夏倩
- 作品数：8 被引量：42H指数：4
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金国家自然科学基金国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 可溶性CD160分子对荷瘤小鼠CD4＋T细胞免疫活性的调节作用被引量：1
- 2015年
- 目的观察CDl60胞外段（即可溶性CD160分子）对荷瘤小鼠CD4＋T淋巴细胞的活悱和饱疫功能的影响。方法构建小鼠CD160分子胞外段（sCD160）的重组表达载体psCDl60，转让『j1Ij4仓鼠卵巢（CHO）细胞，Westernblot检测培养上清中的sCDl60水平。建立TC-1宫颈癌细胞简蜊小鼠模型，流式细胞术（FCM）检测CDl60存脾CD4＋T细胞上的表达；免疫磁珠分选荷瘤3周小鼠脾CD4＋T细胞，与负载肿瘤细胞抗原肽复合物的树突状细胞（DC）共培养6d，FCM检测CD4＋T细胞tCDl60的表达。负载抗原肽复合物的DC分别在转染pcDNA3．1或psCDl60的CHO培养卜清中孵育18h后，与分选的CD4＋T细胞共培养6d，羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂（CFSE）标i0法枪测CD4＋T细胞增殖，酶联免疫吸附实验（ELISA）检测培养上清中白细胞介素-2（IL-2）和γ-干扰素（IFN-1）的浓度。结果转染psCDl60的CHO细胞表达并分泌可溶性CDl60分子。荷瘤3删小鼠CD4＋T细胞上CDl60分子的阳性率与对照组比较差异无统计学意义[（5．288±2．723）％比（3．213±1．461）％，P〉0．05]，在体外被负载特异性抗原肽复合物的DC再活化后，其CD160阳性著增高达（17．590±7．287）％（P〈0．05）。与未经sCD160作用的DC组相比，经sCD160封闭的负载特异性抗原肽复合物的DC再活化的CD4＋T细胞中增殖细胞百分数[（17．980±5．337）％比（12．610±4．431）％，P〈0．05]、上清巾的IL-2和IFN-γ浓度[（383．9±83．67）ng／L比（237．5±54．64）ng／L，（730．8±135．8）ng／L比（451．9±149．5）ng／L，P〈0．05]均显著升高。结论肿瘤特异性CD4＋T细胞在体外冉活化后CD160的表达升高，可溶性CD160阻断其作用可有效增强CD4＋T细胞增殖和细胞因子分泌的活性。
- 肖晗孙红刘秀珍向飞艳夏倩向赟
- 关键词：CD4+T细胞白细胞介素-2Γ-干扰素
- 武汉地区儿童β地中海贫血基因突变类型分析被引量：7
- 2015年
- 目的 探讨武汉地区儿童β地中海贫血致病基因分布情况。方法 选择2013年1月至2015年1月在武汉市妇女儿童医疗保健中心就诊的经血细胞分析筛选出的疑似β地中海贫血患儿274例，其中男性178例，女性96例；年龄6个月 ～ 14岁，平均年龄为2.83岁。采集乙二胺四乙酸二钾盐（EDTA）抗凝静脉血，提取白细胞DNA，采用PCR寡核苷酸探针反向斑点杂交法（PCR-RDB）进行β地中海贫血基因检测，对基因突变位点和基因型进行分析。结果 274例β地中海贫血初筛患儿中确诊152例，检出率为55.47 %（152/274）。共检出9种等位基因突变，分别为IVS-2-654、CD41-42、CD17、CD43、CD71-72、CD27-28、-28、-29、CD26；3种最常见的突变位点IVS-2-654、CD41-42、CD17分别占到全部等位基因突变的43.81 %（85/194）、23.20 %（45/194）、12.89 %（25/194）。共检出26种β地中海贫血基因型，9种单纯杂合子110例（占72.37 %，110/152），13种双重杂合子36例（占23.68 %，36/152），4种纯合子6例（占3.95 %，6/152）。结论 β地中海贫血是武汉地区贫血患儿的重要原因之一；武汉地区β地中海贫血患儿以IVS-2-654位点的突变最为常见。
- 肖晗向赟孙红向飞艳夏倩
- 关键词：Β地中海贫血基因型
- CD160在EB病毒感染患儿T淋巴细胞上的表达及临床意义被引量：4
- 2015年
- 目的探讨共抑制分子CD160在EB病毒感染患儿外周血CD8^+T淋巴细胞上的表达及临床意义。方法选取2013年1月~2014年12月在武汉市妇女儿童医疗保健中心就诊的急性EB病毒感染患儿、慢性EB病毒感染患儿和同期健康对照儿童各27例。酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清EB病毒特异性抗体,实时荧光聚合酶链反应法(Realtime PCR)定量检测外周血淋巴细胞EBV-DNA,流式细胞仪检测外周血CD4^+、CD8^+T细胞亚群比例以及共抑制分子CD160、PD-1和2B4在CD8^+T细胞上的表达率,并将CD160、2B4的表达率与外周血病毒载量行相关性分析。结果急性感染患儿外周血淋巴细胞CD4^+/CD8^+比值急剧降低,慢性感染患儿该比值有所恢复;与对照组相比,共抑制分子CD160和2B4在慢性感染患儿外周血CD8^+T细胞上的表达明显增高(P<0.05),而在急性感染患儿中的表达无明显变化,PD-1在急、慢性感染患儿中的表达均无明显变化;CD160在CD8^+T细胞上的表达率与患儿外周血EB病毒载量呈正相关(r=0.445 8,P<0.05),而2B4的表达率与病毒载量无明显相关性。结论 CD160在慢性EB病毒感染患儿外周血CD8^+T细胞上的表达上调,且与外周血EB病毒DNA载量呈正相关。
- 肖晗孙红刘秀珍向飞艳夏倩向赟
- 关键词：EB病毒CD4^+T细胞CD8^+T细胞
- 武汉地区女性宫颈人乳头状瘤病毒感染与亚型分布研究被引量：11
- 2016年
- 目的研究武汉地区女性宫颈人乳头状瘤病毒（HPV）感染状况及基因亚型分布,丰富HPV感染的分子流行病学资料,为制定防治HPV感染及宫颈癌的措施提供依据。方法收集2014年5月-2015年6月在武汉市妇女儿童医疗保健中心就诊和体检的女性患者宫颈刷取物标本9 083例,采用基因扩增及导流杂交技术进行21种HPV亚型的基因分型检测。结果共检出HPV阳性标本1 586例,感染率为17.46%,其中,单一亚型感染占75.35%,多重感染占24.65%;检出频率最高的前5位高危亚型分别为52、16、58、39、51,其阳性率分别为4.18%、2.49%、2.33%、1.82%、1.63%;≤20岁年龄组阳性率最高（P〈0.05）,达到38.46%,21-25岁、45-50岁和51-55岁3个年龄组阳性率〉20%;不同月份HPV感染阳性率差异无统计学意义。结论武汉地区女性HPV感染率及多重感染率较高,以52型、16型、58型最为常见。
- 肖晗孙红向飞艳夏倩刘秀珍向贇
- 关键词：人乳头状瘤病毒基因亚型分子流行病学
- MED13L综合征患者的临床表型及遗传学分析被引量：1
- 2017年
- 患者,男,4岁2个月,因语言、运动发育落后1年余就诊,并有步态不稳、眼神交流差、刻板行为及癫癎发作。查体发现面容特殊:斜头畸形、眼睑下垂、鼻梁扁平、两侧嘴角下沉、耳位较低等,以及左手小手指2节。辅助检查提示脊柱侧弯、室间隔缺损、语言发育迟缓和中度智力障碍,染色体核型无异常,全基因组SNP芯片技术检测发现患者12号染色体q24.21区域重复1个拷贝、大小为1.03Mb,患者父母该区域未见异常。确诊为MED13L综合征。MED13L基因点突变、缺失或重复突变均可导致MED13L综合征,不同的基因型可导致不同的临床表型。SNP技术可协助确诊。
- 孟庆杰何学莲肖晗夏倩毕博向赟
- 关键词：拷贝数变异
- 武汉地区宫颈感染人乳头瘤病毒患者年龄分布及感染类型特征被引量：14
- 2017年
- 目的了解武汉地区宫颈感染人乳头瘤病毒(HPV)患者年龄分布、HPV感染亚型,为HPV感染及宫颈癌的预防和治疗提供科学依据。方法对2015年1月—2016年3月武汉市妇女儿童医疗保健中心妇产科送检的9 915份宫颈刷取物标本进行HPV基因分型检测(21种亚型),对1 732例HPV阳性病例的临床数据进行统计分析。结果≤25、26~、36~、46~和≥56岁年龄组HPV阳性率分别为22.15%、15.90%、17.04%、19.97%和17.57%,各组差异具有统计学意义(χ~2=36.587,P<0.01),≤25和46~岁年龄组的阳性率均高于其他各组。不同年龄组患者单一感染和多重感染率比较,差异均有统计学意义(χ~2值分别为14.39、36.51,均P<0.05),单一感染以46~和≤25组最高,分别为15.41%、15.24%;多重感染以≤25和≥56年龄组最高,感染率分别为6.90%和5.86%。单一感染和多重感染所占比率分别为75.58%、24.42%,单一感染以HPV高危亚型为主(84.34%),多重感染以高危-高危复合型和高危-低危复合型为主,分别占60.52%、38.77%。以单一感染为主导的有HPV高危亚型33、68、31、16型和HPV低危亚型11型,其所致单一感染/多重感染的比值分别为3.13、2.03、1.71、1.67和2.00。结论武汉地区宫颈HPV感染率以≤25和46~岁年龄组较高,单一感染和多重感染HPV各亚型分布具有差异。
- 肖晗孙红向飞艳夏倩刘秀珍向贇
- 关键词：人乳头瘤病毒宫颈癌
- CD160的表达与荷瘤小鼠CD8＋T细胞免疫活性的关系被引量：1
- 2015年
- 目的 探讨CD160分子在荷瘤小鼠CD8＋T淋巴细胞上的表达及其对CD8＋T细胞活性和免疫功能的影响.方法 C57BL/6小鼠接种TC-1宫颈癌细胞建立小鼠荷瘤模型,免疫磁珠分选小鼠脾脏细胞获得CD8＋T细胞,流式细胞术检测CD160在CD8＋T细胞上的表达;流式细胞仪（FACS）分选CD8＋T细胞获得CD160＋ CD8＋T细胞群和CD160-CD8＋T细胞群,将两群细胞分别与肿瘤细胞抗原肽热休克蛋白70 （HSP70）-TC-1复合物和去除CD8＋T的脾细胞混合,两群混合细胞各分为两组,其中一组同时加入CD160高亲和力配体单纯疱疹病毒侵入介导子（HVEM）的抗体,刺激培养6d,羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂（CFSE）标记法检测CD8＋T细胞增殖,流式细胞术检测各组细胞胞内穿孔素和γ-干扰素（IFN-γ）的表达.结果 荷瘤3周,小鼠CD8＋T细胞上CD160分子的阳性率为（18.050 ±7.944）％,显著高于对照小鼠的阳性率[（8.663 ±3.921）％,P＜0.01];刺激培养后,CD160＋ CD8＋T细胞群中增殖细胞比例为（3.425 ±2.352）％,显著低于CD160-CD8＋T细胞群的（15.440±6.673）％ （P＜0.01）,抗HVEM抗体阻断CD160与HVEM的相互作用后,CD160＋ CD8＋T细胞群中增殖细胞比例显著增高达到（12.000 ±5.286）％ （P ＜0.01）;同时,CD160＋CD8＋T细胞群中表达穿孔素和IFN-γ的阳性细胞率分别为（5.263±2.752）％和（4.150±2.499）％,显著低于CD160-CD8＋T细胞群的（17.600±7.203）％和（11.480 ±4.790）％ （P＜0.01）,抗HVEM抗体的作用使CD160＋ CD8＋T细胞群中表达穿孔素和IFN-γ的阳性细胞率显著增高,分别达到（12.380±4.922）％和（11.280 ±4.037）％ （P ＜0.01）.结论 CD160在荷瘤小鼠的脾CD8＋T细胞上表达升高且与其免疫活性功能的下降有关;阻断CD160和HVEM的相互作用,部分逆转了CD8＋T细胞的免疫活性的抑制.
- 肖晗孙红刘秀珍向飞艳夏倩向赟
- 关键词：CD8+T细胞穿孔素Γ-干扰素
- 患儿全血淋巴细胞及血清中EB病毒核酸定量结果的比较研究被引量：3
- 2016年
- 目的比较EB病毒(EBV)感染患儿全血淋巴细胞和血清中EB病毒DNA(EBV-DNA)定量分析结果的关系,探讨如何根据患儿感染状态合理选择临床标本类型。方法收集医院2015年9月-12月疑似EB病毒感染的患儿199例,分别取患儿的外周全血及血清,采用实时荧光PCR定量检测EBV-DNA及酶联免疫吸附法测定EBV-CA-IgM,数据采用SPSS 13.0软件进行统计分析。结果全血淋巴细胞EBV-DNA阳性标本95例,阳性率为47.7%;血清EBV-DNA阳性标本36例,阳性率为18.1%;血清EBV-CA-IgM抗体阳性23例,阳性率为11.6%;当血清IgM抗体阴性时,两种标本类型EBV-DNA阳性率差异有统计学意义(P<0.01);将全血及血清EBV-DNA均为阳性的标本进行配对分析,定量结果呈正相关(P<0.01)。结论全血中淋巴细胞的EBV-DNA阳性率及拷贝数均高于血清。临床上可以根据患儿的病情来选择合适的标本。
- 夏倩向飞艳曾叶向贇肖晗
- 关键词：EB病毒DNA实时荧光定量PCR
