王杰
- 作品数：2 被引量：9H指数：2
- 供职机构：南京农业大学食品科技学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划浙江省杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 毛竹PeIRX10基因在木聚糖合成中的功能被引量：2
- 2016年
- 【目的】克隆毛竹木聚糖合成关键酶基因Pe IRX10,并对其进行表达分析和功能初探,为毛竹中木聚糖合成分子机制的探究提供理论依据。【方法】以毛竹为研究对象,根据毛竹基因组数据库中序列信息设计引物,通过RT-PCR克隆得到1个在模式植物拟南芥木聚糖合成中起关键作用的同源基因,命名为Pe IRX10;运用生物信息学的方法对其核苷酸序列及其编码的氨基酸序列进行分析;通过qRT-PCR对毛竹的根、茎、叶、花和笋5个部位进行组织表达特异性分析。利用Gateway克隆技术构建Pe IRX10的植物表达载体,通过蘸花法转化拟南芥irx10l(-/-)irx10(+/-)双突植株,经BASTA筛选及PCR植株表型鉴定获得具有irx10l(-/-)irx10(-/-)双突背景的转基因植株;通过表型观察、茎部切片甲苯胺蓝染色观察、细胞壁单糖成分分析以及木聚糖免疫定位观察探讨该植株中Pe IRX10基因的功能。【结果】从毛竹中克隆得到Pe IRX10(PH01004923G0080,http:∥www.bamboogdb.org/)基因的ORF序列,长度为1 251 bp,编码416个氨基酸,蛋白质的理论分子质量为46 821 Da,等电点为6.26;其氨基酸序列与其他植物的IRX10基因具有很高的相似性(>80%),属于GT47家族;qRT-PCR结果表明,Pe IRX10基因在毛竹笋和茎中高度表达。过量表达Pe IRX10基因的转基因拟南芥植株可以互补于拟南芥IRX10双突植株irx10l(-/-)irx10(-/-),表现出正常的株高、茎粗以及叶片大小和数量;转基因拟南芥植株的茎部切片甲苯胺蓝染色观察发现,其维管束间纤维和木质部导管细胞的细胞壁厚度与野生型拟南芥相近;细胞壁单糖分析发现,互补植株木糖含量以及其他单糖(例如阿拉伯糖、半乳糖和葡萄糖等)的含量与野生型相近;木聚糖免疫定位分析表明,Pe IRX10基因的过表达可以使irx10l(-/-)irx10(-/-)双突植株中木质部和束间纤维中LM10信号几乎完全恢复。【结论】在irx10l(-/-)irx10(-/-)双突拟南芥植株�
- 王杰李军仝婷婷邵香君宋丽丽吴蔼民
- 关键词：毛竹木聚糖
- N_2预处理结合MAP复合保鲜处理对水蜜桃贮藏品质、活性氧代谢及能量状态的影响被引量：7
- 2015年
- 【目的】水蜜桃采收后易后熟和衰老,贮藏期和货架期短。本研究为寻求安全有效的水蜜桃贮藏保鲜方式,并探究其保鲜机理。【方法】以＂湖景蜜露＂水蜜桃为试材,研究氮气预处理结合自发气调（MAP）复合保鲜处理对果实低温贮藏及货架期间营养品质、活性氧代谢及能量水平的影响。果实经100%N2处理6 h后,用厚度0.02 mm的聚乙烯薄膜袋密封包装,对照组不做任何处理。所有果实均置于（1±1）℃相对湿度85%-90%保鲜库中,贮藏30天后,从薄膜袋取出,置于（25±1）℃下模拟货架期。测定低温贮藏及货架期间水蜜桃果实腐烂指数、硬度、可溶性固形物（TSS）、维生素C（Vc）和过氧化氢（H2O2）含量、超氧阴离子（O2·^-）产生速率、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和脂氧合酶（LOX）活性、膜透性、丙二醛（MDA）含量、腺苷三磷酸（ATP）、腺苷二磷酸（ADP）和腺苷磷酸（AMP）含量及能荷（EC）值。【结果】结果表明：随着冷藏及常温货架存放时间的延长,对照组水蜜桃果实组织中的ATP,ADP含量和能荷低温贮藏10天后即开始出现明显降低,SOD和CAT在整个贮藏过程中均呈现明显的下降趋势,H2O2和O2·^-的含量明显增加,而MDA含量与膜透性则呈大幅度的上升,导致膜脂过氧化程度的增加和膜完整性的破坏。N2预处理结合MAP复合保鲜处理可有效降低水蜜桃果实低温贮藏过程中的腐烂指数,当果实转到25℃放置4天,处理组水蜜桃的果实腐烂指数仅为对照组果实的55.56%。同时,N2预处理结合MAP复合保鲜处理能有效地维持果实TSS及Vc含量,较好保持了营养品质。进一步研究发现,N2预处理结合MAP复合保鲜处理能维持果实中较高的ATP,ADP含量及能荷值,提高SOD及CAT活性,进而抑制H2O2积累及O2·^-的产生,降低MDA含量及膜透性的升高。相关性分析表明,在贮藏过程中,能荷值与O2·^-产生
- 王金花王杰陈文烜宋丽丽
- 关键词：水蜜桃自发气调包装营养品质活性氧代谢
