陈兴
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
- 供职机构：中国医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 粒-巨噬系集落刺激因子基因在大肠杆菌中的高效表达
- 1994年
- 粗-巨噬系集落刺激因子(GM-CSF)是一种重要的造血生长因子,主要是刺激粒细胞和巨噬细胞大量增殖。其临床疗效显著而且副作用小。本文先从正常人外周血细胞中提取总RNA,经逆转录——PCR扩增克隆了GM-CSF之cDNA。以DNA序列分析证实与文献一致。再设计合成一对引物定向改造编码成熟GM-CSF基因的5′端:换成大肠杆菌偏性密码,并避免起始点周围形成强二级结构,把终止密码子换成TAA。将改造后的基因克隆到载体pBV220中,转化受体菌HB101,经42℃诱导高效表达出GM-CSF。表达产物约占全菌蛋白的20％,初步纯化和复性后比活性>1×10~7U/mg。
- 汲言山沈倍奋王文香陈兴胡美茹黎燕王建安马贤凯
- 关键词：基因表达聚合酶链反应造血生长因子
- 人FKBP12基因的可溶性表达及活性研究
- 2000年
- 目的 获得具有生物学活性的hFKBP12 ,以筛选新型的促神经再生药物。方法 构建原核表达载体 pExSecI/hFKBP12 ,并在BL2 1(DE3) plysE菌株中进行可溶性高效表达。表达上清经CM Sepharosefastflow一步层析。 结果 获得电泳纯的hFKBP12。活性测定结果表明 ,纯化后的hFKBP12显示具有较强的肽基脯氨基顺反异构酶活性。
- 裴武红贺永怀陈兴李松沈倍奋
- 关键词：原核表达
- 人FKBP52的基因克隆、表达及活性研究被引量：1
- 2001年
- 为获得具有生物学活性的hFKBP5 2 ,来筛选新型的促神经再生药物 .采用半巢式、桥联PCR及亲和层析方法 ,从人胎脑cDNA文库中成功扩增出hFKBP5 2基因 ,在 pET2 8a (+ )中实现了高效、可溶性的融合表达 ,表达量约 30 % .重组的蛋白质经亲和纯化至电泳纯 ,纯化后的hFKBP5 2显示出肽基脯氨基顺反异构酶活性 .表明原核表达的hFKBP5 2具有类似于其天然蛋白质的生物学活性 .
- 裴武红贺永怀陈兴李松沈倍奋
- 关键词：基因克隆原核表达
- 神经生长因子介导的促神经生长化合物筛选系统的建立被引量：3
- 2001年
- 为了合理评价化合物的促神经再生活性 .用溴化四唑蓝 (MTT)、分化计数、图象处理等方法 ,借助FK5 0 6、GPI10 46阳性化合物 ,建立了一个基于PC12细胞存活和分化的化合物筛选系统 .结果表明 ,无论在细胞存活实验还是在分化实验中 ,FK5 0 6、GPI10 46都可以明显增强神经生长因子 (NGF)的效应 ,即有促神经再生的作用 .也就是说 ,这一系统将有助于从组合化学方法合成的化合物文库中 。
- 裴武红舒翠玲陈兴夏国伟李松沈倍奋
- 关键词：神经再生神经生长因子图象分析
