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硫化氢对柯萨奇病毒感染的病毒性心肌炎小鼠的保护作用被引量：9: 2013年; 目的研究硫化氢对柯萨奇病毒B3（Coxsachievirus B3， CVB3）感染的病毒性心肌炎小鼠的保护作用以及胱硫醚γ-裂解酶（ CSE）/硫化氢（ H2 S）通路在其体内的表达情况。方法将110只5周龄的雄性BALB/c小鼠随机分为4组：正常对照组、病毒性心肌炎组、硫氢化钠（外源性H2 S供体）组和DL-炔丙基甘氨酸（ PAG，CSE不可逆抑制剂）组。以腹腔注射CVB3建立急性病毒性心肌炎模型，接种当天记为第0天，24 h后每组每日经腹腔分别注射相应干预药物。分别于接种后第4天和第10天从各组随机抽取10只处死，留取血清和心肌标本。观察心肌炎症病理改变，酶联免疫吸附法检测H2 S及IL-6、TNF-α等炎症因子含量，逆转录-聚合酶链反应法检测心肌组织CVB3、CSE的mRNA表达水平，免疫组化及蛋白质印迹法定性、定量检测CSE蛋白水平表达。结果与正常对照组比较，病毒性心肌炎组血清和组织H2 S浓度、CSE mRNA、CSE蛋白水平表达均明显下调，给予NaHS干预可明显上调H2 S水平，减轻心肌损伤、减轻炎症细胞浸润以及间质水肿，对病毒CVB3 mRNA的表达有抑制作用，而给予PAG干预，可明显抑制H2 S和CSE表达，加重心肌损伤、炎症细胞浸润及间质水肿，促进CVB3 mRNA的复制。结论在病毒性心肌炎中，CSE/H2 S通路表达明显受到抑制，给予PAG干预可明显抑制该通路的表达，加重心肌损伤，促进病毒复制，外源性供给硫化氢可对感染心肌起到保护作用，且可抑制病毒复制。; 潘璐璐张园海岳亚延周爱华张营营王丹钱燕禇茂平; 关键词：病毒性心肌炎柯萨奇病毒胱硫醚-Γ-裂解酶硫化氢硫氢化钠

miR-130a和miR-125b在川崎病外周血细胞中的表达及意义被引量：7: 2015年; 目的通过检测miR-130a和miR-125b在伴或不伴冠脉扩张(CAD)川崎病(KD)患儿与正常健康儿童外周血单核细胞(PBMC)中的表达差异,探讨两者可否作为KD和CAD诊断及预后评估的全新血清生物标志物。方法利用基因芯片技术筛选出KD患儿与正常健康儿童之前具有差异表达的miRNAs,通过生物信息学分析,确定候选基因。进一步选取KD患儿30例(伴或不伴CAD各15例)、正常健康儿童15例,采用茎环RT-PCR的方法 ,验证候选基因miR-130a和miR-125b在PBMC中的表达情况。结果 (1)通过基因芯片技术,分析KD患儿与正常健康儿童PBMC中存在明显差异表达的miRNA共63条,经过生物信息学分析,确定候选基因;(2)通过茎环RT-PCR验证发现miR-130a和miR-125b在患儿IVIG治疗前表达明显下调,而IVIG治疗后表达明显上调(P<0.05);(3)伴CAD的KD患儿miR-130a及miR-125b表达较不伴CAD明显升高,且呈正相关性(R^2=0.734,mir-130a;R^2=0.709,miR-125b);(4)ROC曲线分析表明miR-130a(特异度87.5%和敏感度77.5%)和miR-125b(特异度83.3%和敏感度76.6%)对KD及CAD的判断有较高的特异度和敏感度。结论 PBMC中的miR-130a和miR-125b参与了KD的发生与发展,可作为KD及CAD诊断及预后评估的一项全新血清生物标志物,并为KD冠脉扩张的防治提供新的思路。; 褚茂平周爱华胡晨王慧颖潘璐璐荣星吴蓉洲赵先仙; 关键词：川崎病 MICRORNA 冠脉扩张

同型半胱氨酸对C17.2小鼠神经干细胞的影响及作用机制被引量：1: 2017年; 目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)对C17.2小鼠神经干细胞(NSCs)的影响及可能的分子机制。方法培养C17.2小鼠NSCs,分为对照组、0.25m M Hcy组、0.25m M Hcy+5mM N-乙酰半胱氨酸(NAC)组;加入相应药物培养24h后,采用CCK-8法检测各组NSCs生长活力,流式细胞术和Caspase-3法检测Hcy对NSCs凋亡的影响,彗星实验检测Hcy对NSCs DNA的损伤程度,H2DCF-DA染色检测NSCs的氧自由基(ROS)水平。结果 Hcy能诱导细胞ROS产生和DNA损伤,从而导致NSCs凋亡增加。相反,NAC可降低Hcy诱发的ROS产生,明显改善DNA损伤,提高细胞存活率。结论 Hcy能诱导NSCs ROS产生和DNA损伤,并导致NSCs凋亡;而减少Hcy引发的ROS产生可以明显改善DNA损伤并提高细胞存活率。; 王丹阮妙华周爱华钱燕陈亦明; 关键词：同型半胱氨酸 DNA损伤氧化应激神经干细胞

川崎病血清特异相关miR-23a对人脐静脉内皮细胞生长及迁移的影响被引量：5: 2015年; 目的:探讨川崎病(KD)血清特异相关miR-23a对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)生长及迁移的影响。方法:采用Real-time PCR验证前期筛选获得的川崎病急性期血清特异性表达的miR-23a,生物信息学分析结合炎症细胞因子及受体芯片检测来筛选靶基因;共分4组,miR-23a mimic组、mimic NC组、miR-23a inhibitor组、inhibitor NC组,通过miR-23a模拟物(mimic)及抑制物(inhibitor)的转染调节HUVECs内miR-23a的表达,用CCK-8法检测细胞增殖的变化,用划痕试验和Transwell小室法检测其对细胞迁移的影响。结果:Real-time PCR发现miR-23a在KD急性期患儿血清中表达水平明显高于KD恢复期、正常对照组及发热对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05);与mimic NC组对比,上调mi R-23a表达可促进HUVECs增殖、迁移,差异有统计学意义(P<0.05);与inhibitor NC组对比,下调miR-23a表达可抑制HUVECs的增殖、迁移,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-23a在急性期KD患儿血清中表达上调,干预HUVECs内miR-23a表达可影响其增殖和迁移,提示miR-23a异常表达可能参与KD的发生发展。; 褚茂平胡晨周爱华王慧颖潘璐璐仇慧仙吴蓉洲赵仙先; 关键词：川崎病人脐静脉内皮细胞增殖

CSE/H2S通路在病毒性心肌炎中的表达及三七总皂苷对其的影响: 目的:研究胱硫醚gamma-裂解酶(CSE)/硫化氢(H2S)通路在急性柯萨奇B3(CVB3)病毒性心肌炎小鼠中的作用以及三七总皂苷(PNS)对其的影响,证明PNS对病毒性心肌炎的保护作用,探索其对心肌细胞保护作用的分子...; 潘璐璐周爱华刘长根荣星仇慧仙吴蓉洲张园海褚茂平; 文献传递

病毒性心肌炎小鼠心肌中MMP-2和NF-κB的表达被引量：12: 2016年; 目的:初步探讨基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)p65在柯萨奇病毒B3(CVB3)诱导的小鼠病毒性心肌炎心肌中的表达。方法:6周龄近交系雄性BALB/c小鼠随机分为对照组和病毒性心肌炎组,分别给予0.1 m L PBS和10-5.69TCID50/m L CVB3注射,第4天和第10天各随机取8只小鼠处死并取血和心脏标本。Reed-Muench法测定接种病毒滴度;苏木素伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色后光镜观察心肌组织病理学改变;应用免疫组化法(immunohistochemistry,IHC)检测MMP-2和NF-κB p65在心肌组织表达的分布和含量;用Western blot法检测MMP-2、NF-κB p65和IκBα在心肌组织的表达,用ELISA检测血清TNF-α含量的变化。结果:与对照组相比,免疫组化和Western blot实验结果提示病毒性心肌炎小鼠心肌中MMP-2和NF-κB p65的表达显著升高(P<0.05);感染组IκBα的表达呈下降趋势(P<0.05);ELISA结果提示血清TNF-α含量在感染组显著升高,差异有统计学显著性(P<0.05)。结论:病毒性心肌炎小鼠心肌组织中TNF-α、NF-κB p65和MMP-2表达显著上调,可能通过相关机制参与疾病的发生。; 阮妙华王凯王丹周爱华褚茂平陈其钱燕; 关键词：心肌炎基质金属蛋白酶2 核因子ΚB

肝素对高氧致支气管肺发育不良新生鼠血清及肺组织中性粒细胞诱捕网的影响: 2019年; 目的探讨肝素对支气管肺发育不良(BPD)新生鼠血清及肺组织中性粒细胞诱捕网(NETs)的影响。方法将新生SD大鼠随机分为空气组、高氧组、肝素组、对照组,每组12只。空气组置于空气中,其他3组置于氧浓度为90%的高氧箱7d建立BPD模型。肝素组于造模开始后,每天腹腔注射低剂量肝素(250U/kg)至造模结束;对照组每天腹腔注射等量0.9%氯化钠溶液。分别在出生后第7、14天,每组各取6只麻醉并采集血液标本及肺组织标本,采用PicoGreen荧光染色法检测血清游离DNA(cf-DNA/NETs)水平,共聚焦显微成像观察肺组织NETs,HE染色观察肺组织形态学并测定肺泡辐射状计数(RAC)和平均内衬间隔(MLI)。结果出生后第7、14天,高氧组、对照组新生鼠血清游离DNA水平较空气组明显升高(均P<0.05),肝素组较高氧组明显降低(P<0.05)。在荧光显微镜下观察,高氧组、对照组肺组织组蛋白、髓过氧化物酶荧光信号范围增加,NETs表达增加;肝素组荧光信号范围减少。与空气组比较,高氧组、对照组新生鼠RAC明显减少,MLI明显增加,差异均有统计学意义(均P<0.05);与高氧组比较,肝素组RAC明显增加,MLI明显减少,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论高氧致BPD新生鼠血清及肺组织中存在大量NETs,肝素可抑制NETs产生,并改善高氧引起的肺发育受阻。; 盛安群陈翠娥孙媛媛张希希钱燕朱融和周爱华王楸冯建华; 关键词：肝素支气管肺发育不良高氧

一例瓜氨酸血症Ⅰ型患儿的临床特点及ASS1基因突变分析被引量：4: 2019年; 目的对一例临床怀疑瓜氨酸血症Ⅰ型患儿进行分子遗传学研究,明确致病突变,并对其相关的临床特点、转归进行总结。方法收集患儿的临床资料,提取患儿外周血DNA,应用高通量捕获测序确定患儿ASS1基因突变情况,并用Sanger测序验证测序结果以及ASS1基因的家系分析。结果患儿生后第6天出现体温不升、呻吟、喂养困难、惊厥,血氨明显升高(1240μmol/L),血串联质谱(MS/MS)分析提示血瓜氨酸显著升高(1979.03μmol/L),尿气相色谱/质谱(GC/MS)提示乳清酸升高,予限制蛋白饮食、精氨酸治疗后血氨恢复正常,神经系统损害持续加重,头颅MRI提示脑萎缩、脑软化明显,随访至12月时死亡。基因序列分析发现患儿ASS1基因存在c.910C>T和c.1087C>T复合杂合突变,其中c.910C>T突变来源于父亲、c.1087C>T突变来源于母亲。c.910C>T突变导致第304号氨基酸由精氨酸变异为色氨酸,c.1087C>T突变导致第363号氨基酸由精氨酸变异为色氨酸,为错义突变。结论通过高通量捕获测序和Sanger测序确定了一例瓜氨酸血症Ⅰ型患儿的致病基因,随访发现该复合杂合突变引起的瓜氨酸血症患儿临床表现重,预后极差。; 孙媛媛陈翠娥朱艳可朱融和周爱华王丹

温州地区气象因素与川崎病发病的相关性被引量：1: 2016年; 目的:探讨气象因素与川崎病(KD)发病的相关性。方法:收集2005年1月至2015年12月温州地区住院的KD患儿资料及该地区气象资料,对每月KD发病人数与同时期该地区气象因素,包括降雨量、风速、日照时长、气温及气压进行相关性分析。结果:2005年1月至2015年12月温州地区约1 956例KD住院患儿纳入本研究,KD发病率以春夏季为高,冬季发病率较低。降雨量与KD发病率成正相关(r=0.217,P<0.05),气压、风速与KD发病率成负相关(r=-0.209、-0.652,P<0.05),气温、日照时数与KD发病率相关性不显著(P>0.05)。结论:KD的发病与气象因素具有一定相关性。; 周爱华岳亚延金增游潘璐璐张营营王丹钱燕张园海吴蓉洲褚茂平; 关键词：川崎病风速降雨量

TNF-α和明胶酶在病毒性心肌炎中的动态变化被引量：4: 2016年; 目的:探讨TNF-α和明胶酶MMP-2、MMP-9在病毒性心肌炎(VMC)中的动态变化及其意义。方法:6周龄近交系雄性Balb/c小鼠随机分为对照组(n=35)和感染组(n=60),分别给予PBS和含10^(-5.69) TCID_(50)/mL的CVB3液0.1 mL注射,分别在第4、第10、第21、第30天各随机取8只小鼠处死并取血和心脏标本。ReedMuench法测定接种病毒滴度;HE染色后光镜观察心肌组织病理学改变;免疫组织化学法、Western blot和实时荧光定量PCR法分别检测心肌组织MMP-2、MMP-9蛋白及其mRNA的表达;ELISA法检测血清TNF-α的浓度变化。结果:与对照组比较,感染组血清TNF-α浓度明显升高(P<0.05),心肌组织MMP-2和MMP-9蛋白及其mRNA表达均显著增高(P<0.05)。MMP-2、MMP-9表达与心肌病理积分、TNF-α浓度均呈正相关。结论:在小鼠CVB3心肌炎中TNF-α及其下游产物MMP-2和MMP-9水平上调,可能参与VMC的病理生理过程。; 阮妙华王丹王凯周爱华褚茂平陈其钱燕; 关键词：肿瘤坏死因子基质金属蛋白酶-2 基质金属蛋白酶-9 病毒性心肌炎

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周爱华

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