彭晓燕
- 作品数:5 被引量:5H指数:2
- 供职机构:郑州大学公共卫生学院更多>>
- 发文基金:中国博士后科学基金河南省高校科技创新团队支持计划河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域:医药卫生环境科学与工程轻工技术与工程更多>>
- 幽门螺杆菌lpp20基因在食品级乳酸菌中的表达及免疫活性鉴定
- 2016年
- 目的:构建分泌表达幽门螺杆菌lpp20基因的重组乳酸乳球菌菌株,并鉴定其免疫活性,为研究安全高效的幽门螺杆菌口服疫苗奠定基础。方法:采用PCR法从幽门螺杆菌基因组DNA中扩增lpp20基因,将lpp20先与T载体(p MD19-T)连接,进而经双酶切与表达载体p NZ8149-SPusp45连接,用电穿孔法将重组质粒转入食品级乳酸乳球菌菌株NZ3900中,并用Nisin诱导Lpp20表达,表达产物通过Western blot法鉴定免疫活性。结果:lpp20基因的PCR扩增产物大小约为540 bp,重组质粒的酶切、PCR和测序鉴定结果符合预期;在菌体和培养基中均检出表达的Lpp20蛋白,重组表达的Lpp20蛋白相对分子质量约为20 000,且具有与小鼠抗幽门螺杆菌血清反应的免疫活性。结论:成功构建了能够分泌表达幽门螺杆菌Lpp20抗原的乳酸乳球菌菌株,该重组菌株在口服疫苗研究中具有应用潜力。
- 孙楠张荣光段广才陈帅印彭晓燕范清堂郗园林
- 关键词:乳酸菌幽门螺杆菌分泌表达食品级
- 幽门螺杆菌hspA-ureB融合基因在乳酸菌中的表达被引量:1
- 2016年
- 目的构建融合表达幽门螺杆菌(H.pylori)抗原Ure B与Hsp A的乳酸乳球菌(L.lactis)菌株,为H.pylori感染的疫苗和免疫诊断研究奠定基础。方法从前期构建的hsp A-ure B融合基因克隆菌株E.coli TB1/p MAL-c2x-hsp Aure B中提取质粒,用PCR方法从质粒中扩增hsp A-ure B基因,将扩增产物经限制性酶切后与表达载体p NZ8110连接,用于转化E.coli MC1061菌株,从转化子中提取重组质粒p NZ8110-hsp A-ure B,用电穿孔法将其转入L.lactis NZ3900菌株中,用乳链菌素诱导hsp A-ure B表达,应用PAGE分析表达产物。结果 hsp A-ure B基因的PCR扩增产物长度为2 085 bp,酶切、PCR和测序鉴定结果均显示L.lactis表达系统构建正确,PAGE分析未能确定融合基因表达条带。结论首次以L.lactis为宿主菌成功构建H.pylori 2种抗原的融合表达系统,研究发现对H.pylori口服疫苗和诊断技术发展具有重要意义。
- 张荣光孙楠段广才彭晓燕陈帅印范清堂
- 关键词:乳酸乳球菌热休克蛋白尿素酶幽门螺杆菌
- 幽门螺杆菌Lpp20基因在食品级乳酸菌中的表达及免疫活性鉴定
- 孙楠张荣光段广才陈帅印彭晓燕范清堂郗园林
- 幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白在乳酸菌中的表达及免疫活性被引量:2
- 2017年
- 目的构建表达幽门螺杆菌(H.pylori)中性粒细胞激活蛋白A(NapA)的重组乳酸乳球菌菌株,为研究NapA作为疫苗抗原和免疫调节剂的应用效果奠定基础。方法用PCR方法从H.pylori基因组DNA中扩增napA基因,将napA经Nae I和SphⅠ双酶切与表达载体pNZ8110连接,用电穿孔法转入乳酸乳球菌菌株NZ3900中,并通过SDS-PAGE和Western blots分析鉴定napA表达产物。结果扩增的nap A基因长度为435 bp,构建的重组乳酸乳球菌经nisin诱导可表达分子量约为19 kD的重组蛋白,表达量约占菌体总蛋白量的12.4%,该重组蛋白可被小鼠抗H.pylori血清识别。结论成功构建了表达NapA的重组乳酸乳球菌菌株,该菌株在H.pylori口服疫苗和黏膜免疫调节研究中具有应用潜力。
- 彭晓燕张荣光段广才孙楠王琛张凌寒
- 关键词:乳酸乳球菌幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白免疫活性免疫调节
- DBP基因rs7041位点多态性与汉族人群肥胖易感性的关系被引量:2
- 2015年
- 目的:探讨维生素D结合蛋白(DBP)基因rs7041位点多态性与汉族人群肥胖易感性的关系。方法:采用PCR·RFLP技术检测211例肥胖者和213例体重正常者的DBP基因rs7041位点基因型,采用logistic回归分析基因多态性与肥胖的关联性,采用多因素降维法分析基因一环境之间的交互作用。结果:肥胖组和对照组DBP基因rs7041位点TG+GG和TT基因型分布频率差异有统计学意义(X2=5.425,P=0.020),肥胖组rs7041位点等位基因G分布频率高于对照组(x2=5.175,P=0.023)。调整相关影响因素后,DBP基因rs7041位点TG基因型携带者肥胖危险性升高(调整OR=1.528,95%CI=1.017—2.295),TG+GG基因型携带者肥胖危险性升高(调整OR=1.605,95%CI=1.079~2.389)。进一步分析显示,DBP基因与环境因素(吸烟、饮酒、体力活动等)之间无交互作用(P〉0.05)。结论:DBP基因rs7041位点多态性与肥胖易感性之间存在关联。
- 王重建王高帅李玉倩刘晓田张路宁彭晓燕周浩王雪青任义别荣海
- 关键词:维生素D结合蛋白汉族