刘宏霞
- 作品数:6 被引量:6H指数:2
- 供职机构:郑州大学更多>>
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- 相关领域:医药卫生更多>>
- PDX-1联合利拉鲁肽诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为胰岛样细胞的效果被引量:4
- 2016年
- 目的:探讨胰十二指肠同源盒-1(PDX-1)联合利拉鲁肽诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化为胰岛样细胞(IPCs)的效果。方法:构建真核表达载体p EGFP-pc DNA3.1(+)-PDX-1,脂质体介导其转染贴壁培养法分离得到的大鼠BMSCs,用潮霉素筛选稳定转染细胞PDX-1-BMSCs。将BMSCs和PDX-1-BMSCs分别用50 nmol/L利拉鲁肽或培养液培养10 d,然后ELISA法检测细胞上清胰岛素浓度,real-time PCR法检测细胞中Tle、Nkx6.1、Ngn3、Nestin、PDX-1 mRNA的表达。结果:4组细胞诱导过程中形态上趋向胰岛样细胞分化;利拉鲁肽和PDX-1均可诱导BMSCs胰岛素分泌水平增加(P<0.05);PDX-1可促进BMSCs中PDX-1、Ngn3、Nkx6.1、Tle mRNA的表达(P<0.05);利拉鲁肽可促进PDX-1、Ngn3 mRNA的表达(P<0.05);两者有协同作用的趋势。结论:PDX-1联合利拉鲁肽可以诱导BMSCs向IPCs分化并分泌胰岛素。
- 闫淑芳吴敬刘宏霞杜少斐张会峰史晓阳袁倩袁慧娟
- 关键词:利拉鲁肽骨髓间充质干细胞胰岛样细胞
- 胰十二指肠同源盒1诱导不同代别干细胞分化为胰岛样细胞移植对1型糖尿病大鼠的疗效观察
- 2016年
- 目的:通过胰十二指肠同源盒1(PDX-1)转染不同代别大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)诱导分化为胰岛样细胞,进而移植治疗1型糖尿病SD大鼠,观察干细胞移植对1型糖尿病的疗效。方法采用PDX?1转染第3代和第5代BMSCs诱导为胰岛样细胞,双硫腙染色鉴定并测定其胰岛素分泌水平。链脲佐菌素(STZ)制备1型糖尿病SD大鼠模型,将45只成模SD大鼠按随机数字表法分为3组:移植组A、移植组B、模型对照组,每组均为15只,分别经尾静脉注入第3代BMSCs+PDX-1、第5代BMSCs+PDX-1、等量生理盐水干预28 d;另取15只健康SD大鼠作为正常对照组,经尾静脉注入等量生理盐水。监测各组大鼠移植第0、7、14、21和28天血糖、空腹胰岛素和C肽水平;第21天4组大鼠均行糖耐量实验;第28天取各组大鼠胰腺组织进行免疫组化观察细胞存活及胰岛细胞状况。采用单因素方差分析进行组间数据比较。结果自移植第14天,移植组A和B血糖开始下降,胰岛素和C肽量开始升高,其中第21和28天移植B组的血糖均显著低于A组[(21.90±0.26)比(23.60±1.49) mmol/L、(21.80±1.32)比(24.20±2.06) mmol/L,t=9.65、12.73,均P〈0.05],而同时点胰岛素和C肽显著高于A组(t=8.73、12.51、18.36、25.12,均P〈0.05)。糖耐量实验显示移植组B血糖曲线下面积显著小于移植组A [(1809.0±2.6)比(2301.0±6.8) mmol·L^-1·min,t=5.241,P〈0.05]。免疫荧光检测显示移植组A和移植组B大鼠胰腺组织中均有胰岛素阳性细胞存活,移植组B中胰岛素阳性细胞比例显著高于移植组A (48.0%±1.3%比32.8%±3.2%,t=8.38,P〈0.05)。结论 PDX?1转染的第5代BMSCs对1型糖尿病大鼠的疗效优于PDX?1转染的第3代BMSCs。
- 袁慧娟闫淑芳刘宏霞杨俊朋薛丰田张会峰赵志刚
- 关键词:糖尿病大鼠骨髓间充质干细胞
- 高糖在联合转录因子诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为胰岛样细胞中的作用
- 2017年
- 目的 探讨高糖在胰-十二指肠同源盒因子-1(Pdx-1)、神经元素3(Ngn 3)诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)分化为胰岛样细胞(IPC)中的作用.方法 构建真核表达载体pcDNA3.1(+)/(zeo)-Ngn 3、pcDNA3.1(+)-Pdx-1,贴壁培养法分离Sprauge-Dawley雄性大鼠BMSC,流式细胞术鉴定BMSC,脂质体介导转染BMSC,并筛选稳定转染细胞培养于高糖(4.5 g/L) DMEM培养液,RT-PCR检测Ngn 3、巢蛋白、Pdx-1 mRNA的表达,ELISA法检测胰岛素浓度.结果 分离的细胞表面高表达CD44、CD105,而低表达CD34,符合BMSC特征.诱导过程中BMSC形态上趋向IPC分化,高糖培养组较低糖培养组细胞上清胰岛素浓度明显提高(F=25.77,P<0.05),高糖质粒培养组Pdx-1、Ngn 3及巢蛋白mRNA表达水平明显高于高糖培养组及质粒转染组(F=35.12、12.76、8.34,P均<0.05).结论 高糖对Pdx-1联合Ngn 3诱导BMSC向IPC分化具有促进作用.
- 闫淑芳杜少斐吴敬刘宏霞袁慧娟
- 关键词:高糖骨髓间充质干细胞胰岛样细胞
- Graves眼病并眼型重症肌无力两例报道
- 2016年
- Graves眼病( Graves′ophthalmopathy)是一种易侵犯眼外肌的自身免疫性疾病。甲亢可以合并重症肌无力( myasthenia gravis)已众所周知, Graves 眼病合并重症肌无力则很少见, Graves眼病合并眼肌型重症肌无力( ocular myasthenia gravis, OMG)更罕见。在此我们将讨论近1年我科门诊和住院患者中诊断的2例Graves眼病合并OMG,旨在通过分析这2例患者的临床表现及诊疗过程,并结合文献复习总结其临床特征,提高对该病的临床认识,减少误诊漏诊情况。
- 张会峰马香香袁慧娟马跃华虎子颖刘宏霞邓欣如袁倩任琢琢赵志刚
- 关键词:GRAVES眼病眼型重症肌无力眼肌型重症肌无力自身免疫性疾病住院患者诊疗过程
- 幽门螺杆菌感染学龄期儿童营养管理方案构建及效果评价
- 2023年
- 目的构建幽门螺杆菌(Hp)感染住院学龄期儿童营养管理方案,并评价其应用效果。方法选取2021年4—9月在河南省人民医院就诊的76例Hp感染住院的学龄期儿童作为研究对象,2021年4—6月收治的38例患儿纳入对照组,2021年7—9月收治的38例患儿纳入试验组。对照组接受常规护理,试验组接受Hp感染住院儿童营养管理方案。比较干预前、干预后1个月、干预后3个月两组学龄期儿童日常饮食提供者膳食素养问卷和荷兰儿童饮食行为量表得分。结果两组干预后1、3个月的儿童饮食行为得分和学龄期儿童日常饮食提供者膳食素养得分比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论Hp感染住院儿童营养管理方案的应用可帮助患儿建立正确的饮食行为习惯,提高患儿主要照顾者的膳食素养水平,强化儿童营养健康的支持性环境,促进我国学龄期儿童的健康成长。
- 张博张俊娟张俊娟程艳波程艳波程艳波刘宏霞
- 关键词:幽门螺杆菌儿童营养管理
- Pdx-1、Ngn3联合MafA诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为胰岛样细胞被引量:3
- 2015年
- 目的探讨胰十二指肠同源盒1(pancreaticandduodenalhomeobox1,Pdx.1)、神经元素3(neurogenin3,Ngn3)联合V型肌腱膜纤维肉瘤癌基因同源基因A(v—marmuscu—loaponeuroticfibrosarcomaoncogenehomologA,MafA)诱导大鼠骨髓间充质干细胞(bonemarrowmesenchymalstemcells,BMSC)分化为胰岛样细胞(insulin.producingcells,IPC)的机制。方法通过贴壁培养法纯化BMSC,分为4组(A:未感染组;B:MafA感染组;C:Pdx-1-Nsn3感染组;D:联合感染组),高糖条件下培养7d,荧光显微镜观察其感染效率。Western印迹检测各组细胞Pdx.1、NgIl3和MafA表达情况,RT-PCR检测各组胰岛素2、葡萄糖激酶、巢蛋白、胰升糖素及Pdx.1表达水平,ELISA法检测各组胰岛素分泌情况。结果分离的细胞表面高表达CD44、CDl05,而低表达CD34。诱导过程中各感染组BMSC逐渐聚集并形成细胞团块,双硫棕染色呈红棕色;各组在感染第0、3、5、7、9天胰岛素分泌水平逐渐提高,且联合感染组升高最为明显(P〈0.05);与A组相比,B、C和D组Pdx-1、胰岛素2、胰升糖素及葡萄糖激酶基因表达明显上调(P〈O.05);与B组相比,C组Pdx-1表达上调,D组Pdx-1和胰岛素2表达上调,胰升糖素表达下调(P〈0.05);与C组相比,D组胰升糖素表达上调(P〈0.05)。结论Pdx-1、Ngn3联合MafA共同感染BMSC可分化为IPC。
- 闫淑芳袁慧娟刘宏霞杜少斐吴敬张会峰马跃华赵志刚
- 关键词:充质干细胞胰岛样细胞