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用于药物递送的含修饰蛋白的双层膜囊泡及其制备方法和应用: 本发明提供了用于药物递送的含修饰蛋白的双层膜囊泡及其制备方法和应用，所述含修饰蛋白的双层膜囊泡是将修饰蛋白编码基因与基础载体连接后转入宿主细胞，诱导产生含修饰蛋白的双层膜囊泡；所述修饰蛋白包括标签蛋白TAG、适配体结合蛋...; 胡伯里林璐璐胡泽源

一种IPTG诱导猪源LC3B蛋白表达的方法: 本发明公开了一种IPTG诱导猪源LC3B蛋白表达的方法。方法包括将pET28a‑LC3B原核表达载体，转化大肠杆菌BL21(DE3)，经过选择性培养、单克隆液体培养、PCR检测，选择带有目的条带的菌液，转接培养；在转接培...; 张奕怡胡伯里胡泽源陈未

传染性法氏囊病病毒动态调控细胞自噬的分子机制研究: 引言/目的细胞自噬能够直接清除细胞中入侵的病原,在免疫反应中发挥着重要的作用。但是,越来越多的研究表明,成功侵染的病毒能够阻止或挟持细胞自噬来促进自身复制。因此,明确病毒与细胞自噬互作的分子机制对于抗病毒策略的制定和药物...; 胡伯里张宜娜周继勇; 关键词：细胞自噬病毒蛋白分子机制传染性法氏囊病病毒

猪流行性腹泻病毒非结构蛋白nsp9互作宿主蛋白对病毒复制的影响被引量：2: 2023年; 猪流行性腹泻病毒(porcineepidemicdiarrheavirus,PEDV)导致仔猪和育肥猪发生急性肠道传染病,是危害养猪业最重要的病原体之一。目前发现PEDV能够编码至少16个非结构蛋白,其中nsp9能够结合至单链RNA中,但是其功能机制还不清楚。本研究通过免疫沉淀联合蛋白质谱分析,筛选出潜在的与PEDV nsp9宿主互作蛋白。通过进一步免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)和激光共聚焦技术确认了nsp9与热休克蛋白HSPA8、Toll相互作用蛋白Tollip、热休克蛋白HSPA9、线粒体外膜蛋白TOMM70互作。其中,过表达HSPA8使nsp9的表达量先上调而后下调,并促进PEDV的增殖;过表达Tollip使nsp9的表达量显著上调,并抑制PEDV的增殖;过表达TOMM70使nsp9的表达量显著下调,但对PEDV的增殖无明显影响;过表达HSPA9对nsp9的表达以及PEDV的增殖均无明显影响。该研究为探索nsp9互作蛋白在PEDV感染过程中的功能提供了重要信息。; 施朱桂吴佳瑜朱雅周继勇胡伯里; 关键词：猪流行性腹泻病毒质谱技术

非洲猪瘟病毒内囊膜蛋白p17与宿主互作蛋白的初步鉴定被引量：1: 2022年; 非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的感染导致猪的死亡率高达100%,给养猪业造成毁灭性灾难。因此,开展针对ASFV感染复制的研究有着重大的意义。目前发现ASFV有超过150个开放阅读框,其中D117L基因编码的内囊膜蛋白p17参与病毒二十面体结构的形成,但是对p17调控宿主细胞功能的机制知之甚少。研究通过免疫沉淀技术联合蛋白质谱分析,初步筛选出与ASFV p17潜在的宿主互作蛋白。通过进一步免疫共沉淀技术和激光共聚焦实验确认了p17与线粒体外膜蛋白TOMM70(translocase of outer mitochondrial membrane 70)、热休克蛋白HSPA8(heat shock 70 kDa protein 8)的互作。该研究为进一步探索p17在ASFV感染过程中的功能提供了重要信息。; 钟桂芳邓婷娟徐康倪温碧王裴胡伯里周继勇; 关键词：非洲猪瘟病毒质谱

选择性自噬调控传染性法氏囊病病毒复制的机制研究: 引言自噬能够降解和清除细胞中众多底物和入侵微生物,是调节细胞稳态和存活的重要过程。而选择性自噬受体对底物的识别是自噬过程的核心环节,决定了自噬的功能类别,如自噬受体对病毒的识别决定了自噬的抗病毒功能。因此,明确选择性自噬...; 胡伯里张宜娜周继勇

2019—2021年浙江地区H9N2亚型禽流感病毒的进化分析被引量：3: 2022年; 为调查H9N2亚型禽流感病毒在浙江地区的流行变异情况,采用RT-PCR方法对采集自浙江多个集散中心的共475份样品进行检测,并采用鸡胚接种分离病毒的方法从核酸阳性的样品中进行病毒分离。结果显示,从阳性样品中分离获得3株H9N2毒株,其HA裂解位点均为PSRSSRGLF,符合低致病性禽流感病毒的序列特征,HA受体结合位点第234位氨基酸为亮氨酸,具有与哺乳动物唾液酸受体结合的特征;3株分离株均增加了第313位糖基化位点。结果表明,3株H9N2分离株的HA、NA基因均属于Y280-like分支,PB2、M基因均属于G1-like分支,PB1、PA、NP、NS基因均属于F/98-like分支。本研究结果为禽流感疫苗研发提供了流行病学参考。; 倪温碧崔明仙颜焰胡伯里周继勇; 关键词：禽流感病毒 H9N2亚型遗传进化分析

非洲猪瘟病毒A151R蛋白核定位信号的鉴定: 2022年; 为研究非洲猪瘟病毒(ASFV)非结构蛋白A151R发挥功能的亚细胞定位,通过荧光显微镜观察发现,A151R蛋白能够聚集在细胞核内。使用在线软件预测A151R中存在的核定位信号(NLS),并构建缺失NLS的A151R质粒。荧光共聚焦显微镜观察结果表明,缺失NLS的重组A151R蛋白A151RΔNLS无法进入细胞核。细胞核质分离结果显示,NLS序列能够协助EGFP进入细胞核,证明了NLS的核输入能力。以上证据均表明A151R依赖于NLS进入细胞核,为进一步研究其在ASFV复制中的功能提供了重要的信息。; 王裴倪温碧钟桂芳胡伯里周继勇; 关键词：非洲猪瘟病毒核定位信号亚细胞定位

鸡源IFIT5蛋白的体外表达及单克隆抗体的制备: 2016年; 鸡IFIT5(chIFIT5)蛋白在抗病毒免疫中具有重要作用。为了阐明其具体作用机制,本研究将禽传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)感染DF-1细胞后,通过RT-PCR方法扩增chIFIT5基因,将其构建到pET-28a(+)原核表达载体上进行表达,然后用纯化的重组chIFIT5蛋白免疫小鼠后通过细胞融合技术筛选能稳定分泌抗chIFIT5蛋白的单克隆抗体细胞株。结果显示,扩增获得的chIFIT5基因的大小为1 440 bp,在原核细胞中成功表达的重组chIFIT5蛋白约58 ku。Western-blot检测显示,有4株单抗与重组chIFIT5蛋白、IBDV感染的细胞中chIFIT5蛋白以及Myc-chIFIT5真核转染蛋白均能发生免疫反应,但间接免疫荧光(IFA)检测反应却均呈阴性。抗体亚类分析结果显示,四株细胞株所分泌的单克隆抗体均为Ig G 2a亚类,轻链均为κ链。这为鸡源IFIT蛋白的生物学特性研究奠定了基础。; 高向向贾璐胡伯里邓婷娟郑肖娟周继勇; 关键词：单克隆抗体抗体亚型

传染性法氏囊病病毒结构蛋白VP2和VP3调控细胞自噬的分子机制研究: 自噬是一种细胞内保守的蛋白及废物降解机制，同时也在细胞清除病原的过程中发挥重要作用。在不同病毒的感染过程中，自噬扮演了不同的角色。至今未见IBDV与自噬关系的研究。本研究中，我们以DF-1细胞为模型研究了IBDV与细胞自...; 胡伯里; 关键词：VP2蛋白 VP3蛋白

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胡伯里