张毅
- 作品数：37 被引量：65H指数：5
- 供职机构：教育部更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程天文地球更多>>
- 我院心血管系统用药动态分析
- 2002年
- 彭军张毅
- 关键词：心血管疾病合理用药限定日剂量医药费用
- SND1蛋白与HuR蛋白相互结合作用
- 2014年
- 人源SND1（staphylococcal nuclease domain containing 1）蛋白由N端的SN（staphylococcal nucleases）结构域和C端的TSN（Tudor-SN5）结构域组成,其中SN结构域又包含SN1~SN4四个重复的功能片段.本课题组前期研究结果表明,SND1蛋白可以通过SN结构域与G3BP（Ras-GAP SH3 domain-binding protein）蛋白相互结合,共同参与细胞应激颗粒（stress granules,SGs）的形成.SGs是真核细胞在受到氧化应激、病毒感染等外界刺激时在胞浆内形成的与RNA代谢相关的颗粒状结构.对于SGs的成分鉴定及相互作用的分析一直是学者们研究的热点.本研究中,免疫共沉淀实验结果表明,以抗SND1抗体可以共沉淀出HeLa细胞内另一个重要的应激相关人类抗原R（human antigen R,HuR）蛋白.另外,利用脂质体转染法将pcDNA3-FLAG-HuR重组质粒瞬时转染入HeLa细胞,成功过表达外源性的FLAG-HuR融合蛋白,再以抗FLAG标签抗体又可以反向共沉淀出内源性SND1蛋白,证明SND1与HuR之间存在蛋白质间的相互结合作用.细胞免疫荧光实验结果表明,当给予HeLa细胞0.5 mmol/L亚砷酸钠氧化应激时,SND1与HuR蛋白共同定位于胞浆中的SGs结构中.GST-pulldown实验结果进一步表明截短的SN结构域可以结合HuR蛋白,其中以SN1功能片段的结合能力最强,表明SND1蛋白是通过SN结构域与HuR蛋白形成应激复合物,参与SGs的胞浆组装.并不定位于SGs的TSN结构域亦可结合HuR蛋白,提示SND1-HuR的蛋白相互作用可能并不局限于SGs,具有其它方面的功能意义.
- 高星杰张毅宋娟付雪苏超张桂敏张春燕于林姚智杨洁
- 关键词：免疫共沉淀结构域
- 基于中医传承辅助平台的《金匮要略》用药规律分析被引量：3
- 2018年
- 目的基于中医传承辅助平台(V2.5),分析《金匮要略》中所载方剂的用药规律,为传承张仲景学术思想提供参考。方法收集《金匮要略》中所载方剂,录入中医传承辅助平台(V2.5),采用软件集成的数据挖掘方法分析其处方用药规律。结果通过对书中所载205首方剂进行分析,筛选得到的155味药物中用药频数在10次以上的共22味,得到常用药物组合23个,分析所得药物规则28个。通过分析得出四气中温性药物使用频数最高,五味中甘性药物使用频数最高,归经中脾经药物使用频数最高。结论通过对《金匮要略》中所载方剂进行数据分析,展示了其用药规律,以期指导临床用药。
- 赖乾袁振洁李金田李金田张毅
- 关键词：《金匮要略》数据分析用药规律
- 基于双边市场的Web2.0平台厂商盈利模式研究
- 互联网的快速发展产生了众多新的商业模式,尤其是在对个性化高度重视的今天,Web2.0模式得到了众多厂商和风险投资商的青睐。但是Web2.0平台厂商却一直难于有一个合理的盈利模式,本文基于双边市场理论,对Web2.0市场的...
- 杨云松朱岩张毅
- 关键词：WEB2.0双边市场
- 文献传递
- 超声引导下针刀松解及星状神经节触激治疗颈源性眩晕36例被引量：7
- 2018年
- 目的观察超声引导下针刀松解及星状神经节触激治疗颈源性眩晕的临床疗效。方法将72例颈源性眩晕患者采用数字表法随机分为治疗组和对照组各36例,治疗组采用超声引导下针刀松解及星状神经节触激治疗,对照组采用非直视下针刀松解及星状神经节触激治疗。2组针刀松解治疗均每周1次,星状神经节触激治疗,左右互换,每周2次,2周为1个疗程,共治疗2个疗程。观察治疗前后两组椎基底动脉血流速度变化,并评定2组临床疗效。结果与治疗前比较,2组治疗后椎基底动脉血流速度较前明显改善(P<0.05或0.01);治疗组总有效率为94.4%,优于对照组的77.8%(P<0.05)。结论超声引导下针刀松解及星状神经节触激治疗颈源性眩晕患者能提高临床疗效,较安全可靠。
- 林华阳修忠标修忠标曾维铨张毅张毅曾维铨宫玉榕
- 关键词：颈源性眩晕超声引导针刀松解术
- 基于纳米粒子的TR-FRET传感器用于miRNAs的无扩增检测
- 2015年
- 目的:建立一种基于纳米粒子的时间分辨(TR)荧光共振能量转移(FRET)生物传感器用于mi RNAs的无扩增检测。方法:以寡核苷酸单链probe I偶联Gd F3:Tb3+纳米粒子作为供体,以寡核苷酸单链probe II偶联金(Au)纳米粒子作为受体,利用供体与受体之间的FRET检测目标mi RNA hsa-mi R-122-5p浓度,并通过设置多功能酶标仪的检测延迟去除自发荧光背景以提高灵敏度。结果:该传感器能够高灵敏度、高特异性地检测目标分子,并且对于光照有良好的耐受性,而且能够避免自发荧光干扰。对hsa-mi R-122-5p的检测线性范围为0.1 fmol/L^100 pmol/L,与同类型的RNA荧光传感器的检测限具有可比性。结论:基于纳米粒子的TR-FRET生物传感器用于mi RNAs的无扩增检测具有良好的灵敏度和特异性。
- 张毅谭加兴叶彦恺姜炜孙艳华沈万秋曹海燕靳美娜秦楠段宏泉
- 关键词：荧光共振能量转移传感器
- 艾叶多糖的提取、结构分析与功能的研究进展被引量：5
- 2022年
- 艾叶是天然植物艾蒿的成熟叶子,含有多种黄酮类、多糖等生物活性物质,被广泛用于食品、药品等领域;艾叶多糖是一种存在于艾叶中的杂多糖,由不同的单糖组成,具有抗氧化、免疫调节、降血糖、调节细胞凋亡和抗肿瘤等多种天然生物活性,在功能性食品的开发中前景广泛。该文对艾叶多糖的提取、结构分析及功能活性的研究现状进行概述,为进一步研究与开发艾叶多糖的新型功能性食品提供理论依据。
- 何柳何柳谢卫红王云鹏
- 关键词：生物活性功能食品
- 重组真核质粒pEGFP—C2-hTudor—SN—SN（1～4）的构建及表达
- 2012年
- 目的将人类Tudor—SN（tudor staphylococcal nuclease）蛋白SN（1～4）基因片段分别定向连入pEGFP-C2质粒，使Tudor—SN蛋白SN各功能片段与绿色荧光蛋白在HeLa细胞内融合表达。方法以重组质粒pSG5-Tudor-SN-flag为模板，PCR法扩增出目的基因，利用EcoRⅠ和SalⅠ双酶切法将目的片段连接到pEGFP—C2载体上，再将构建成功的pEGFP-C2-Tudor—SN-SN（1～4）重组质粒转染入HeLa细胞内，以荧光显微镜及Western印迹法检测绿色荧光蛋白与目的蛋白的融合表达情况。结果以单／双酶切及基因测序法鉴定构建的重组质粒均无误，荧光显微镜及Western印迹结果均检测到绿色融合蛋白的表达。结论重组pEGFP-C2-hTudor—SN-SN（1—4）质粒成功构建并表达。
- 辛灵彪高星杰付雪张毅史雪彬陈朴尹洁何津岩杨洁
- 关键词：PEGFP-C2重组质粒融合蛋白
- PEI修饰的量子点作为叶酸荧光探针的应用研究被引量：1
- 2012年
- 目的:发展一种基于量子点的重现性好、灵敏度高、选择性强的检测叶酸的荧光探针。方法:以聚乙烯亚胺功能化量子点,使其表面拥有大量氨基,利用叶酸的羧基和量子点表面氨基的静电吸附作用导致的电子转移调控量子点的荧光。结果:该探针对于光照和pH变化均有良好的耐受性,而且对于叶酸的检测有良好的选择性,可以抵抗很多金属离子和小分子的干扰。2.0μmol/L叶酸的加标回收率在99%～104%。检测限为35 nmol/L,与同类型的叶酸荧光探针的最佳检测限具有可比性。结论:基于PEI-QDs的叶酸荧光探针具有良好的重现性、灵敏度和选择性,有望成为替代液相色谱检测叶酸的高效、廉价分析手段。
- 张毅史学丽曹海燕周宝宽
- 关键词：叶酸荧光探针量子点聚乙烯亚胺
- 活细胞内人IGFBP2-3’UTR基因的GFP—MS2荧光系统标记
- 2014年
- 目的利用GFP—MS2系统在活细胞内对胰岛素样生长因子结合蛋白2（insulin-hke growth factor，bindin gprotein2，IGFBP2）mRNA3’非翻译区（3’untranslated region，3’UTR）进行绿色荧光标记，构建pT-／-IGFBP2-3’UTR-24×MS2重组质粒。方法提取HeLa细胞总RNA，以针对IGFBP2-3’非翻译区的特异性片段为反转录引物，反转录出cDNA，并以其为模板，降落PCR法扩增出带有EcoRI和BamHI双酶切位点的1GFBP2—3’UTR目的基因，再利用双酶切法将目的片段连接到psG5载体（启动子为T7）上，构建重组质粒pT-／．IGFBP2-3’UTR；同时。以BglII和BamHI双酶切法从pCR4-24xMS2SL．stable质粒上切下24×MS2结合位点片段并将其插入pT7-IGFBP2-3’UTR，构建重组质粒pT7-IGFBP2-3’UTR-24×MS2；然后将构建的重组质粒pT7-IGFBP2-3’UTR-24×MS2、pMS2．GFP质粒与pERFP-Tudor-SN质粒共同转染人HeLa细胞内，以激光共聚焦荧光显微镜检测IGFBP2—3’UTR的荧光标记情况及应激共定位。结果以酶切质粒法及基因测序法鉴定构建的重组质粒均无误．激光共聚焦结果显示在胞浆中检测到IGFBP2．3’UTR的绿色荧光信号，在细胞受到氧化应激时IGFBP2—3’UTR信号呈颗粒状聚集，且与应激颗粒（stressgranules，SGs）的标志蛋白Tudor-SN呈共定位关系。结论针对IGFBP2—3’UTR的GFP-MS2荧光标记系统质粒构建成功；细胞应激时，ICFBP2-3’UTR被招募至sGs结构中。
- 付雪高星杰张毅史雪彬辛灵彪刘欣于林杨洁何津岩
- 关键词：重组质粒
