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基于RNA-Seq的棉花纤维优势表达基因及启动子的克隆与分析: RNA-Seq技术作为一种新的转录组研究方法,能够更为快速、便捷、准确地提供更多的生物体转录信息,为研究棉花纤维伸长相关基因搭建了强有力的技术平台.本研究以陆地棉K312为材料,提取叶片和纤维混合样品的RNA,利用Ill...; 杨江涛王旭静吕少溥王志兴; 关键词：棉花转录组测序实时荧光定量PCR 启动子

一种来源于棉花的双向启动子及其应用: 本发明公开了一种来源于棉花的双向启动子及其应用。本发明提供的启动子，命名为GhZR，获自棉花，为如下(1)或(2)或(3)或(4)：(1)序列表中序列1所示的DNA分子(正向序列，命名为GhZRf)；(2)与序列表中序列...; 王志兴王旭静杨江涛; 文献传递

陆地棉纤维优势表达基因GhRACK1的克隆与序列分析被引量：1: 2015年; 纤维品质改良是我国棉花育种的主要目标之一,纤维特异或优势表达基因的挖掘是利用基因工程手段改良纤维品质的关键。根据苏棉12纤维中优势表达的GhRACK1 EST序列设计引物,通过RACE技术克隆了GhRACK1基因的全长cDNA。推导的氨基酸序列含有4个串联的WD基序,属于WD40重复家族,与已知的RACK1蛋白同源性达70%以上,PDB模拟的蛋白三维结构也与已知的RACK1蛋白结构相似。荧光定量PCR分析表明GhRACK1在纤维中的表达量比叶片中高20倍以上。研究结果为棉花纤维品质改良基因工程提供了新的基因资源。; 庞伟民靳茜王旭静杨江涛吕少溥唐巧玲王志兴; 关键词：陆地棉

一种来源于棉花的双向启动子及其应用: 本发明公开了一种来源于棉花的双向启动子及其应用。本发明提供的启动子，命名为GhZR，获自棉花，为如下(1)或(2)或(3)或(4)：(1)序列表中序列1所示的DNA分子(正向序列，命名为GhZRf)；(2)与序列表中序列...; 王志兴王旭静杨江涛; 文献传递

基于RNA-Seq的棉花纤维转录组分析: 棉花纤维品质的改良是我国棉花育种的首要目标之一.由于受育种周期长、外源种质利用困难、棉花纤维品质与产量性状之间呈负相关等因素的限制,用常规育种的方法较难培育出产量和品质同步改良的棉花新品种.利用基因工程的方法可以实现优良...; 杨江涛王旭静吕少溥唐巧玲王志兴; 关键词：棉花育种纤维发育转录组测序基因表达; 文献传递

基因组测序技术解析耐除草剂转基因水稻G2-7的分子特征被引量：2: 2020年; 外源DNA片段的拷贝数及插入位点的侧翼序列等分子特征信息是转基因植物安全评价过程中必需要提供的信息。本研究利用基因组测序结合生物信息学对耐除草剂转基因水稻G2-7的T-DNA插入位点、拷贝数和侧翼序列进行鉴定。利用Illumina NovaSeq 6000平台对G2-7进行全基因组测序,共获得47.13 Gb的测序数据,通过与转基因载体和参考基因组序列的比较,确定了G2-7中T-DNA在受体基因组中的插入位点。结果显示,外源DNA片段以单位点单拷贝形式插入到水稻1号染色体的36,189,491~36,189,507位置,造成水稻基因组16 bp DNA缺失,无载体骨架的插入。同时我们获得外源基因插入位点5′侧翼序列375 bp和3′端侧翼序列353 bp,并通过PCR扩增和Sanger测序进一步证明获得的侧翼序列是正确的。研究结果为转基因水稻G2-7的安全评价及转化体特异性检测提供了有效的数据支撑,同时也证明全基因组测序(WGS)是解析转基因植物分子特征的有效方法。; 马硕焦悦杨江涛王旭静王志兴; 关键词：基因组测序转基因水稻分子特征侧翼序列

一种耐草铵膦转基因玉米BrmB01的制备与检测方法及其应用: 本发明公开了一种耐草铵膦转基因玉米BrmB01的制备与检测方法及其应用。该耐草铵膦转基因玉米BrmB01已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.22650。本发明还建立了用于检测待...; 王旭静王志兴杨江涛

陆地棉GhRACK1启动子的克隆与缺失分析被引量：4: 2016年; 在基因工程发展中,有应用前景的纤维特异表达启动子的缺乏是制约棉花纤维品质改良的主要因素之一。本研究利用反向PCR方法克隆到陆地棉纤维优势表达基因GhRACK1的上游启动子GhRACK1-P。GhRACK1-P全长为1987 bp,含有TATA-box、CAAT-box、MYB2和I-box等顺式作用元件和调控元件。根据调控元件的分布对GhRACK1-P进行不同程度的缺失,获得了p1、p2、p3和p4缺失体;构建不同缺失体和全长GhRACK1-P的植物表达载体,并通过农杆菌介导法导入烟草,获得不同类型转基因烟草。GUS组织化学染色结果表明,全长启动子GhRACK1-P只能驱动gus基因在转基因烟草的幼根及根毛中表达,其他缺失体驱动gus基因在转基因烟草的花粉、叶片和根中表达,为组成型表达启动子。由于根毛与棉花纤维具有相似的发育机制,推测全长GhRACK1-P可能为纤维优势表达启动子。本研究结果为棉花纤维品质改良基因工程提供了新的调控元件。; 杨江涛庞伟民王旭静吕少溥唐巧玲王志兴; 关键词：克隆

一种耐草甘膦转基因玉米Brim01的制备与检测方法及其应用: 本发明公开了一种耐草甘膦转基因玉米Brim01的制备与检测方法及其应用。该耐草甘膦转基因玉米Brim01已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.22649。本发明还建立了用于检测待...; 王旭静王志兴杨江涛

双T-DNA多基因共转化植物表达载体的构建与应用: 因复合性状是当前转基因植物发展的主要特色,而且在转基因产品安全评价中,要求去除选择标记基因,以避免选择标记基因可能带来的安全性问题.因此,培育多性状无选择标记基因的转基因植物是当前研究的热点问题之一.目前已提出多种去除筛...; 王旭静苏月焱唐巧玲杨江涛董玉凤庞为民张小兵王志兴; 关键词：转基因植物多基因表达; 文献传递

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杨江涛