胡森
- 作品数：64 被引量：285H指数：10
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 猪传染性胃肠炎病毒S基因B和C抗原位点片段克隆序列分析及原核表达被引量：4
- 2005年
- 猪传染性胃肠炎病毒 (TGEV) S蛋白可诱导中和抗体 ,是主要保护性抗原 ,N端抗原位点 B和 C在猪呼吸道冠状病毒(PRCV)中缺失[1 ,2 ,5] 。体外扩增 TGEV S基因 B、C抗原位点 35 7bp片段 (TS)。核苷酸序列与氨基酸同源性分析表明该片段较为保守。将 TS克隆到原核表达载体 p GEX- 6 P- 1中 ,转化大肠杆菌中。经 IPTG诱导后 ,SDS- PAGE分析目的蛋白与谷胱苷肽硫转移酶 (GST,大小约为 2 6 ku)融合后大小约为 4 0 ku,目的蛋白分子量约为 13.2 ku,优化表达条件后表达量达 37.9%
- 胡森姜骞师东方李勐于天飞王君伟
- 关键词：C抗原点片克隆猪传染性胃肠炎病毒TGEV
- 抗埃博拉病毒VP40蛋白单克隆抗体的制备及在抗原捕捉ELISA中的应用被引量：9
- 2008年
- 本研究以原核表达、纯化的扎伊尔株埃博拉病毒(Ebola virus,EBOV)VP40蛋白片段免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术制备单克隆抗体,获得一株分泌抗EBOV VP40蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞系。以重组杆状病毒表达EBOV VP40蛋白为抗原,经Western blot和间接免疫荧光检测该单克隆抗体显示出良好的特异性免疫反应。采用该株杂交瘤细胞系经腹腔注射接种8日龄BALB/c小鼠,制备腹水,并经纯化和HRP标记,获得HRP标记的抗EBOV VP40蛋白单克隆抗体。从而,初步建立一种抗原捕捉ELSIA诊断方法,以原核表达EBOV VP40蛋白片段兔抗血清为一抗,应用HRP标记的抗EBOV VP40蛋白单克隆抗体检测杆状病毒表达的重组EBOV VP40蛋白显示出良好的敏感性和特异性。结果表明,初步建立的抗原捕捉ELSIA诊断方法有希望成为一种理想的检测EBOV感染的诊断方法。
- 王淑杰王喜军胡森秦立廷林祥梅步志高
- 关键词：单克隆抗体
- 表达小反刍兽疫病毒F蛋白的重组山羊痘病毒疫苗的研究被引量：7
- 2009年
- 本研究利用gpt筛选基因和eGFP报告基因纯化筛选重组小反刍兽疫病毒(PPRV)F基因的重组山羊痘病毒(rGPV-PPRV-F),并经过PCR鉴定。免疫荧光和蛋白印迹试验都证实重组病毒能够感染绵羊羔羊睾丸细胞并表达PPRVF蛋白。以2×106PFU的rGPV-PPRV-F皮内注射免疫山羊3只,并于首次免疫后第28d以相同剂量进行二次免疫。分别于一免后21d和二免后14d采血后分离血清进行病毒中和试验。结果表明,一免后21d山羊痘病毒(GPV)中和抗体效价依次为1∶40、≥1∶80、≥1∶80,PPRV中和抗体效价依次别为1∶20、1∶40、1∶20,全部阳转;二免后14d,GPV中和抗体效价≥1∶80,PPRV中和抗体效价依次为1∶20、1∶80、1∶40。本研究为小反刍兽疫重组山羊痘疫苗的产业化奠定了基础。
- 曲林茂陈伟业胡倩倩胡森张倩支海兵黄克和步志高
- 关键词：小反刍兽疫F蛋白重组疫苗中和抗体
- 小反刍兽疫重组山羊痘病毒活载体疫苗
- 本发明提供小反刍兽疫重组山羊痘病毒活载体疫苗，其包括：(1)GPV弱毒疫苗，其作为载体；(2)PPRV疫苗的病毒囊膜表面融合蛋白F基因或血凝素蛋白H基因，其作为目的免疫基因；和(3)筛选基因，其包括gpt，和报告基因eG...
- 步志高胡森陈伟业
- 文献传递
- 小反刍兽疫重组山羊痘病毒活载体疫苗
- 本发明提供小反刍兽疫重组山羊痘病毒活载体疫苗，其包括：(1)GPV弱毒疫苗，其作为载体；(2)PPRV疫苗的病毒囊膜表面融合蛋白F基因或血凝素蛋白H基因，其作为目的免疫基因；和(3)筛选基因，其包括gpt，和报告基因eG...
- 步志高陈伟业胡森
- 猪传染性胃肠炎病毒TH-98株S基因5′端部分片段克隆及序列分析被引量：3
- 2004年
- 本研究扩增出猪传染性胃肠炎病毒 (TGEV) TH- 98株 S基因 5′端 6 72 bp片段 (TS1) ,包括 B、C两个主要抗原位点。将该片段克隆到 p MD 18- T载体上 ,经鉴定 TS1片段正确插入 p MD 18- T载体上。序列测定和分析表明 ,该片段的核酸序列与国外 TGEV毒株 Miller,Purdue15 ,FS772 /70等有很高的同源性 ,达 96 .88%以上 ,氨基酸同源性为 95 .0 9%以上 ,抗原位点 C(S蛋白第 4 8位氨基酸 )的丝氨酸变为脯氨酸。本研究首次克隆国内分离株 TH- 98株 S基因含有抗原位点 B、C且在 PRCV中缺失的片段。为进一步揭示 TGEV强弱毒株差别的分子机制和分子诊断的研究奠定了重要基础。
- 胡森王君伟姜骞李一经
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒S基因克隆
- 表达SARS冠状病毒核蛋白重组病毒及其制备方法
- 本发明公开了一种能够在昆虫细胞中表达SARS冠状病毒核蛋白的苜蓿银蚊夜蛾核多角体重组病毒，该重组病毒的保藏号为CGMCC No.1279，该重组病毒由下述方法制备而成：将SARS冠状病毒核蛋白基因亚克隆至pFastBac...
- 步志高胡森
- 文献传递
- 猪传染性胃肠炎病毒S基因B和C抗原位点片段在毕赤酵母中的表达被引量：4
- 2010年
- 采用基因重组的方法构建了含有猪传染性胃肠炎病毒S基因B和C抗原位点片段的巴斯德毕赤酵母Pichiapastoris分泌型表达载体pPIC9K-ts,经线性化后采用电穿孔法将其导入毕赤酵母GS115中,大量筛选后获得高效表达外源蛋白的毕赤酵母工程菌株GS115/pPIC9K-ts。表达蛋白经Dot-ELISA检测具有良好的抗原性。本研究为TGE的血清学检测方法的建立提供了必要的物质基础。
- 于天飞王君伟胡森靳淼
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒S基因抗原位点毕赤酵母
- 重组布氏杆菌BP26蛋白和OMP31蛋白作为间接ELISA诊断抗原的研究被引量：16
- 2006年
- 目的传统布氏杆菌病血清学方法因其抗原构成复杂,存在较严重的交叉免疫反应性,导致结果判定困难。BP26及OMP31分别为布氏杆菌细胞周质蛋白及外膜蛋白,在感染牛、绵羊、山羊、犬和人类均为优势免疫原,且在抗原性上具有较好的布氏杆菌种属特异性。方法以大肠杆菌表达、纯化的BP26和OMP31重组蛋白为包被抗原,初步建立了检测血清特异抗体的间接ELISA方法,并以现地牛布氏杆菌普查检测血清100份为样本,与传统的试管凝集试验进行了比较研究。结果试管凝集试验血清样本阳性率为15%(15/100);BP26包被抗原ELISA检测判为阳性的12个样本中有11为试管凝集反应阳性,相对阳性率为73.3%,二者阳性符合率为92%(11/12);而采用OMP31为包被抗原,阳性检出率为0(图5)。结论被检测区域阳性牛主要感染布氏杆菌为牛种布氏杆菌(B.abortus天然缺失OMP31基因);BP26作为间接ELISA包被抗原用于牛布氏杆菌血清学检测具有良好的特异性及较好的敏感性。
- 陈伟业王淑杰王永胡森王清华辛九庆佟有恩黄克和步志高
- 关键词：间接ELISA试管凝集试验
- 无需噬斑克隆和筛选标签的山羊痘病毒重组系统及双表达PPRV H/F蛋白疫苗的构建
- 本发明公开了一种无需噬斑克隆和筛选标签的山羊痘病毒重组系统及双表达PPRV H/F蛋白疫苗的构建，该重组系统不但可以构建单表达、双表达的重组病毒或重组疫苗，甚至可以构建表达三个蛋白以上的重组病毒或重组疫苗，由该重组系统获...
- 步志高陈伟业胡森
- 文献传递
