洪亮 作品数:6 被引量:9 H指数:2 供职机构: 温州医科大学附属第三医院 更多>> 发文基金: 温州市科技局资助项目 浙江省自然科学基金 温州市科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
microRNA-21反义寡核苷酸对肝星状细胞胶原合成的影响 被引量:1 2015年 目的:探讨microRNA-21( miR-21)反义寡核苷酸对肝星状细胞胶原合成的影响。方法肝星状细胞分离和培养,利用脂质体2000将miR-21反义寡核苷酸转染活化的肝星状细胞中,转染48 h后,收集肝星状细胞,采用实时RT-PCR法和Western blotting分别检测细胞miR-21表达和Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达;MTT法检测转染后细胞增殖活性。结果与无关反义寡核苷酸组相比,miR-21反义寡核苷酸转染后miR-21表达较无关对照组下调约76%( P <0.01);细胞增殖活性降低(26±3)%( P <0.01);Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白分别降低(61±7)%和(48±6)%(均P <0.01)。结论 miR-21反义寡核苷酸能显著下调miR-21的表达,抑制肝星状细胞增殖及胶原的合成。 付荣泉 丁继光 洪亮 孙庆丰 吴金国白细胞介素-28B基因多态性对慢性丙型肝炎患者抗病毒治疗应答的影响 被引量:2 2017年 目的 探讨IL-28B基因单核苷酸多态性位点rs12979860和rs8099917与中国慢性丙型肝炎患者抗病毒疗效的关系.方法 利用Taqman探针单核苷酸多态性基因分型方法检测入组的105例患者IL-28B基因多态性位点rs12979860(C/T)和rs8099917(T/G)的基因型,对患者进行标准剂量的聚乙二醇干扰素联合利巴韦林(PR)治疗并定期随访治疗应答及不良反应,分析IL-28B基因多态性与患者抗病毒疗效的关系.计数资料采用Pearson卡方检验或Fisher确切概率法.结果 105例慢性丙型肝炎患者中有2例因搬迁失访,剩余103例中81例(78.6%)rs12979860和rs8099917基因型为CC/TT(CC/TT组),19例(18.4%)为CT/TG(CT/TG组),3例(2.9%)为TT/TG(TT/TG组),未检测到其他基因型,两处多态性位点表现为连锁不平衡(r2=0.11).治疗4周后,CC/TT组35例(43.2%),CT/TG组3例(15.8%),TT/TG组0例达到快速病毒学应答(RVR),3组间差异有统计学意义(χ2=6.77,P=0.033).治疗12周时,CC/TT组45例(55.6%)达到早期病毒学应答(EVR),CT/TG组6例(31.6%),TT/TG组0例,3组间差异有统计学意义(χ2=6.57,P=0.025).治疗结束时,CC/TT组68例(83.9%)达到治疗结束时病毒学应答(ETR),CT/TG组10例(52.6%),TT/TG组1例(33.3%),3组间差异有统计学意义(χ2=10.86,P=0.003).随访24周后,CC/TT组患者62例(76.5%)达到持续病毒学应答(SVR),CT/TG组9例(47.4%),TT/TG组1例(33.3%),3组间差异有统计学意义(Fisher值7.939,P=0.014).治疗过程中,CC/TT组101例次出现不良反应,19例次需临床处理,CT/TG组43例次出现不良反应,9例次需临床处理,TT/TG组7例次出现不良反应,1例次需临床处理,3组间差异无统计学意义(χ2=0.139,P〉0.05).结论 IL-28B基因rs12979860和rs8099917基因型影响慢性丙型肝炎患者抗病毒治疗应答,CC/TT基因型更易达到RVR及SVR,为慢性丙型肝炎个体化抗感染治疗提供依据. 周宇 叶晓婷 陈威 洪亮 蒋卫民关键词:抗病毒应答 特异性miRNA-200b抑制剂对肝星状细胞生物学特性的影响 被引量:2 2015年 目的 观察特异性miRNA-200b抑制剂对肝星状细胞增殖、活化、胶原合成的影响.方法 设计并合成miR-200b抑制剂,利用脂质体将miRNA-200b抑制剂转入肝星状细胞中,培养48 h后,收集肝星状细胞和上清液,采用qRT-PCR探针的方法检测miR-200b的表达水平、Westernblotting检测细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达、噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性和放射免疫法检测培养上清液中Ⅲ型前胶原和透明质酸含量.结果 与阴性对照组相比,miRNA-200b抑制剂转染48 h后HSC-T6细胞miR-200b组表达下调82%;α-SMA蛋白表达降低(19±3)%(P<0.05);细胞增殖活性降低(33±5)%(P<0.01);培养上清中Ⅲ型前胶原和透明质酸含量分别降低(35±4)%和(31±2)%(均P <0.01).结论 miRNA-200b抑制剂下调HSC-T6细胞中miR-200b表达,抑制肝星状细胞增殖与活化,减少细胞外基质的合成和分泌. 付荣泉 丁继光 洪亮 胡丹平 吴金国慢性丙型肝炎患者CD4^+CD25^+Treg细胞对树突状细胞的作用 2015年 目的探讨慢性丙型肝炎(HCV)患者CD4+CD25+Treg细胞对外周血树突状细胞的作用。方法对35例HCV患者和35例健康对照各抽取外周血,采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC),采用特异性免疫磁珠分选获得CD4+CD25+Treg细胞,并体外诱导培养获得树突状细胞(DCs);将CD4+CD25+Treg细胞与DC共培养5d后,采用流式细胞仪检测DC表面标志CD83、CD80、HLADR的表达,同时酶联免疫吸附法检测上清液中IL-10和TGF-β含量。结果与健康对照组相比,HCV患者CD83、CD80和HLA-DR的表达均显著下降,差异有统计学意义(P<0.01);HCV组患者CD4+CD25+Treg分泌IL-10和TGF-β的水平均高于健康组(P<0.01)。结论 HCV患者外周血Treg细胞能够抑制DC的成熟,细胞因子参与了免疫应答的调节。 洪亮 付荣泉 丁继光 孙庆丰 吴金国关键词:慢性丙型肝炎 调节性T淋巴细胞 树突状细胞 2008-2012年医院金黄色葡萄球菌的耐药性变迁 被引量:1 2015年 目的:了解医院金黄色葡萄球菌(SAU)的耐药性变迁,指导临床合理用药。方法收集2008-2012年住院患者送检标本所培养分离出的SAU,并对其耐药性进行回顾性分析。结果2008-2012年共分离SAU4370株,各年分别占9.2%、13.1%、12.8%、11.4%和11.1%;其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)1668株,检出率为38.2%;5年SAU对青霉素耐药率较高,为95.0%~97.6%,对万古霉素及替考拉宁的敏感性最好;SAU对四环素、庆大霉素、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶、左氧氟沙星、利福平、氯霉素及呋喃妥因等抗菌药物的耐药率逐年下降,差异有统计学意义(P<0.01);对氯霉素及呋喃妥因的耐药率均较低,分别为0.1%~3.9%及3.1%~8.8%;耐药率在30.0%以下的药物有氯霉素、呋喃妥因、万古霉素和替考拉宁。结论5年SAU在所有的细菌中检出率约占10.0%,MRSA在SAU中的检出率稳定在约40.0%,氯霉素、呋喃妥因、万古霉素和替考拉宁等药物的耐药率<30.0%,可作为临床经验用药首选。 吴杨荷 周克 孙庆丰 丁继光 洪亮 杜庆玮 周瑞微关键词:金黄色葡萄球菌 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 耐药性 慢性乙型肝炎患者肝脏炎症活动度和纤维化程度的影响因素 被引量:4 2015年 目的 探讨CHB患者肝脏炎症活动度(G)和纤维化程度(S)的影响因素.方法 对971例CHB患者进行肝组织病理学检查,同时收集患者的血生物化学、血常规、HBV DNA、HBV血清学标志物等数据.计数资料比较采用卡方检验,3组间计量资料的比较采用单因素方差分析,两组间计量资料的比较采用Student-t检验,相关性分析采用Spearman相关分析和多元回归分析.结果 971例患者分成3组.1年内ALT 3次持续正常列为A组,首次发现ALT升高者列为B组,半年内ALT升高两次以上者列为C组.A组332例,B组341例,C组298例.3组HBV感染者男性人数分别占47.9%、74.2%、73.8%,差异有统计学意义(x2=64.778,P<0.01).A组中HBeAg阳性者161例(48.5%),B组234例(69.0%),C组176例(59.1%),差异有统计学意义(x2=28.325,P<0.01).3组G≥2者分别占36.4%、56.9%、51.3%(x2=29.868,P<0.01),S≥2者分别为25.3%、35.5%、35.9%(x2=10.807,P=0.005).A组G≥2和(或)S≥2的有137例(41.3%),B组有208例(61.0%),C组有164例(55.0%),差异有统计学意义(x2 =22.235,P<0.01).将A组分为ALT<30 U/L组(229例)和ALT≥30 U/L组(103例),两组间男性、HBeAg阳性、G≥2和(或)S≥2患者比例的差异均有统计学意义(均P<0.05).Spearman相关分析和Logistic回归分析显示,年龄≥35岁、ALT≥30 U/L、AST≥25 U/L、HBeAg阳性、血小板计数与显著病理学改变相关(均P<0.05),年龄(OR=2.012,95%CI为1.196~3.383)、HBeAg(OR=2.188,95%CI为1.339~3.584)和AST(OR=2.312,95%CI为1.390~3.846)为显著病理学改变的独立预测因素.结论 对ALT首次发现升高者,其显著肝脏组织病理学改变比例与反复升高的患者相似,建议早期抗病毒治疗.对ALT持续正常的感染者,年龄≥35岁、HBeAg阳性或AST≥25 U/L为显著病理学改变的独立预测因素,对符合上述条件的患者更应引起注意,进行早期的抗病毒治� 杜庆玮 李明慧 徐婷燕 谢尧 丁继光 洪亮 周克 陈威 周青青 孙庆丰关键词:丙氨酸转氨酶 病理学