刘清芳
- 作品数：2 被引量：4H指数：2
- 供职机构：安阳市人民医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 羟乙基呱嗪乙硫磺酸对人骨髓间充质干细胞纯化培养的影响被引量：2
- 2005年
- 目的:探讨羟乙基呱嗪乙硫磺酸对人骨髓间充质干细胞(hMSC)纯化培养的影响。方法:采用全髓直接接种法分离培养13～18周胎龄水囊引产新鲜胎儿股骨骨髓,贴壁细胞达90%以上融合时消化传代。传代细胞分别接种于含100ml/L胎牛血清的LDMEM培养基(常规培养基)和加入15mmol/L羟乙基呱嗪乙硫磺酸(Hepes)的常规培养基(改良培养基)中,观察细胞生长情况,用酸度计监测培养基pH值变化情况,流式细胞仪鉴定细胞纯度及CD抗原表达情况。并诱导改良培养基培养的hMSC向成骨细胞分化,酶细胞化学法和全自动生化仪检测碱性磷酸酶(ALP)活性,鉴定hMSC的成骨分化能力。结果:2种培养基培养的hMSC在细胞形态、生长特性、CD抗原表达等方面相似,但改良培养基由于pH值较恒定而能提高hMSC纯度及细胞增殖速度,且诱骨分化后可形成矿化结节,ALP染色阳性。结论:Hepes能提高全髓直接接种法培养的hMSC纯度及细胞增殖速度,简化骨髓细胞分离程序,减少细胞损伤及受污染机会,利于hMSC培养的推广应用。
- 李敏霞李相中刘清芳
- 关键词：间充质干细胞体外培养人骨髓
- 国产碱性成纤维细胞生长因子对人神经干细胞体外增殖分化的影响被引量：2
- 2005年
- 目的:探讨国产碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfac-tor,bFGF)对体外培养人神经干细胞增殖、分化的影响,以期寻找一种简便、经济、可靠的人神经干细胞体外培养、增殖的方法。方法:实验于2003-06/2004-03在安阳肿瘤医院临床实验室进行。机械分离8～16周胎龄水囊引产新鲜人胚胎纹状体区脑组织,用DMEM/F12无血清培养基进行培养,加不同剂量的国产bFGF刺激细胞增殖、传统方法进行传代培养,免疫组化染色对培养的细胞进行鉴定。结果:培养体系中加入终浓度28Au/mL的国产bFGF时,神经干细胞生长旺盛,形成大量悬浮状态的神经球,而且形成的神经球经多次传代仍呈悬浮球生长,绝大多数表达神经上皮干细胞蛋白(Nestin)。结论:用廉价的国产bFGF作为丝裂原体外培养人胚胎纹状体区脑组织,能获得大量神经干细胞,可以为中枢神经系统疾病神经干细胞移植治疗提供经济、可靠的细胞来源。
- 李敏霞王中刘清芳秦林其
- 关键词：干细胞成纤维细胞生长因子2体外研究
