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心房颤动相关微小RNA4279靶向调控钙通道蛋白被引量：1: 2015年; 目的采用双荧光素酶报告基因等手段,探讨心房颤动(房颤)相关微小RNA4279(miR-4279)与房颤相关离子通道蛋白的靶向调控关系。方法利用在线数据库Targetscan,miRanda,miRDB预测可能的靶基因后,分别将靶基因的重组荧光素酶报告质粒与miR-4279及阴性对照质粒共转染于人胚胎肾HEK293细胞,实验分为转染组,阴性组和空白组检测各组相对荧光素酶的活性。并将miR-4279模拟体导入大鼠胚胎心肌H9c2细胞,观察其对靶基因的表达调控。结果 CACNA1C基因转染中,与阴性组比较,转染组相对荧光素酶活性降低18%(0.300±0.012 vs 0.366±0.011,P<0.01),转染组CACNA1C基因mRNA表达水平下调31%(0.820±0.058 vs 1.193±0.060,P<0.01),miR-4279模拟体转入H9c2细胞可抑制CACNA1C基因的表达。结论电压门控L型钙通道α亚基CACNA1C基因可能是miR-4279的直接靶基因,miR-4279可能通过抑制CACNA1C表达参与房颤电重构,有可能成为未来房颤干预治疗的靶点。; 李龙苏迎杨水祥; 关键词：心房颤动基因表达调控质粒离子通道转染

miRNA-377调控钙通道蛋白在心房颤动中的作用被引量：2: 2015年; 目的探讨mi RNA-377(mi R-377)与房颤相关离子通道蛋白的靶向调控关系。方法实验分为过表达组、干扰组、阴性组和空白组。将L型钙离子通道α1C亚单位(CACNA1C)的重组荧光素酶报告质粒与mi R-377模拟体及阴性对照共转染于人胚胎肾HEK293细胞,检测各组荧光素酶的相对活性。将mi R-377模拟体、干扰体及阴性对照导入大鼠胚胎心肌H9C2细胞,观察其对靶基因的表达和功能调控。结果与阴性组比较,过表达mi R-377组CACNA1C荧光素酶相对活性降低31%(0.316±0.006 vs 0.455±0.008,P=0.009),过表达组及干扰组CACNA1C、CACNB2基因m RNA表达水平无明显变化。mi R-377模拟体转入H9C2细胞可抑制CACNA1C蛋白表达(P<0.05),降低L型Ca电流的密度,使其峰值密度从–3.23±0.64p A/p F降至–2.26±0.16p A/p F(P<0.05)。结论 CACNA1C基因可能是mi R-377的直接靶基因,mi R-377可能通过抑制CACNA1C的表达从而降低L型钙电流来参与房颤电重构,有可能成为房颤干预治疗的靶点。; 李龙苏迎李泱杨水祥; 关键词：心房颤动微RNAS 离子通道钙通道膜片钳技术

张力——应力定律对肛门外括约肌生长发育影响: 李龙

心房颤动射频消融手术可逆转微小RNA的调控异常被引量：4: 2015年; 目的探讨心房颤动（房颤）患者射频消融手术前后外周血微小RNA（miRNA）的改变及其可能的调控机制和手术干预价值.方法选择2011年1月至2013年12月北京世纪坛医院30例行房颤射频消融术患者（阵发性、持续性和永久性房颤各10例）,健康体检者10例作为正常对照组,房颤组分别在导管射频消融术前和术后3个月取外周血,使用miRNA芯片进行全基因组miRNA表达谱微阵列分析,实时定量聚合酶链反应对调控的主要miRNA表达差异结果进行验证,通过欧洲生物信息学中心（Mirbase）、美国Miranda和Targetscan数据库进行靶基六分析.术前差异倍数为房颤组患者术前与正常对照组比较所得,术后差异倍数为房颤组术后与术前自身外周血比较所得.结果房颤组与正常对照组及房颤组手术前后外刷血比较,共有 25种miRNA术前表达减少,术后表达增多;40种miRNA术前表达增多,术后表达减少,其中miR-199a-3 p/milR-199b-3p、miR-152等7种miRNA术前表达下调＞1.5倍,术后表达上调＞100倍;miR-BART8-3p、miR-4796等6种miRNA术前表达上调＞1.5倍,术后表达下凋＞10倍房颤相关的miR-30b-5p等6种miRNA术前表达下降＞5倍,术后表达增加＞50倍.参与调控L型钙离子通道蛋白CACNA1C的miR-377-5p等4种miRNA手术前后的表达存在差异.结论 miRNA参与调控房颤的发生发展;射频消融手术可改变miRNA的表达调控异常,对术后逆转房颤的电重构和结构重构及窦性心律维持有一定的调控价值miR-30b-5p、miR-377-5p、miR-199a-3p/miR-199b-3p等miRNA有可能成为未来房颤早期诊断与干预的靶点.; 崔淯夏苏迎李龙赵晟南京岳语喃杨水祥; 关键词：心房颤动基因组学导管消融术

心房颤动相关微小RNA1266调控钠通道蛋白被引量：2: 2015年; 目的采用双荧光素酶报告基因分析微小RNA 1266(miR-1266)与心房颤动相关离子通道蛋白的靶向关系。方法利用TargetScan、miRanda和miRDB数据库预测出miR-1266的4种靶基因,分别为电压门控钠通道α亚基(SCN5A)、电压门控钾通道eag相关H家族2型(KCNH2)、电压门控钾通道E家族β1亚基(KCNE1)和内向整流钾通道J家族5型(KCNJ5),并针对靶基因构建3非编码区的重组荧光素酶报告质粒,4种靶基因(SCN5A、KCNH2、KCNE1和KCNJ5)分别分为miR-1266转染组、阴性对照组和空白对照组,miR-1266转染组和阴性对照组分别将SCN5A、KCNH2、KCNE1和KCNJ5的重组荧光素酶报告质粒与miR-1266及阴性对照质粒共转染于人胚肾HEK293细胞,48h后检测各组荧光素酶活性。结果 SCN5A转染中,与阴性对照组比较,miR-1266转染组相对荧光素酶活性显著降低(0.100±0.007 vs 0.209±0.011,P=0.002);而KCNH2、KCNE1和KCNJ5转染中,与空白对照组和阴性对照组比较,miR-1266转染组相对荧光素酶活性无明显变化(P=0.1269,0.0652,0.2326)。结论 SCN5A是miR-1266的直接靶基因,而KCNH2、KCNE1和KCNJ5并非miR-1266的直接靶基因,miR-1266可能通过抑制SCN5A表达参与房颤电重构,有可能成为未来干预治疗靶点。; 苏迎李龙岳语喃杨水祥; 关键词：心房颤动微RNAS 转染离子通道质粒

调控离子通道蛋白的miRNA房颤射频消融手术前后改变及其意义被引量：2: 2015年; 目的探讨房颤射频消融手术对房颤离子通道蛋白和离子流重构的影响和调控作用，寻找可能的miRNAs调控干预靶点，为房颤的预警干预奠定基础。方法选择30例行房颤射频消融术患者（阵发性、持续性和永久性房颤各10例），健康体检者10名作为正常对照组。射频消融术前和术后3个月分别取外周血，使用miRNA芯片进行全基因组miRNA表达谱微阵列分析，Real—timePCR对调控离子通道蛋白的主要miRNAs表达差异结果进行验证，通过mirbase、miranda、targetscan数据库进行靶基因分析。结果主要参与调控离子通道蛋白SCN5A、CACNAlC、KCNA5、KCNH2、KCNEI、KCNQl、KCNJ2、KCNC4、KCND3、KC—NN3、HCNl、HCN3和HCN4的miRNAs共21个。射频消融术前房颤组与正常对照组比较，其表达有显著差异（P〈0．05）。术后3个月房颤组与自身术前比较，这些miRNAs表达亦有明显差异（P〈0．05），其中miR-1266等5个miRNAs术前表达上凋，术后明显下调，仅miR-3664—5p术后较术前进一步下调，其余15种miRNAs均术前表达下调，术后显著上调。调控外向型钾离子通道（如KCNA5）的miRNA手术前后调控趋势一致，调控幅度较大。结论外向性K＋离子流增多在房颤电重构中可能起主要作用。房颤射频消融手术对房颤的电重构起到了离子流再平衡和逆重构的作用。调控多个离子流的miR-1266等miRNAs，有可能成为未来房颤干预的靶点。; 王伊然崔淯夏李龙苏迎岳语喃杨水祥; 关键词：射频消融微小RNA 离子通道基因调控

心衰与心律失常的关联和发展被引量：11: 2016年; 心力衰竭（心衰）总是和危及生命的室性心律失常相关，室性心律失常也最容易引起心衰。本文简要回顾了心衰中的电生理重构、细胞内钙摄取和导致心律失常的机制。细胞解耦联、钙离子稳态和纤维化是导致心律失常的主要因素。目前心衰的研究还远远不够，心力衰竭的发病机制和新的诊断和治疗措施还需要深入研究。; 李龙杨水祥; 关键词：心力衰竭心律失常机制纤维化

心肌纤维化的表观遗传调控进展被引量：1: 2015年; 1引言大多数心脏疾病都与心肌纤维化有关。心肌纤维化即心肌瘢痕形成的过程，它的特点是成纤维细胞的积累和细胞外基质（ECM）蛋白的过度沉积，从而导致器官的结构畸形和功能改变。值得注意的是，心肌成纤维细胞表达α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）。; 李龙杨水祥; 关键词：心肌纤维化表观遗传调控 MIRNAS

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李龙

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