陈奕霖
- 作品数：8 被引量：23H指数：3
- 供职机构：遵义医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省科技厅科学技术基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Oct4B1基因过表达增强结直肠癌SW620细胞对奥沙利铂的耐药性及其机制被引量：4
- 2018年
- 目的 探讨Oct4B1基因过表达是否增强结直肠癌SW620细胞对奥沙利铂耐药性及其机制,以及与诱导细胞上皮-间充质转化（EMT）过程的关系.方法 实验分组：将SW620细胞随机平均分为实验组及对照组、实验组（SW620-Oct4B1）：转染带G418抗性的Oct4B1过表达质粒;对照组（SW620-NC）：转染带G418抗性的阴性对照质粒;筛选合适浓度G418建立稳定转染细胞株.对稳定转染两组细胞作如下检测：（1）噻唑蓝（MTT）法检测细胞对不同浓度奥沙利铂的敏感性;（2）Western blot检测P-糖蛋白（P-gp）及EMT标志物E-钙黏蛋白（E-cadherin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）的表达;（3）划痕实验检测12、24 h迁移能力;（4）Transwell小室检测24 h时侵袭能力.结果 实验组与对照组比较：（1）对奥沙利铂敏感性实验组明显低于对照组（t =8.889、5.427、9.678、4.459、5.362,P=0.001、0.006、0.001、0.011、0.006）;（2）P-gp表达两组分别为0.401、0.439、0.419（0.420±0.020）及0.099、0.110、0.120（0.110 ±0.010）,实验组明显高于对照组（t=24.723,P=0.000）;（3）12 h伤痕愈合率分别为32.196％、32.382％、33.441％ （32.670 ±0.670）％及23.049％、25.286％、23.674％ （24.000±1.150）％,实验组明显高于对照组（f=11.245,P=0.001）;24 h伤痕愈合率分别为67.048％、68.650％、66.291％ （67.330±1.200）％和49.161％、47.632％、53.203％（50.000 ±2.880）％.实验组显著高于对照组（t=9.620,P=0.001）;（4）24 h两组透膜细胞数分别为400.105、407.500、384.300（397.300±11.850）个及205.641、186.244、215.02（202.300±14.680）个,实验组显著多于对照组（t=17.905,P=0.000）;（5）E-cadherin表达两组分别为0.186、0.190、0.223（0.200 ±0.020）及0.530、0.531、0.529（0.530 ±0.010）,实验组明显低于对照组（t=28.143,P=0.000）,而N-cadherin表达两组分别为0.949、0.935、0.906（0.930±0.020）及0.687、0.648、0.675（0.670±0.020）,实验�
- 陈正权文坤明陈奕霖胡水清曾庆良
- 关键词：结直肠癌上皮-间充质转化耐药性
- 上皮间质转化在结直肠癌肿瘤干细胞富集过程中的作用观察被引量：1
- 2016年
- 目的探讨悬浮培养法富集结直肠癌肿瘤干细胞(CSCs)的过程是否与诱导上皮间质转化(EMT)有关。方法以采用悬浮培养法培养出的结直肠癌SW620细胞3D微球体及其亲本细胞SW620为研究对象。采用流式细胞技术、Western blotting检测CSCs标记物CD44、Ep-CAM的表达,并行软琼脂克隆实验、NOD/SCID小鼠成瘤实验,以验证3D微球体是否富集CSCs;采用Western blotting检测EMT标记物E-钙黏蛋白(E-Ca)、N-钙黏蛋白(N-Ca)及波形蛋白(Vim)在3D微球体细胞及亲本SW620细胞中的表达差异。结果与亲本SW620细胞比较,3D微球体细胞软琼脂克隆形成能力明显增强(P<0.01),NOD/SCID小鼠成瘤能力明显提高,CD44+细胞百分比增加,Ep-CAM蛋白表达量明显增高(P<0.01),上皮细胞标记物E-Ca表达明显降低(P<0.01),而间质细胞标记物N-Ca和Vim表达明显增高(P<0.01)。结论悬浮培养法富集结直肠癌CSCs可能与诱导EMT有关。
- 程家平黎江苏弦陈奕霖曾庆良文坤明
- 关键词：结直肠肿瘤肿瘤干细胞上皮-间质转化
- Oct4B1基因过表达增加结直肠癌SW620细胞对奥沙利铂耐药性及机制
- 目的：明确Oct4B1基因过表达是否增加结直肠癌SW620细胞对化疗药物奥沙利铂(Oxa)耐药性及机制是否与诱导细胞上皮间质转化(EMT)有关.
方法：构建带G418抗性的Oct4B1过表达质粒和阴性对照质粒,...
- 陈正权文坤明陈奕霖胡水清曾庆良
- 关键词：结直肠癌奥沙利铂耐药性
- 过表达Oct4B1诱导结直肠癌SW480细胞发生上皮间质转化被引量：4
- 2017年
- 目的:探讨Oct4B1基因过表达是否诱导人结直肠癌SW480细胞发生上皮间质转化(EMT)及其可能的机制。方法:用带G418抗性的Oct4B1基因过表达质粒及阴性对照质粒转染人结直肠癌SW480细胞株,分别称为实验组(SW480-Oct4B1)及对照组(SW480-NC),转染成功后用G418筛选建立稳定转染的细胞株,对两种稳定转染细胞进行如下检测:(1)RTq PCR检测Oct4B1的mRNA水平;(2)划痕实验和Transwell小室实验检测迁移和侵袭能力;(3)Western blot检测EMT相关标记物E-cadherin、N-cadherin及Vimentin蛋白表达;(4)RT-q PCR和Western blot检测EMT转录因子Twist的mRNA及蛋白表达。结果:稳定转染细胞株建立后,实验组与对照组比较:Oct4B1基因表达水平明显升高(P<0.01);细胞迁移明显增强(P<0.01);细胞侵袭能力明显提高(P<0.01);上皮标记物E-cadherin蛋白表达量明显下降(P<0.01);而间质标记物N-cadherin及Vimentin蛋白表达量明显上调(P<0.01);Twist的mRNA及蛋白表达量均明显升高(P<0.01)。结论:过表达Oct4B1基因可诱导人结直肠癌SW480细胞发生EMT,增强细胞迁移及侵袭能力,其分子机制可能与提高Twist表达有关。
- 陈奕霖文坤明胡水清陈正权曾庆良
- 关键词：结直肠癌细胞上皮间质转化TWIST
- Oct4B1在结直肠癌干细胞中的表达及意义被引量：3
- 2016年
- 目的:探讨胚胎干细胞转录因子Oct4的亚型Oct4B1在结直肠癌干细胞中的表达及其可能的作用。方法:以结直肠癌细胞株SW480细胞采用悬浮培养法培养出的3D微球体及其亲本细胞SW480为研究对象,采用细胞分化实验、细胞软琼脂克隆实验、流式细胞技术检测干细胞标记物CD133、CD44的表达以验证3D微球体是否富集肿瘤干细胞(CSCs),实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测两种细胞Oct4B1 mRNA表达水平。结果:3D微球体具有分化为普通肿瘤细胞的能力,相对于亲本细胞,3D微球体体外克隆形成能力明显增强(P<0.01),干细胞标记物CD133、CD44明显高表达(P<0.01),Oct4B1 mRNA表达水平明显增高(P<0.01)。结论:干细胞调控因子Oct4的亚型Oct4B1在富集结直肠癌CSCs的3D微球体中表达明显增高,其可能参与结直肠癌CSCs的调控。
- 程家平黎江苏弦陈奕霖曾庆良文坤明
- 关键词：结直肠癌肿瘤干细胞OCT4
- 姜黄素通过抑制STAT3通路调控人结肠癌耐奥沙利铂细胞株的耐药性被引量：11
- 2015年
- 目的:探讨姜黄素(Cur)对人结肠癌耐奥沙利铂(Oxa)细胞株(SW620/OxR)的逆转耐药作用及其机制是否与抑制STAT3信号通路有关。方法:采用WST-1试剂检测Cur对SW620/OxR细胞株的半数抑制(IC50)浓度,选择IC50低一浓度梯度的Cur+2μmol/L Oxa作用于SW620/OxR细胞48 h(称为实验组),与仅加入2μmol/L的Oxa对照组比较,1采用流式细胞术检测细胞凋亡;2采用Western blot检测STAT3活化标志磷酸化STAT3(P-STAT3)蛋白及其下游耐药相关靶分子P糖蛋白(P-gp)的表达情况。结果:Cur对SW620/OxR细胞的IC50浓度为18.9μmol/L;实验组与对照组比较:1细胞凋亡率由(5.08±1.82)%上升到(30.69±2.94)%,实验组细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.05);2P-STAT3及P-gp表达量均明显受抑制(P<0.05)。结论:Cur具有调控人结肠癌耐药细胞株耐药性的作用,可能与抑制STAT3信号通路,降低P-gp表达有关。
- 文坤明冷敏程家平陈正权陈奕霖曾庆良
- 关键词：多药耐药姜黄素STAT3信号通路
- 病变主要位于大网膜的腹膜恶性间皮细胞瘤1例
- 2016年
- 患者男,58岁,因＂腹胀、乏力并伴有咳嗽1月＂入院。1月前,患者无明显诱因出现腹胀,腹胀呈进行性加重,伴有乏力及咳嗽,咳嗽为刺激性干咳,夜间偶感发热、盗汗,无反酸、嗳气、恶性及呕吐等。患者发病以来精神、饮食差,体质量3个月减轻约10 kg。既往否认肝炎、结核及肿瘤等病史。入院查体：T 36.7℃、P 110次/min、R 20次/min、BP107／85mmHg。
- 程家平文坤明陈奕霖
- 关键词：大网膜肿瘤腹膜恶性间皮瘤刺激性干咳腹腔热灌注化疗顺氯氨铂
- 沉默Oct4B1基因对结直肠癌耐药细胞上皮间质转化逆转实验研究被引量：1
- 2017年
- 目的研究已证实Oct4基因可调控肿瘤细胞上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)。本研究探讨沉默Oct4的亚型Oct4B1能否逆转结直肠癌耐奥沙利铂细胞株SW620/OxR的EMT。方法分别采用带G418抗性的Oct4B1-shRNA质粒和阴性对照质粒转染SW620/OxR细胞,转染成功后通过G418筛选建立稳定转染细胞株,分别称为实验组(RNAi组)及对照组(Ctrl组)。对两组细胞作如下检测,(1)RT-qPCR检测Oct4B1的mRNA水平;(2)划痕实验检测细胞迁移能力;(3)Transwell小室检测细胞侵袭能力变化;(4)蛋白质印迹法检测EMT标记物E-钙粘蛋白(E-cadherin)、N-钙粘蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达水平。结果RNAi组与Ctrl组比较,(1)Oct4B1mRNA表达明显下调,P<0.05;(2)细胞迁移能力明显减弱,P<0.05;(3)细胞侵袭能力显著降低,P<0.01;(4)上皮标记物E-cadherin明显增高(P<0.05),间质标记物N-cadherin(P<0.01)和Vimentin(P<0.05)则明显下调。结论沉默Oct4B1基因可逆转SW620/OxR细胞EMT。
- 胡水清文坤明陈奕霖
- 关键词：结直肠癌上皮间质转化耐药
