王涵
- 作品数:15 被引量:27H指数:3
- 供职机构:广州医科大学更多>>
- 发文基金:广州市科技支撑计划项目广东省医学科学技术研究基金广州市教育局科研项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 干细胞治疗通过调控巨噬细胞促进皮肤缺损的愈合
- 研究背景:皮肤是人体最大的器官,除了通过分泌、排泄和调节体温来参与机体的新陈代谢外,更重要的是它覆盖全身,是保护体内各组织和器官的屏障,因此十分容易受到损伤。皮肤缺损往往继发于创伤、手术、烧伤或一些代谢性疾病如糖尿病等,...
- 王涵
- 关键词:皮肤缺损细胞治疗巨噬细胞免疫组化染色
- 文献传递
- 乙酰基转移酶KAT2A调控牙周膜干细胞成骨分化的研究被引量:3
- 2015年
- 目的:通过比较正常与炎症来源牙周膜干细胞(PDLSCs)中乙酰基转移酶KAT2A表达水平的差异,研究乙酰基转移酶KAT2A在PDLSCs中对成骨分化的调控。方法:有限稀释法克隆化培养出正常与炎症来源的PDLSCs;基因与蛋白检测方法对比两种来源PDLSCs中KAT2A的表达水平;基因、蛋白检测与茜素红染色方法对比正常PDLSCs及干扰KAT2A基因后的PDLSCs成骨表达的差异。结果:与健康来源PDLSCs相比,炎症来源PDLSCs中KAT2A的表达显著下降,差异有统计学意义(P<0.05);KAT2A基因被干扰后,PDLSCs成骨能力下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:牙周炎会导致PDLSCs中KAT2A表达的下降,导致细胞成骨分化受到抑制。
- 袁林孙晋杨征毅曹依娜潘广嗣钱钧何恩亮王涵
- 关键词:牙周膜干细胞牙周炎乙酰基转移酶成骨分化
- 组织蛋白酶D在不同类型种植体骨界面改建中的变化及意义
- 2013年
- 目的:比较非埋植型与埋植型种植体在完成义齿修复受载后种植体-骨界面中组织蛋白酶D(Cath-D)表达变化的异同。方法:Beagle犬8只,于下颌骨两侧分别植入非埋植型与埋植型种植体各3枚,第1枚种植体不做冠修复的种植体为对照,其余采用钴-铬合金铸造金属全冠修复。加载后2、4、8周分别处死动物,取材,采用免疫组化染色方法,观察种植义齿修复后不同时间点之间非埋植型与埋植型种植体骨界面Cath-D表达的灰度值动态变化。结果:2个对照组Cath-D表达不随时间变化(P>0.05),组间差异无显著性(P>0.05)。种植义齿修复受载后,2周时,种植体-骨界面Cath-D灰度值开始升高,但与对照组无差异;4周时达高峰,8周时表达略有降低,但4周和8周组均明显高于对照组(P<0.01);12周时恢复到接近对照组水平。所有非埋植型和埋植型种植体之间差异无显著性。结论:非埋植型和埋植型种植体在种植义齿修复受载后,引起种植体-骨界面Cath-D表达的变化,促进其界面的改建。
- 袁林杨征毅宋晶晶郝璐王涵孙晋
- 关键词:非埋植型埋植型种植体-骨界面组织蛋白酶D
- 白细胞介素-6在不同种类种植体牙骨界面改建中的表达
- 2013年
- 目的:对比埋植型与非埋植型种植义齿受载后种植体-牙骨界面中白细胞介素-6表达变化的异同。方法:选用纯种Beagle犬8只,在其下颌骨分别植入埋植型与非埋植型种植体,3个月后行固定金属全冠种植义齿修复,按不同时期处死动物,采用免疫组化法对比不同时期的埋植型与非埋植型种植体-骨界面中白细胞介素-6表达变化的异同。结果:实验组种植体-骨界面的白细胞介素-6水平于2周时较对照组明显增加,且均于4周时达到峰值,12周时恢复至对照组相似水平。埋植型与非埋植型种植体之间无明显差异(P>0.05)。结论:机械应力通过埋植型与非埋植型种植义齿传递至种植体-骨界面,均刺激白细胞介素-6的表达。
- 谭华根袁林潘广嗣杨征毅郝璐王涵孙晋曹依娜
- 关键词:白细胞介素-6种植体-骨界面骨改建
- 人颌骨间充质干细胞的外泌体在巨噬细胞调控中的作用被引量:9
- 2017年
- 目的:探讨颌骨骨髓间充质干细胞分泌的外泌体(OMMSCs-Exo)的特性及其在调控巨噬细胞功能中可能发挥的作用。方法:体外培养OMMSCs,检测其克隆形成及多向分化能力。提取上清液中外泌体,透射电镜观察其形态,蛋白印迹法检测其表面特异标志CD63、CD81。将外泌体与巨噬细胞作用24 h后用共聚焦显微镜观察两者的作用方式,实时定量PCR检测外泌体内免疫相关miR-223和miR-let-7c表达及与共培养后巨噬细胞中miRNA表达。结果:人OMMSCs符合间充质干细胞特性,OMMSCs-Exo分泌的外泌体近似圆形,直径在60~160 nm之间,表达表面标志CD63、CD81:内含有与巨噬细胞调控相关的miRNA如miR-223和miR-let-7c等,能被巨噬细胞吞噬,共培养后巨噬细胞中miR-223含量增加。结论:人OMMSCs-Exo及其携带的miRNA可能参与了巨噬细胞功能的调控。
- 袁林曹依娜杨征毅孙晋潘广嗣钱钧宋晶晶王涵
- 关键词:MIRNA巨噬细胞
- 骨活素基因转染的兔骨髓基质干细胞复合多孔丝素蛋白支架体外构建组织工程骨
- 2014年
- 目的:用腺病毒表达载体将骨活素基因转染到兔骨髓基质干细(BMSCs),复合多孔丝素蛋白支架体外构建组织工程骨。方法:用表达骨活素基因的腺病毒载体转染体外培养的兔BMSC,免疫组化、原位杂交染色和蛋白印迹方法检测细胞骨活素的表达,并通过流式细胞仪和ALP活性检测分析其对细胞增殖、分化的影响。然后将转染后细胞接种到多孔丝素蛋白支架上,扫描电镜观察细胞贴附、生长状况。结果:转染后,骨活素基因在mRNA水平和蛋白水平均有表达;S期细胞比例和ALP活性明显增高。扫描电镜见转染细胞分布均匀,伸展良好。结论骨活素基因可高效转染兔BMSC,且促进细胞增殖及成骨转化。转染后细胞在多孔丝素蛋白支架上生长良好,骨活素基因治疗的组织工程骨构建成功。
- 王涵杨征毅程峰潘广嗣易晓辉孙晋曹依娜袁林
- 关键词:骨髓基质干细胞基因治疗组织工程骨
- OPN、BSP在非埋植型种植体非负荷期种植体周围骨组织改建过程中的表达被引量:2
- 2014年
- 目的:探讨骨桥蛋白(osteopontin,OPN)与骨涎蛋白(bonesialoprotein,BSP)在非负荷期非埋植型种植体周围骨界面改建中的作用。方法:选用健康雄性杂种犬8只,在其下颌植入非埋植型种植体,分不同时期处死动物。采用免疫组化方法,对不同时期非埋植型种植体-骨界面OPN与BSP进行动态观察,研究种植体-骨界面中OPN与BSP在界面改建过程中的表达变化。结果:种植义齿植入后在非负荷期,随着种植体周围骨组织发生改建,种植体-骨界面表达OPN和BSP有明显规律性,代表其染色强度的灰度值OPN从79.53±2.33增加到122.17±0.65;BSP从79.71±0.55增加到122.82±0.85。1周时界面OPN与BSP都有表达,2周时表达达到高峰,1月时逐渐下降,3月时趋于正常(均P<0.05)。结论:非埋植型种植体在非负荷期,种植体-骨界面OPN与BSP表达的变化有明显的规律性,且OPN与BSP能促进其界面的改建。在维持种植体与骨界面之间的骨性结合形成中起重要作用。
- 曾玉袁林程峰杨征毅潘广嗣王涵孙晋曹依娜钱钧
- 关键词:非埋植型种植体-骨界面骨涎蛋白
- 牙周膜干细胞中乙酰基转移酶MORF调控成骨的研究被引量:3
- 2016年
- 目的:比较正常与炎症来源牙周膜干细胞(H-PDLSCs与P-PDLSCs)中乙酰基转移酶MORF表达水平的差异及其对PDLSCs分化的调控。方法:有限稀释法培养H-PDLSCs与P-PDLSCs,LPS、TNF-α、IL-β及三者混合物体外模拟炎症微环境诱导H-PDLSCs(IP-PDLSCs);基因与蛋白检测方法对比2种来源PDLSCs中MORF的表达水平;蛋白检测方法检测IPPDLSCs中MORF的表达水平;基因、蛋白检测与茜素红染色方法对比H-PDLSCs及下调MORF基因后的PDLSCs成骨基因表达的差异。结果:与H-PDLSCs相比,P-PDLSCs中MORF的表达显著下降(P<0.05);IP-PDLSCs中MORF的表达下降;MORF基因被下调后,PDLSCs成骨能力下降(P<0.05)。结论:牙周炎及炎症微环境会导致PDLSCs中MORF表达的下降,从而使其成骨分化受到抑制。
- 袁林孙晋程峰杨征毅曹依娜潘广嗣钱钧何恩亮王涵
- 关键词:牙周炎乙酰基转移酶成骨分化
- 转化生长因子-β1在非载荷期非埋植型种植体周围骨界面改建中的表达变化
- 2014年
- 目的:探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)在非载荷期非埋植型种植体周围骨界面改建中的作用。方法:选用健康雄性杂种犬8只,在其下颌植入非埋植型种植体,分不同程期处死动物。采用免疫组化方法,对不同时期非埋植型种植体-骨界面转化生长因子-β1进行动态观察,研究种植体-骨界面中转化生长因子-β1的动态变化规律,初探转化生长因子-β1在界面改建过程中的分子机理。结果:免疫组化观察发现,种植体植入后在非受载期,随着种植体周围骨组织发生改建,种植体-骨界面表达转化生长因子-β1有明显的规律性,代表其染色强度的灰度值从84.87±1.69增加到109.01±3.97。1周时界面转化生长因子-β1表达明显增强,2周时达到高峰,1个月时表达逐渐下降,3个月时的表达趋于正常。结论:非埋植型种植体在非受载期,种植体-骨界面转化生长因子-β1表达的变化有明显的规律性,且转化生长因子-β1在其改建中起重要作用。
- 袁林宋晶晶杨征毅王涵孙晋曹依娜
- 关键词:非埋植型种植体-骨界面转化生长因子-Β1TGF-Β1
- 不同来源骨髓间充质干细胞成骨能力的比较被引量:6
- 2017年
- 目的比较人不同来源骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,h BMSCs)的骨向分化能力,为骨组织工程筛选种子细胞提供一定的理论基础。方法体外组织块培养法和有限稀释法培养颌骨来源骨髓间充质干细胞(jaw bone-marrow-derived mesenchymal stem cells,JMMSCs);骨髓穿刺法和密度梯度离心法培养长骨来源骨髓间充质干细胞(bone-marrow-derived mesenchymal stem cells,BMMSCs)。流式细胞仪鉴定细胞表面抗原标记,成骨分化诱导后茜素红染色检测细胞矿化能力,成骨分化诱导后q RT-PCR及Western Blot检测细胞成骨相关分子:Runx2、1型胶原(Collagen Type 1,COL-1)、OCN。结果 JMMSCs和BMMSCs均阳性表达CD90、CD105,阴性表达CD34、CD14、CD45。成骨分化诱导21 d后,茜素红染色显示JMMSCs矿化能力强于BMMSCs。成骨诱导7 d、14 d、21 d后,JMMSCs成骨相关分子在基因和蛋白水平上均强于BMMSCs。结论与BMMSCs相比,JMMSCs成骨分化能力较强,颌骨骨髓可能更适于用作骨组织工程的成体干细胞来源。
- 袁林钱钧杨征毅王涵郭武城程洁莉宋晶晶何恩亮张忆
- 关键词:骨髓间充质干细胞颌骨长骨成骨分化种子细胞