张亚辉
- 作品数:5 被引量:15H指数:3
- 供职机构:天津医科大学总医院更多>>
- 发文基金:天津市应用基础与前沿技术研究计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 微小RNA-451对人脑U87胶质瘤细胞株增殖和侵袭影响机制的研究被引量:3
- 2015年
- 目的 探讨微小RNA-451(miRNA-451)通过靶标钙结合蛋白39(CAB39)调控缺氧诱导因子1 α(HIF-1α)的表达对人U87胶质瘤细胞株增殖和侵袭的影响.方法 培养人脑U87胶质瘤细胞,将其分为空白对照组、无义序列组及miRNA-451 mimics处理组(简称miRNA-451组);将合成的寡核苷酸miRNA-451拟似物(miRNA-451 mimics)转染至U87胶质瘤细胞.实时定量PCR法检测转染后胶质瘤细胞miRNA-451的表达,Western blot法检测CAB39、肝激酶B1(LKBl)、HIF-lα蛋白的表达,应用流式细胞术检测细胞周期的变化,噻唑兰比色分析法(MTT)检测细胞增殖能力,Transwell 实验检测细胞侵袭能力的变化.结果 空白对照组、无义序列组、miRNA-451组的miRNA-451相对表达量分别为13.08 ±0.48、12.91±0.66、9.94 ±0.29,CAB39的相对表达量分别为2.85±0.05、2.40±0.04,0.41±0.02,LKB1的相对表达量为1.05±0.04、0.95±0.04、0.28±0.02,HIF-1α的相对表达量为0.60±0.02、0.54±0.03、0.14±0.05,差异均有统计学意义(P<0.05);细胞周期分析表明,空白对照组、无义序列组及miRNA-451组细胞G0/G1期DNA含量分别为60.48%、58.70%、75.58%,差异有统计学意义(P <0.05);MTT法分析显示,miRNA-451组细胞生长明显受到抑制,第6天细胞增殖率仅为41.48%;Transwell法分析显示,miRNA-451组穿过Transwell小室的细胞数明显减少,仅为24个,低于空白对照组和无义序列组的51个和45个,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 miRNA-451通过降低靶标CAB39的表达调控HIF-1α的表达,抑制人脑胶质瘤细胞的增殖和侵袭能力.
- 郭红宝南阳甄英伟郭丽云王乐张亚辉俞凯黄强钟跃
- 关键词:微RNAS神经胶质瘤细胞增殖肿瘤侵袭
- 椎基底动脉延长扩张症的治疗体会被引量:5
- 2015年
- 椎基底动脉延长扩张症(vertebrobasilar dolichoectasia,VBD)由于异常扩张、迂曲的血管可直接压迫脐干、神经根、第三脑室后部引起相关症状,甚至引起血流动力学改变,形成血栓和微小栓塞,引起后循环缺血症状,部分患者可形成急性夹层动脉瘤,甚至引起蛛网膜下腔出血。VBD发病率相对较低,临床症状无特异性,容易漏诊、误诊,现将我科近6年收住的4例患者,报告如下:
- 甄英伟南阳郭红宝张亚辉魏伟岳树源钟跃
- 关键词:椎基底动脉延长扩张症急性夹层动脉瘤蛛网膜下腔出血动力学改变相关症状缺血症状
- 微小RNA-451对LN229胶质瘤细胞系侵袭和迁移的影响被引量:3
- 2016年
- 目的研究微小RNA-451(miRNA-451)下调葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)对人脑LN229胶质瘤细胞系侵袭和迁移的影响。方法体外常规培养LN229细胞,将其分为空白对照组、无义序列组及miRNA-451组,空白对照组不进行任何处理,后2组分别转染无义序列和miRNA-451拟似物序列。转染48h后,RT-PCR检测3组细胞miRNA-451的表达;Western blotting检测转染后细胞腺苷酸活化性蛋白激酶(AMPK)、GLUT1蛋白的表达:细胞免疫荧光染色检测转染后细胞膜蛋白GLUT1的表达:划痕实验检测细胞的迁移能力:Transwell实验检测细胞的侵袭能力。结果与空白对照组和无义序列组相比,miRNA-451组细胞miRNA-451mRNA的表达量明显增高,AMPK和GLUT1蛋白的表达明显减低,膜蛋白GLUT1荧光强度明显减弱,划痕修复率和穿膜细胞数(126.23±4.52、120.31±3.61VS48.42±2.31)明显降低,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论miRNA-451可能通过调控AMPK下调GLUT1抑制人脑胶质瘤细胞的侵袭和迁移能力。
- 郭红宝南阳甄英伟王乐张亚辉周西广周俊虎韩磊黄强俞凯钟跃
- 关键词:神经胶质瘤葡萄糖转运蛋白1迁移
- miRNA-451调控人脑胶质瘤细胞上皮-间质转化发生的机制研究被引量:2
- 2017年
- 目的研究miRNA-451过表达后通过靶标钙结合蛋白39(CAB39)调控人脑胶质瘤细胞上皮-间质转化发生的机制,以及miRNA-451过表达对胶质瘤细胞侵袭和迁移能力的影响。方法培养U251胶质瘤细胞,将其分为空白对照组、无义序列组以及miRNA-451 mimics处理组(简称miRNA-451组)。采用实时定量PCR检测转染后U251细胞miRNA-451的表达;以Western blot法检测CAB39、E-钙黏素、N-钙黏素、波形蛋白、TWIST、人基质金属蛋白酶2(MMP-2)、人基质金属蛋白酶9(MMP-9)、Snail、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化蛋白激酶B(P—AKT)的表达水平;通过细胞免疫荧光实验进一步验证N-钙黏素、波形蛋白的表达水平;采用划痕实验和Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力的变化。结果与空白对照组及无义序列组相比,miRNA-451组的miRNA-451相对表达水平明显升高(均P〈0.05)。Western blot结果显示,与空白对照组及无义序列组相比,miRNA-451组CAB39、N-钙黏素、波形蛋白、TWIST、MMP-2、MMP-9、Snail、P-AKT的表达水平降低(均P〈0.05),而E-钙黏素的表达水平升高(均P〈0.05)。细胞免疫荧光实验结果显示,miRNA-451组的N-钙黏素、波形蛋白的表达水平相对于空白对照组明显降低(均P〈0.05)。划痕操作后24h、48h miRNA-451组的划痕修复率与空白对照组及无义序列组相比均明显降低(均P〈0.05)。转染48h后miRNA-451组穿过滤膜的细胞数目与空白对照组及无义序列组相比显著减少(均P〈0.05)。结论miRNA-451可能通过降低靶标CAB39的表达调控P13K/AKT通路,抑制人脑胶质瘤细胞中上皮-间质转化现象的发生,从而抑制人脑胶质瘤细胞的侵袭和迁移能力。
- 张亚辉郭红宝南阳甄英伟王乐管强俞凯黄强钟跃
- 关键词:微RNAS神经胶质瘤上皮-间质转化肿瘤侵润
- 微小RNA-451抑制胶质瘤细胞侵袭能力的实验研究被引量:3
- 2016年
- 目的研究微小RNA-451(miR-451)通过调控基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的表达对LN229胶质瘤细胞株侵袭能力的影响。方法体内、外实验均设立3组,分别为空白对照组、无义序列组和miR451 mimics组。合成寡核苷酸miR451 mimics转染LN229胶质瘤细胞以上调miR451的表达,采用实时定量PCR检测转染后miR-451的表达,以Western blot方法检测各组MMP-2和MMP-9蛋白的表达,通过Transwell实验评估各组LN229胶质瘤细胞的侵袭能力。同时建立LN229细胞荷瘤裸鼠模型,绘制肿瘤生长曲线,并采用免疫组化方法检测各组肿瘤内MMP-2和MMP-9蛋白的表达。结果PCR检测结果提示,与空白对照组、无义序列组相比,miR451 mimics组miR451的表达明显升高(均P〈0.05)。Western blot结果显示,miR451 mimics组MMP-2的相对表达量(0.26±0.03)均低于空白对照组(0.67±0.07)和无义序列组(0.65±0.04)(均P〈0.05);miR-451 mimics组MMP-9的相对表达量(0.25±0.02)亦低于空白对照组(0.71±0.04)和无义序列组(0.73±0.01)(均P〈0.05)。Transwell实验结果显示,miR-451 mimics组穿过Transwell小室的细胞数为(41.0±2.9)个,低于空白对照组[(79.0±2.7)个]和无义序列组[(73.0±3.4)个](均P〈0.05)。体内实验结果表明,miR-451mimics组的肿瘤体积[(697.31±65.25)mm^3]明显小于空白对照组[(1753.69±76.52)mm^3]和无义序列组[(1532.64±65.31)mm^3](均P〈0.05);免疫组化结果表明,与空白对照组和无义序列组相比,miR451 mimics组肿瘤组织MMP-2、MMP-9蛋白表达显著降低(均P〈0.05)。结论miR-451通过调控MMP-2和MMP-9的表达抑制LN229胶质瘤细胞的侵袭性生长能力,可能为潜在的人脑胶质瘤基因治疗的候选靶点。
- 南阳郭丽云王乐甄英伟郭红宝张亚辉郭连梅俞凯黄强钟跃
- 关键词:神经胶质瘤肿瘤侵润基质金属蛋白酶类