黄慧
- 作品数:16 被引量:81H指数:6
- 供职机构:中山大学附属第一医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金卫生部临床学科重点项目更多>>
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- 香丹注射液定向诱导大鼠骨髓间质干细胞分化为神经元的特点及其影响因素(摘要)
- 探讨了香丹注射液诱导成年SD大鼠骨髓间质干细胞(rMSCs)定向分化为神经元样细胞的特点和影响因素。
- 黄慧张成唐云安
- 关键词:骨髓间质干细胞神经元香丹注射液细胞分化
- 文献传递
- 脑梗死伴中心性浆液性脉络膜视网膜病变(附1例报告)
- 2005年
- 目的探讨脑梗死伴中心性浆液性脉络膜视网膜病变(CSCP)的临床特点。方法回顾性分析1例脑梗死伴CSCP患者的临床资料。结果本例为中年男性患者,无高血压、糖尿病、高脂血症以及相关血管炎的病史,表现头晕、行走不稳和视物障碍等,头颅MR I显示小脑半球梗死,荧光眼底血管造影提示右眼CSCP,经改善微血管循环、神经营养等治疗好转。结论对无脑卒中危险因素的脑梗死伴视物障碍的患者,要考虑CSCP的可能。
- 黄慧张成张为西
- 关键词:脑梗死
- 维生素A酸、锌等诱导大鼠骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞的研究被引量:6
- 2003年
- 目的 探讨维生素 A酸、锌及大鼠损伤脊髓提取液联合诱导大鼠骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞的可能性。方法 从大鼠骨髓中分离培养间质干细胞并传至第 4代 ,诱导前 2 4h加 10 ng/ m l碱性成纤维生长因子 ( b FGF)入培养液中以促分裂 ,再以含维生素 A酸、锌及大鼠损伤脊髓提取液的有血清培养液作诱导剂 ,观察细胞形态的变化 ,并采用免疫组织化学法 ,对诱导后第 12 d的细胞进行神经元特异性烯醇化酶 ( NSE)、神经丝蛋白( NF)和胶质纤维酸性蛋白 ( GFAP)表达的检测。结果 诱导后第 12 d部分细胞不仅在形态上表现为神经元样 ,而且呈 NSE及 NF阳性表达 ,GFAP阴性。结论 经维生素 A酸。
- 唐云安王瑞淑张成刘玉清徐培渝黄慧
- 关键词:维生素A酸锌骨髓间质干细胞神经元样细胞细胞分化
- 家族性肌萎缩侧索硬化症转基因鼠的繁殖和鉴定被引量:3
- 2006年
- 目的建立家族性肌萎缩侧索硬化症(FALS)转基因模型鼠的繁育方法,并对其子代鼠进行基因鉴定。方法(1)以6只B6SJL SOD1G93A/+半合子雄鼠与6只B6SJLF1/J+/+雌鼠(1∶1)交配;(2)由鼠尾血提取基因组DNA,PCR扩增hmSOD1基因的片段,电泳后观察结果;(3)对PCR产物进行纯化测序,并通过BLAST验证。结果6对种鼠交配产鼠仔53只,存活率为98%(52/53);G93A hmSOD1阳性鼠约占44.2%(23/52);PCR扩增产物分别为内对照(IL-2):324 bp;Tg(hmSOD1):236 bp;测序证实PCR产物的基因序列和hmSOD1基因片段中的序列一致,并存在G93A突变。结论B6SJL-Tg(SOD1-G93A)1Gur/J雄鼠与B6SJLF1/J雌鼠配种能成功繁育出Tg(hmSOD1)阳性的ALS半合子子代鼠;本实验的PCR法能准确鉴定hmSOD1基因阳性鼠,并证实该转入的基因按近似孟德尔方式遗传,为ALS实验研究奠定了基础。
- 黄慧张成席静姚晓黎邱国光熊符
- 关键词:肌萎缩侧索硬化症繁殖转基因基因鉴定
- 脑源性神经营养因子体外诱导骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞被引量:17
- 2004年
- 目的探讨脑源性神经营养因子(BDNF)体外诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)分化成神经元样细胞的作用及其对诱导后的神经元样细胞保护作用,为治疗神经系统疾病提供更优良的细胞。方法体外培养MSCs至第5代后,分别用BDNF、β-巯基乙醇(β-ME)诱导MSCs,诱导后的第1、3和6小时计算两组神经元样细胞数,对各时间点两组神经元样细胞阳性率进行了比较;诱导后行神经细胞标记抗体的免疫细胞化学、RT-PCR及蛋白质印迹鉴定。结果两组诱导剂诱导后的细胞均呈神经元样细胞的形态;BDNF组诱导分化后细胞的存活时间远较β-ME组长;BDNF组在诱导后6h近于诱导高峰,而β-ME在诱导2h即达高峰,但随后神经元样细胞渐死亡。免疫细胞化学结果显示在两组诱导后细胞的巢蛋白(Nestin)、神经细胞特异性烯醇化酶(NSE)、微管相关蛋白-2(MAP-2)、神经丝蛋白(NF)表达均呈阳性,而胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达呈阴性;RT-PCR显示NSE、NFL,MAP-2的mRNA表达阳性,GFAP有较弱的表达;蛋白质印迹可见两组诱导剂诱导的细胞均表达神经元的特异性标记抗体NSE。结论BDNF能单独诱导MSCs分化形成神经元样细胞,而且分化后细胞的存活时间长,有望用于治疗脑缺血、神经变性等疾病。
- 黄文张成陈松林张为西姚晓黎曾缨黄慧冯善伟柳太云
- 关键词:骨髓间充质干细胞脑源性神经营养因子神经元诱导分化
- 肌萎缩侧索硬化症药物治疗的研究进展被引量:3
- 2006年
- 肌萎缩侧索硬化症(ALS)是一种运动神经元的进行性变性疾病。其发病机制未明,目前缺乏特效治疗。我们对近年来药物:抗兴奋性氨基酸毒性、神经营养因子、抗凋亡、抗炎性类药物等治疗ALS的研究进展进行了综述。
- 黄慧张成
- 关键词:肌萎缩侧索硬化症药物
- 人骨髓间质干细胞治疗肌萎缩侧索硬化症模型小鼠的行为学和病理学研究被引量:4
- 2010年
- 目的:研究静脉移植人骨髓间质干细胞对肌萎缩侧索硬化症(ALS)模型小鼠生存期和病理变化的影响。方法:体外培养扩增人骨髓间质干细胞(hMSCs),流式细胞仪鉴定hMSCs的性质及纯度,微量尾静脉血提取模型小鼠DNA,PCR扩增鉴定肌萎缩侧索硬化症模型小鼠(SOD1-G93A阳性小鼠)。将3×106个第5代hM-SCs尾静脉移植入预放疗8周的SOD1-G93A阳性小鼠,用Weyd4分法进行评定移植小鼠和未治疗小鼠的生存期、发病时间,尼氏染色计数脊髓前角运动神经元,组织DNA提取、PCR检测人特异性基因β-globin基因来验证hMSCs在受体小鼠中的植入。结果:生存分析显示尾静脉移植hMSCs的ALS模型小鼠生存期比未治疗小鼠延长18d,延缓发病14d;尼氏染色显示在16周、20周移植小鼠脊髓前角大运动神经元计数多于未治疗小鼠;终末期hMSCs移植小鼠中,在中枢神经系统可检测到人特异性该基因。结论:hMSCs可经过尾静脉移植在ALS小鼠中长期植入,延长生存期,减少脊髓前角运动神经元的丢失,有一定的治疗作用。
- 赵翠萍张成黄慧周畅
- 关键词:人骨髓间质干细胞肌萎缩侧索硬化症
- 香丹注射液定向诱导大鼠骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞被引量:15
- 2004年
- 目的 :研究香丹注射液对成年SD大鼠骨髓间质干细胞 (rMSCs)的诱导分化作用。方法 :rMSCs取自大鼠的下肢骨 ,贴壁筛选法和营养缺陷培养基 (α MEM完全培养液 )分离纯化。加碱性成纤维生长因子 (bFGF)预诱导第 5代的rMSCs 2 4h ,换无血清培养液 (D/F12 +N2 +bFGF)和香丹注射液 (1%~ 5 % )诱导 6~ 8h ,观察细胞形态变化 ;细胞免疫化学和反转录 PCR法鉴定神经元标记物 (神经元特异性烯醇化酶NSE、神经丝蛋白NF 2 0 0、微管相关蛋白MAP 2及胶质纤维酸性蛋白GFAP)的表达及相对表达量 ,并得到相应的诱导率。结果 :诱导 3h ,rM SCs出现神经元样的形态学变化 ,诱导 6~ 8h ,神经元的诱导率达 83 5 %± 3 8% ;诱导组中 ,神经元样细胞NSE、NF和GFAP的阳性率分别为 82 9%± 2 98%、84 1%± 4 4 5 %、3 4 9%± 1 6 7% ;对照组细胞和诱导组未变化细胞上述染色均呈阴性 ;RT PCR法示 :只有诱导组有NSE、MAP 2 (HWM )、GFAP的表达且前两者的表达量均分别高于后者 (P <0 0 1)。结论 :1%~ 5
- 黄慧唐云安张成
- 关键词:香丹注射液诱导率神经元样细胞GFAP骨髓间质干细胞
- 异体骨髓干细胞移植后假肥大型肌营养不良症模型鼠膈肌dystrophin表达及病理改变被引量:7
- 2006年
- 目的探讨骨髓干细胞移植对假肥大型肌营养不良症(DMD)模型鼠-mdx鼠膈肌的治疗效果。方法取雄性SD大鼠骨髓干细胞经尾静脉植入放疗处理后的8周龄雌性mdx鼠(n=18)。于移植后4、8、12周各取6只mdx鼠的膈肌行 HE染色、抗肌萎缩蛋白(dystrophin)免疫荧光检测以及dystrophin mRNA的RT-PCR分析,同时用正常C57鼠及放疗而未移植的mdx鼠作为对照,另进行PCR反应检测实验鼠膈肌内Sry(Y染色体的性别决定区)基因。结果移植后mdx 鼠膈肌间质内炎性细胞浸润较放疗而未移植mdx鼠有所减少;移植后核中心移位纤维比例[移植后4、8、12周分别为 (15.58±0.91)%、(12.50±1.87)%、(10.17%±1.17)%]较未移植mdx鼠(19.5±1.87)%显著减少。移植后dystrophin免疫荧光阳性细胞比例[移植后4、8、12周分别为(1.00±0.32)%、(6.00±1.05)%、(11.92±1.11%)]较未移植mdx鼠(O.17±0.41)%显著增加。RT-PCR结果显示C57鼠膈肌的dystrophin mRNA相对含量(0.63±0.04)最高;而未移植mdx鼠的膈肌中未检测到dystrophin mRNA;移植后的mdx鼠膈肌中mRNA的表达水平(移植后4、8、12周分别为0.19±0.05、0.26±0.06、0.36± 0.04)随时间推移逐渐增高;移植后各时间点mdx鼠膈肌Sry基因均为阳性。结论骨髓干细胞系统移植mdx鼠可以恢复部分膈肌的dystrophin表达,改善膈肌的病理,骨髓干细胞移植有希望成为全身治疗DMD的有效方法。
- 张雅妮张成于美娟王淑辉李美山黄慧熊符冯善伟柳太云卢锡林
- 关键词:假肥大型肌营养不良症MDX鼠膈肌抗肌萎缩蛋白
- 家族性ALS的SOD1基因突变及发病机制研究进展被引量:5
- 2004年
- 肌萎缩侧索硬化症(ALS)是运动神经元病的最常见类型。部分家族性肌萎缩侧索硬化症(familial ALS,FALS)与超氧化物歧化酶(SODl)基因突变相关。本文介绍人的正常 SODl 和突变 SODl 基因及其表达蛋白的特点,并简述人突变 SODl 的转基因模型,也对 FALS 中突变 SODI 的致病机制进行了总结和探讨,为 ALS 的研究和治疗策略提供新的思路。
- 黄慧张成
- 关键词:SOD1基因突变发病机制肌萎缩侧索硬化症