杨明珍
- 作品数:13 被引量:39H指数:4
- 供职机构:第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
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- 调节自噬对乳腺癌细胞紫杉醇耐药性影响的实验研究被引量:6
- 2013年
- 目的观察调节自噬对乳腺癌细胞紫杉醇耐药性的影响。方法选取两株乳腺癌细胞MDA-MB-231及MDA-MB-468细胞,分为不同浓度的紫杉醇(PTX)组、联合自噬激动剂雷帕霉素(PTX+Rapa)组和联合自噬抑制剂3-MA(PTX+3-MA)组(对照组给予相应溶剂),分别作用24 h、48 h及72 h后,应用MTT比色法检测各组细胞的存活率及抑制率。结果 PTX+Rapa组对两株乳腺癌细胞的抑制作用均显著优于单独给药的PTX组及PTX+3-MA给药组(P<0.01),而PTX+3-MA组对两株乳腺癌细胞的抑制作用则明显弱于单独给药的PTX组(MDA-MB-231,P<0.05;MDA-MB-468,P<0.01),提示自噬激动剂雷帕霉素(10 nm)可降低乳腺癌细胞对紫杉醇耐药性,增强紫杉醇对乳腺癌细胞的抑制作用,而自噬抑制剂3-MA(10 mm)在一定程度上增强乳腺癌细胞紫杉醇耐药性,拮抗紫杉醇对乳腺癌细胞的抑制作用。结论调节自噬能明显影响乳腺癌细胞对紫杉醇的耐药性,这为自噬与乳腺癌细胞紫杉醇耐药性关系的研究提供了新的思路。
- 陈莎韩起王旭辉杨明珍张竹君陈安胡川闽李淑慧
- 关键词:自噬乳腺癌紫杉醇耐药
- 乳腺癌多药耐药蛋白质分子IBP的应用
- 本发明公开了乳腺癌多药耐药蛋白质分子IBP的应用,IBP的氨基酸序列如SEQ ID NO.11所示,研究发现乳腺癌多药耐药细胞MCF‑7/ADR中IBP表达显著高于MCF‑7亲本细胞,并且乳腺癌细胞中IBP表达降低后对多...
- 杨明珍袁方胡川闽陈安李淑慧
- 文献传递
- 医学检验专业创新型人才的培养与实践被引量:6
- 2013年
- 具有创新意识、创新精神和创新能力的人才是一个国家和民族最宝贵的财富。传统的医学检验教学模式是以教师向学生传输知识为主的知识继承型教学模式,忽略了学生的主体地位和创新能力,不能适应新世纪对创新型人才的实际需求。如何培养具有综合创新能力的医学检验人才已成为高校教育的重要课题。文章从营造"以学生为中心"的教学环境、
- 李淑慧韩起陈莎杨明珍张竹君张阳向莉陈安胡川闽
- 关键词:医学检验专业创新型人才以学生为中心教学模式
- 一个新的高保守自身免疫反应相关分子IRF-4结合蛋白多克隆抗体制备被引量:4
- 2008年
- 目的获得一个新的高保守自身免疫反应相关分子IRF-4结合蛋白(IRF-4-binding protein,IBP)的高效价特异性多克隆抗体。方法通过生物信息学分析选择IBP特异片段(1228~1893bp),目的片段cDNA插入pET32a和pGEX-KG原核表达载体,分别转化BL21感受态细菌,IPTG诱导表达后组合应用阴离子交换层析、His、GST亲和层析技术获得免疫原(pET32a/IBP融合蛋白)及检测原(pGEX-KG/IBP融合蛋白)。HPLC鉴定纯度。利用改良快速免疫法获得兔抗IBP多克隆抗血清,并经蛋白A柱纯化,非特异性抗体吸收。间接ELISA检测抗体滴度、Western blot和免疫组化实验检测抗体特异性。结果表达并纯化的pET32a/IBP融合蛋白纯度达92%,pGEX-KG/IBP融合蛋白纯度达87%。IBP多克隆抗体滴度达1:51200,能特异地和内源性IBP结合。结论成功表达并纯化了IBP融合蛋白,制备了高滴度、高特异性的抗IBP多克隆抗体。
- 张竹君周玉李鹏易维京杨明珍李淑慧胡川闽
- 关键词:IRF-4结合蛋白蛋白纯化多克隆抗体
- siRNA介导的IBP表达抑制对T细胞凋亡的影响被引量:6
- 2007年
- 目的研究IBP表达抑制后对T细胞凋亡产生的影响。方法构建IBP siRNA稳定表达及阴性对照载体,脂质体法转染Jurkat T细胞,G418筛选稳定转染细胞株,用anti-CD3和CD28 mAb刺激介导的TCR信号方式作用于稳定转染细胞后,以3H-TdR掺入实验检测细胞增殖,Annexin-v/PI双参数法经流式细胞仪检测细胞凋亡。结果TCR信号刺激下,阴性对照组细胞的3H-TdR掺入量在24 h时下降为未刺激对照组的67%,随时间延长其下降更显著,且24 h发生明显凋亡,凋亡率为21.96%;IBP siRNA表达载体转染细胞在不同时相点的增殖均不受影响,24 h凋亡率仅为2.12%,比阴性对照组细胞显著降低。结论IBP缺失能使TCR信号刺激下的细胞激活后凋亡受到抑制,提示IBP可能参与T细胞免疫自稳状态的调节。
- 周玉李鹏李淑慧高利宏陈梅红杨明珍张阳胡川闽
- 关键词:SIRNA稳定转染细胞凋亡
- IBP表达抑制后活化T淋巴细胞基因表达谱变化分析
- 2013年
- 目的利用全基因组寡核苷酸芯片检测干扰素调节因子-4结合蛋白(IRF-4 binding protein,IBP)表达抑制后活化T淋巴细胞基因表达谱的差异。方法采用本室构建的IBP表达抑制的Jurkat T细胞及相应对照细胞为实验对象,Anti-CD3、CD28 mAb处理细胞后提取刺激24、48 h的细胞总RNA,利用北京博奥生物有限公司22K Human GenomeArray芯片检测基因表达的差异,以MAS.doc.V1软件,结合KEGG、NCBI等生物信息学数据库检索分析差异表达基因功能和网络关系。结果 IBP基因表达抑制的Jurkat T细胞在TCR信号刺激24、48 h后,细胞能量代谢、周期生长、转录调控及凋亡等多种类型的基因发生差异表达改变,2个时相组共有56个差异表达趋势一致基因,其中17个基因共同上调,39个基因共同下调。结论在活化的Jurkat T细胞中IBP表达抑制所致多个基因差异表达。
- 向莉李鹏张竹君杨明珍陈安胡川闽
- 关键词:T淋巴细胞基因芯片
- 乳腺癌多药耐药蛋白质分子IBP的应用
- 本发明公开了乳腺癌多药耐药蛋白质分子IBP的应用,IBP的氨基酸序列如SEQ ID NO.11所示,研究发现乳腺癌多药耐药细胞MCF‑7/ADR中IBP表达显著高于MCF‑7亲本细胞,并且乳腺癌细胞中IBP表达降低后对多...
- 杨明珍袁方胡川闽陈安李淑慧
- 文献传递
- 虚拟实验在《临床生物化学检验》教学中的应用探析被引量:12
- 2013年
- 《临床生物化学检验》是医学检验专业重要的主干课程,是由生物化学、分析化学、临床医学等学科交叉融合形成的独立学科,也是集实践性、技术性和应用性于一身的以实验为主的学科[1]。随着检验医学的快速发展,新知识、新技术不断推出,
- 李淑慧韩起陈莎张竹君杨明珍陈安胡川闽
- 关键词:教学医学检验专业主干课程分析化学
- RNAi介导的IBP表达抑制对人乳腺癌MDA-MB-231细胞细胞骨架的影响被引量:1
- 2013年
- 目的研究干扰素调节因子4结合蛋白(IBP)的表达抑制对人乳腺癌MDA-MB-231细胞中微丝、微管的影响。方法设计并合成针对人IBP mRNA的RNA干扰(RNAi)序列,构建RNAi慢病毒表达载体,与包装质粒共转染人胚肾293FT细胞获得病毒颗粒,以病毒感染MDA-MB-231细胞。采用免疫印迹及实时聚合酶链反应(RT-PCR)确定能有效抑制IBP的RNAi序列,筛选出获得稳定感染的细胞株并进行微丝、微管染色。结果成功构建了IBP特异性的RNAi慢病毒表达载体和对照载体,对MDA-MB-231细胞IBP的沉默效率为69.9%;通过微丝、微管染色证实IBP表达下调后,细胞形态出现明显变化,细胞体增大,丝状伪足减少,片状伪足增多,微管排列紊乱。结论 IBP蛋白通过影响微管、微丝的排列而改变MDA-MB-231细胞生物学行为。
- 陈忠蛟李鹏杨明珍陈安胡川闽
- 关键词:转染RNA干扰慢病毒感染细胞骨架
- 淋巴样增强因子-1研究进展被引量:1
- 2008年
- 杨明珍胡川闽
- 关键词:信号传导Β-连环蛋白