张瑞芝
- 作品数:25 被引量:59H指数:6
- 供职机构:东北林业大学林学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金黑龙江省博士后基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 松材线虫抗逆态基因Bx-DAF6鉴定及基因沉默被引量:9
- 2016年
- 为探究松材线虫抗逆态幼虫形成的分子机理,本文对抗逆态基因daf-6进行了鉴定和基因沉默研究。应用BLAST比对技术,在松材线虫基因组数据中鉴定得到秀丽线虫daf-6的同源基因,命名为Bx-DAF6。应用PCR技术进行Bx-DAF6完整蛋白编码区(CDS)扩增。采用RNAi技术进行Bx-DAF6沉默,分析该基因的沉默对松材线虫抗逆态幼虫形成的影响。PCR扩增得到CDS区全长2 700 bp,Bx-DAF6编码的蛋白质具有固醇传感结构域。Bx-DAF6沉默抑制了2龄幼虫转变为抗逆态幼虫,表明Bx-DAF6在2龄幼虫转变为抗逆态幼虫生理过程中起正向调控作用。
- 王峰李丹蕾马玲王博文陈俏丽张瑞芝苏丹康新宇翟雯
- 关键词:松材线虫松树萎蔫病基因鉴定基因沉默
- 水稻抗干尖线虫基因OC-XⅡ的克隆及表达研究
- 2015年
- 抗性验证试验表明籼稻大白谷抗水稻干尖线虫侵染。为进一步探究此抗性与病程相关蛋白——半胱氨酸蛋白酶抑制剂(Cystatin)的相关性,基于水稻基因组数据克隆籼稻大白谷Cystatin家族的OC-XII基因,分别进行OC-XII、JaponicaOC-XII和Indica-OC-XII蛋白质三维结构构建,并与水稻干尖线虫组织蛋白酶B(Cathepsin B)进行分子对接以验证OC-XII基因编码蛋白对Cathepsin B的抑制功能。通过荧光定量qPCR验证OC-XII基因在线虫侵染前后的表达特性,OC-XII蛋白可以与水稻干尖线虫Cathepsin B蛋白质特异结合,线虫侵染后OC-XII基因在浸染12h^2d期间表达量持续上调,侵染3d后下调。表明OC-XII基因在大白谷抗水稻干尖线虫侵染过程中发挥功能,具有对植物寄生线虫进行生物防治的潜力,有必要对其进行深入研究。
- 王峰陈俏丽李丹蕾零雅茗王博文张瑞芝贾岩岩李永航裴雨滢逯昕明
- 关键词:半胱氨酸蛋白酶抑制剂水稻干尖线虫组织蛋白酶B
- 松材线虫潜育期延长导致红松越年枯死被引量:1
- 2024年
- 【目的】探究红松越年枯死的病理学过程和产生原因,以期为有效除治无松材线虫病症状的携带者松树提供理论依据。【方法】统计抚顺市大伙房实验林场自然侵染红松越年枯死比例,观测自然侵染和人工接种红松病症病状,测定红松当年显症的松材线虫数量阈值。实验室内不同温度下测定松材线虫虫口增长情况,以及媒介昆虫羽化后适宜松材线虫虫口有效增长的时期(虫口增长期),计算从寄生关系的建立到症状开始出现的时间(潜育期),并揭示红松感染松材线虫后越年枯死的原因。【结果】截至6月,自然侵染红松的越年枯死比例为41.4%。观测的自然侵染和低剂量人工接种红松在被侵染或接种当年均未出现显著外部、内部症状变化,而是到翌年松脂分泌停止,树干水分低,针叶变红褐色,只有进行高剂量饱和接种才出现当年半数显症。病症表现为松材线虫能够正常侵染红松,可有效繁殖但在低温时繁殖受阻,可成功越冬但越冬后虫口数量骤减。红松显症的全株阈值St1=(163±22)条·g^(-1),局部阈值St2=(621±20)条·g^(-1)。以每株50000条的接种量接种38年生红松,在当年虫口增长期内全株松材线虫数量仅为(90±8)条·g^(-1),低于St1、局部松材线虫数量最高为(350±18)条·g^(-1),也低于St2。抚顺的虫口增长期(141天)比大连(154天)和南京(173天)短。经计算,抚顺市松材线虫的潜育期为146天,长于虫口增长期。【结论】云杉花墨天牛携带的松材线虫数量相对较低,导致初始侵染量低。松材线虫生命周期受温度特性的影响,表现为非增长期长、虫口增长期短,最终导致在虫口增长期内未能达到红松显症的松材线虫数量阈值。这些综合作用导致松材线虫潜育期延长,其中41.4%的死亡红松表现出越年枯死现象。
- 王佳楠姜生伟张瑞芝李德斌吴昊吴昊张亿珍王家庆王家庆李丹蕾
- 关键词:松材线虫
- 欧美杨再生体系的建立被引量:11
- 2017年
- 黑杨派的杂交后代欧美杨(Populus nigra×P.deltoides)在杨树叶锈病研究领域具有重要价值。本研究以叶柄、叶片和茎段作为外植体进行组织培养,构建欧美杨再生体系。分别优化了初代培养、继代培养、抽茎培养和生根培养的培养条件。正交试验结果表明,最优初代培养培养基配方:MS+0.5 mg/L6-BA+0.05 mg/L NAA。最优继代培养培养基配方:MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA。最优抽茎培养培养基配方:MS+0.1 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA。最优生根培养培养基配方:1/2MS+0.25 mg/L NAA+20 g/L蔗糖。以上培养基培养分别得到叶柄分化率为86.7%,不定芽诱导率为96.7%,抽茎率为91.7%,生根率为85%。再生苗移栽成活率为91.5%。所获得的欧美杨再生苗扩繁简便,可用于杨树抗叶锈病相关基因转化等研究。欧美杨再生体系为揭示欧美杨的感病机理提供物质基础。
- 张瑞芝王峰李丹蕾陈俏丽牛春阳零雅茗
- 关键词:欧美杨
- C14族R2R3-MYB基因调控杨树抗锈菌过敏性反应被引量:5
- 2016年
- 由落叶松-杨栅锈菌引起的杨树叶锈病分布广泛,危害严重。为探究杨树C14族R2R3-MYB基因在杨树抗锈菌过敏性反应中的调控作用,对接种了落叶松-杨栅锈菌E4强致病性生理小种的2种杨树叶片进行症状观察、感病指数判定并对2种杨树C14族共6条R2R3-MYB基因表达量变化情况进行分析。接种7 dpi后,弱感病性树种杂交杨叶片产生的夏孢子堆数量显著少于感病树种欧美杨。杂交杨叶片4 dpi开始出现过敏性反应症状,欧美杨未观察到类似症状。表明过敏性反应可有效阻止锈菌夏孢子堆形成,降低杨树感病性。杂交杨与欧美杨R2R3-MYB基因表达量变化趋势相反,预测杨树C14族R2R3-MYB基因为杨树与病原互作过程中调控过敏性反应的正向调控因子。本研究为进一步系统研究杨树R2R3-MYB基因与过敏性反应的调控机理及杨树抗病育种工作提供理论依据。
- 牛春阳王峰李丹蕾陈俏丽张瑞芝
- 关键词:欧美杨落叶松-杨栅锈菌
- 水稻干尖线虫Ab-lea基因在高渗透压下的表达被引量:2
- 2017年
- 【目的】水稻干尖线虫(Aphelenchoides besseyi)在侵染寄主以前,能够以变渗隐生状态在土壤和种子中的高渗透压环境下长期存活,使防治该线虫极为困难。通常,非生物胁迫下,胚胎发育晚期丰富蛋白(late embryogenesis abundant protein,LEA)的基因表达量会显著上调。作为逆境表达蛋白,LEA能在逆境下保护生物。为探究水稻干尖线虫LEA编码基因(Ab-lea)在高渗透压胁迫下的表达模式及功能,【方法】根据转录组数据克隆到Ab-lea。以无机溶剂饱和Mg SO4·7H2O溶液为高渗透压胁迫剂,对水稻干尖线虫进行高渗透压胁迫,240 min后该线虫进入变渗隐生。通过RT-PCR验证Ab-lea在线虫进入变渗隐生及维持变渗隐生过程中的表达特性。使用RNAi技术,探究该线虫Ab-lea沉默后,高渗透压胁迫下存活率变化。【结果】RT-PCR结果表明,Ab-lea在进入变渗隐生前期及维持变渗隐生过程中表达量上调。Ab-lea沉默后,水稻干尖线虫在进入变渗隐生后存活率显著下降。【结论】表明该基因可能参与调控水稻干尖线虫变渗隐生。本研究为进一步探究该线虫抗高渗透压胁迫的生理机制奠定基础,为防治该线虫提供新思路。
- 陈俏丽王峰李丹蕾零雅茗张瑞芝
- 关键词:水稻干尖线虫
- 一种抗锈病黑杨组培苗的继代培养方法
- 一种抗锈病黑杨组培苗的继代培养方法,涉及一种黑杨组培苗的继代培养方法。本发明是要解决目前组培扩繁过程中及继代培养后抗锈病的抗性易缺失的问题。方法:一、从活化培养的1年生黑杨休眠枝条上分离叶片,接种锈菌,将接种叶片置于生长...
- 李丹蕾王峰陈俏丽张瑞芝牛春阳王博文
- 文献传递
- MicroRNA转录后调控欧美杨R2R3-MYBs抗锈菌表达被引量:6
- 2017年
- [目的]强致病锈菌亲和型树种欧美杨适合做寄主感病分子机理研究。研究表明转录因子及其调控miRNA在杨树抗/感病过程中起重要的信号传导和调控作用,决定杨树与锈菌的亲和性。为深入研究杨树感病性,对欧美杨R2R3-MYB转录因子及其调控miRNA进行研究。[方法]构建锈菌侵染和未侵染miRNA组、降解组文库和基因表达谱文库,进行高通量测序。对基因表达谱结果进行生物信息学分析鉴定R2R3-MYBs,根据miRNA组和降解组数据确定R2R3-MYBs调控miRNA。应用定量PCR技术鉴定候选R2R3-MYBs和其调控miRNA的表达量。[结果]共鉴定到230个欧美杨R2R3-MYBs,其中55个R2R3-MYBs在锈菌侵染和未侵染叶片间表达量差异显著,其余表达量变化不显著。基于降解组,共鉴定到由22个miRNA调控18个R2R3-MYBs的86个转录后调控关系。定量PCR结果表明PC-3p-2521022_1与Pnd MYB173存在转录后负调控关系。预测的R2R3-MYB靶基因涉及水杨酸、茉莉酸、乙烯和脱落酸等多个植物激素抗性路径。[结论]E4强致病锈菌侵染导致亲和型树种欧美杨23.9%的R2R3-MYBs表达量发生变化,锈菌侵染不但可以影响R2R3-MYBs的表达量,还可以启动或关闭R2R3-MYBs的表达。欧美杨在E4强致病锈菌胁迫条件下,R2R3-MYBs转录后主要受miR159和miR858家族的miRNA调控。
- 李丹蕾张瑞芝王峰陈俏丽牛春阳零雅茗郝昕
- 关键词:MICRORNA欧美杨落叶松-杨栅锈菌
- 一种植物叶盘切割器
- 一种植物叶盘切割器,本实用新型涉及一种叶盘切割器。本实用新型是要解决现有切取叶盘的方法难以保证叶盘面积准确,叶盘边缘不整齐且难以取出的问题。该切割器包括提手、镍合金筒体、切割刀、叶盘推出活塞、弹簧和观察窗,切割刀为环形刀...
- 李丹蕾王峰陈俏丽张瑞芝牛春阳王博文
- 文献传递
- 高渗透压胁迫下水稻干尖线虫Ab-tre基因表达被引量:1
- 2018年
- 水稻干尖线虫可通过海藻糖酶水解海藻糖提供能量以适应高渗透压胁迫,本研究旨在探究水稻干尖线虫海藻糖酶基因(Ab-tre)在高渗透压胁迫下的表达。在转录组测序结果基础上,克隆到水稻干尖线虫海藻糖酶基因,以30%甘油溶液为高渗透压胁迫剂,通过荧光定量Q-PCR及原位杂交探究该基因在高渗透压胁迫下的表达。荧光定量Q-PCR表明,高渗透压胁迫3~7 min,及高渗透压胁迫140 min后在蒸馏水中恢复90 min时,Ab-tre表达量均有显著上调。原位杂交表明,Ab-tre主要在水稻干尖线虫体中部有杂交信号。本研究表明Ab-tre与水稻干尖线虫抗高渗透压胁迫过程相关,对Ab-tre功能进行研究,可为防治该线虫奠定理论基础。
- 陈俏丽王峰李丹蕾零雅茗张瑞芝
- 关键词:水稻干尖线虫海藻糖酶