王海新
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 新城疫病毒F蛋白纳米抗体的筛选及活性鉴定被引量：8
- 2016年
- 旨在筛选新城疫病毒(NDV)F蛋白的纳米抗体,并对筛选的抗体活性进行初步鉴定。以NDV F蛋白中和表位构建诱饵,利用酵母双杂交技术对双峰驼天然重链抗体可变区(VHH)酵母双杂交文库进行筛选,获得4株VHH抗体序列。挑选其中2株最符合VHH特征的进行原核表达与纯化,并对2株VHH活性进行鉴定。ELISA结果显示,VHH1与VHH2与NDV病毒的反应性显著高于阴性对照(P<0.05),表明VHH与NDV病毒反应活性良好;Western blot结果显示,2株VHH可特异性识别F蛋白;细胞中和试验结果表明,2株VHH抗体均具有一定的中和活性。以上结果提示本研究成功筛选出2株活性较好的抗NDV F蛋白的VHH抗体,为VHH在NDV防控中的应用奠定了基础。
- 高小龙胡湘云付向晶王燕平仝丽娜王海新王兴龙张淑霞萧飒杜恩岐杨增岐
- 关键词：新城疫病毒F蛋白酵母双杂交
- 2株蛋鸡源基因Ⅸ型新城疫病毒全基因序列测定及遗传进化分析被引量：2
- 2015年
- 为分析鸡源基因Ⅸ型新城疫病毒的分子特征及遗传进化关系,对两株蛋鸡源NDV进行部分生物学特性测定及全基因测序分析。参考基因Ⅸ型NDV毒株的序列设计10对引物,采用RT-PCR的方法对NDV分离株Layer/China/Yulin/10和Layer/China/Changan/10分段进行扩增及测序,拼接获得全基因序列。结果表明,2株病毒的MDT分别为37.2和56.5h,ICPI分别为1.838和1.603,F基因的裂解位点序列均为112 R-R-Q-R-R-F117,HN基因均编码571个氨基酸,均符合NDV强毒株的特征;2株病毒的基因组全长均为15 192bp,同源性高达99.9%;F基因和全基因系统进化树显示2株NDV均属于ClassⅡ中的基因Ⅸ型,和其他基因Ⅸ型和基因Ⅲ型毒株的亲缘性较高,与野鸟源NDV同源性为99.9%,遗传距离为0.001 1,以上结果表明,这两株鸡源NDV与野鸟源NDV的亲缘关系较近。提示野鸟可能在基因Ⅸ型NDV的扩散与传播中有重要的作用。
- 郝华芳任善会王海新仝丽娜汪洁段旭基张鹏王兴龙张淑霞萧飒杨增岐
- 关键词：新城疫病毒全基因组测序遗传进化
- 鸟氨酸氨基甲酰转移酶活性测定方法的建立
- 2015年
- 为了建立血浆鸟氨酸氨基甲酰转移酶(OCT)活性的测定方法,以健康奶牛血浆为样本,利用OCT能够将氨基甲酰磷酸盐中的氨甲酰基转移到鸟氨酸上,形成瓜氨酸和磷酸盐的反应原理,对瓜氨酸进行比色定量,从而反映血浆OCT活性的高低。结果:成功筛选了奶牛血浆OCT活性的测定条件,测得健康奶牛血浆OCT活性为(13.1±9.18)U/L。本研究建立了适合现代科研条件下用于测定动物血浆OCT活性的瓜氨酸终点显色法,该方法可以方便、快速、准确、大批量检测动物血浆样本,能够作为常规方法在临床上广泛应用。
- 王明琼王海新李盼盼张天宇董强
- 关键词：活性
