化后重组GⅠ.1和GⅡ.4型VP1蛋白纯度大于90%，Western blot分析可见特异性条带。VLPs直径为30～50 nm，界限清晰，颗粒直径与天然病毒颗粒接近，颗粒大小分布均一。免疫小鼠血清中佐剂组BT50明显高于无佐剂组。结论应用含铝佐剂的GⅠ.1和GⅡ.4型VP1 VLPs免疫小鼠，诱生了较好的HBGA阻断抗体，可作为诺如病毒疫苗的组分抗原。
- 马智静唐芳张学峰张靖侯俊伟陈实李启明
- 关键词：诺如病毒
- 反相高效液相色谱法检测重组类病毒颗粒疫苗原液中二硫苏糖醇的残留量
- 2015年
- 目的反相高效液相色谱法(reverse phase-high performance liquid chromatography,RP-HPLC)检测重组类病毒颗粒(virus-like particles,VLPs)疫苗原液中二硫苏糖醇(DL-dithiothreitol,DTT)的残留量,并对方法进行验证及初步应用。方法按设定的色谱条件对检测重组VLPs疫苗原液中DTT含量的RP-HPLC法进行专属性、精密性、准确性验证,确定方法的最佳线性范围及最低检测限,用该方法检测3批重组HPV单价疫苗原液中的DTT残留量。结果该方法检测DTT时,不受溶液中溶剂和蛋白的干扰;线性范围为1.5~15.0μg/ml(R^2=0.997),最低检测限为1.5μg/ml;该方法检测不同浓度DTT的平均相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)均<5%;重组HPV疫苗原液分别加入3、5、10μg/ml的DTT对照品溶液后,经该方法检测的回收率在80%~120%之间。3批次重组HPV单价疫苗原液中的DTT含量均小于1.5μg/ml。结论本实验的RP-HPLC法专属性、精密性良好,且准确可靠,可用于重组HPV疫苗原液中DTT残留量的检测。
- 张学峰张靖靳玉琴陈实唐芳李启明
- 关键词：反相高效液相色谱法二硫苏糖醇
