宋莉莉
- 作品数：6 被引量：13H指数：2
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- ELISA定量检测乙型脑炎病毒抗原被引量：3
- 2009年
- 目的建立双抗体夹心ELISA定量检测乙型脑炎(乙脑)病毒(JEV)抗原方法,用于乙脑疫苗工序产品抗原含量检测。方法以抗JEV多克隆抗体作为包被物,辣根过氧化物酶(HRP)标记的单克隆抗体作为酶标记物,四甲基联苯胺(TMB)-H_2O_2显色,建立双抗体夹心ELISA法。根据已知浓度抗原,确定定量标准曲线,检测样品中JEV抗原含量;并对该方法各项指标进行验证。结果该方法最佳线性范围为12.5～200 U/ml;r=0.9989;定量限度为12.5 U/ml;回收率为85.0%～103.3%;变异系数为4.3%～5.5%;与甲肝疫苗原液、流感疫苗原液、Vero细胞裂解液蛋白、小牛血清、人血清清蛋白均无交叉反应。结论该方法线性好,特异性强,灵敏度高,准确性、重复性和稳定性好,可用于乙脑疫苗各工序产品的抗原定量检测。
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- 关键词：双抗体夹心ELISA抗原检测
- 气相色谱法测定甲型肝炎灭活疫苗中三氯甲烷残留量被引量：1
- 2010年
- 目的应用顶空气相色谱法测定甲型肝炎灭活疫苗中三氯甲烷残留量。方法采用毛细管色谱柱DB-WAX(30m×0.53mm×0.50μm),ECD检测器,以氮气为载气,顶空进样。以不同基质稀释的三氯甲烷工作液绘制标准曲线,并对方法进行适用性及专属性、线性关系、精密度、定量限、检出限和准确性验证。结果通过绘制的2条标准曲线可见,存在基质效应的影响。甲肝疫苗中三氯甲烷与其他杂质峰的分离度为2.58;三氯甲烷在20～100ng/ml的浓度范围内线性关系良好(R2=0.9993);精密性良好,检测结果的RSD均小于5%;最低检出限为1.2ng/ml,最低定量限为4.8ng/ml;检测高、中、低3种浓度样品的加标回收率分别为(95.6±1.8)%、(95.5±3.1)%和(101.9±2.1)%。结论顶空气相色谱法简便灵敏,结果准确可靠,适用于甲型肝炎灭活疫苗中三氯甲烷残留量的测定。
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- 关键词：气相色谱-质谱法三氯甲烷
- 牛血清白蛋白单克隆抗体的筛选与双抗体夹心ELISA检测方法的建立被引量：8
- 2008年
- 目的筛选高效抗牛血清白蛋白(BSA)单克隆抗体细胞株,并建立BSA抗原检测的双抗体夹心ELISA法。方法分别采用辛酸-硫酸铵法和葡萄球菌A蛋白亲和层析法纯化单抗,并进行抗体类型、腹水效价、特异性和相对亲和力测定;应用纯化的单抗建立BSA双抗体夹心ELISA检测法,并进行初步应用。结果筛选出4株可稳定分泌抗BSA单抗的杂交瘤细胞株,抗体类型为IgG,抗体滴度均可达10-6,特异性良好,相对亲和力较高。建立的双抗体夹心ELISA法线性范围为1.25～20ng/ml,R2>0.98,灵敏度为1.25ng/ml。结论已筛选出高效抗BSA的单抗,并建立了BSA双抗体夹心ELISA检测方法。
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- 关键词：牛血清白蛋白单克隆抗体双抗体夹心ELISA法
- 残余卵清蛋白ELISA定量检测方法建立及初步验证
- 2009年
- 卵清蛋白（ovalbumin，OVA）作为异源物质，接种人体后易引起过敏副反应。因此残余OVA含量检测是生物制品尤其是以鸡胚为培养基质的流感疫苗生产过程中必须监控的指标之一。本研究在建立定量检测OVA双抗体夹心ELISA两步法后，对此方法进行优化，建立双抗体夹心ELISA一步法。通过与德国Seramun试剂盒对比，考察此检测方法的适用性。
- 李军宋莉莉于丹蔡芳张立志韩素芳高强
- 关键词：夹心ELISA卵清蛋白ELISA一步法双抗体夹心流感疫苗
- 狂犬病毒核蛋白抗原ELISA定量法的建立及初步验证被引量：1
- 2008年
- 目的建立检测狂犬病疫苗各工序产品中核蛋白抗原含量的双抗体夹心ELISA法。方法以兔抗狂犬病毒多抗为包被抗体,辣根过氧化物酶标记的抗狂犬病毒核蛋白单抗作为酶标记抗体,对狂犬病毒核蛋白抗原含量进行定量测定,并对该方法进行初步验证。结果此方法线性相关系数大于0.97;最佳线性范围为0.000625～0.01IU/ml,定量限度为0.000625IU/ml;准确性为102%～109%;变异系数(CV)为7.2%～9.4%;与小牛血清、牛血清清蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)、流感疫苗纯化液、乙脑疫苗纯化液、甲肝疫苗纯化液等均无交叉反应。结论该方法特异性强,灵敏度高,准确性、重复性和稳定性好,可用于狂犬病疫苗各工序产品中核蛋白抗原的定量检测。
- 韩素芳李军高强宋莉莉于丹桑建利
- 关键词：双抗体夹心ELISA核蛋白
- 抗BSA多克隆抗体和单克隆抗体筛选及双抗体夹心ELISA法的建立与验证被引量：1
- 2009年
- 目的建立高灵敏度检测生物制品中牛血清白蛋白（BSA）残留量的双抗体夹心ELISA法并验证。方法筛选高亲和力、高纯度的抗BSA单克隆抗体作为包被抗体，高纯度、高效价、特异性高的兔抗BSA多克隆抗体为酶标抗体，采用双抗体夹心ELISA法，以系列含量的BSA标准品作为标准，制作标准曲线，对样品中所含BSA进行定量检测；并对该方法各项指标进行验证。结果优化确定了ELISA试验条件，回归曲线相关系数r≥0．99；对BSA最低检测限为1．25ng／ml；准确性试验回收率为90％-106％；精密性变异系数为6．1％～8．4％；与豚鼠、小鼠、兔、鸡血清均无交叉反应。结论该方法线性好，特异性强，灵敏度高，准确性、重复性和稳定性好。方法可靠，易于操作，适用于生物制品的BSA残留量定量检测。
- 李静蔡芳宋莉莉高强
- 关键词：牛血清白蛋白多克隆抗体双抗体夹心ELISA
