赵志晶
- 作品数:23 被引量:102H指数:6
- 供职机构:中国食品药品检定研究院更多>>
- 发文基金:国家科技部专项基金国家科技重大专项“重大新药创制”科技重大专项更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 猴痘病毒感染被引量:8
- 2003年
- 赵志晶刘学恩庄辉
- 关键词:流行病学病原学临床症状
- 克罗诺杆菌IbpA蛋白的表达、纯化及其免疫原性
- 2016年
- 目的表达并纯化克罗诺杆菌Ibp A蛋白,检测其免疫原性。方法提取克罗诺杆菌菌株CMCC45402的基因组,经PCR获得ibp A基因片段,连接至表达载体p ET30a(+),构建重组质粒p ET30a(+)-ibp A。将重组质粒转化E.coli BL21(DE3)菌株,用不同终浓度的IPTG(0.1、0.2、0.5、0.8、1.0 mmol/L)分别于30和37℃诱导表达不同时间(2.5、4、5 h),进行SDS-PAGE及Western blot分析。表达产物经Ni凝胶亲和层析纯化后,经腹腔免疫BALB/c小鼠,每2周加强免疫1次,共2次,末次免疫1周后,经小鼠眼球采血,分离血清,ELISA法检测血清效价。同时检测热激对Ibp A蛋白表达水平的影响。结果重组质粒p ET30a(+)-ibp A经双酶切鉴定证明构建正确。最佳IPTG诱导终浓度为0.2 mmol/L,最佳诱导温度为30℃,最佳诱导时间为5 h。诱导表达产物相对分子质量约24 000,主要以可溶性形式存在,可与抗His-Tag单克隆抗体特异性结合;纯化蛋白的纯度可达96%;小鼠免疫血清效价均可达1:25 000以上。用小鼠血清可检测到热激后克罗诺杆菌Ibp A的表达。结论本实验成功构建了ibp A基因的高效原核表达系统,获得了高纯度重组蛋白,制备了高效价抗血清,为后续ibp A基因和克罗诺杆菌热抗性关系的研究奠定了基础。
- 赵志晶梁昊宇董思国田万红王斌曾明
- 关键词:A蛋白原核表达纯化免疫原性
- 阪崎肠杆菌ibpA基因的克隆、表达和纯化
- 对阪崎肠杆菌CMCC 45401和45402菌株的ibpA基因进行了克隆和测序,构建了原核表达载体pET30a(+)-ibpA(45401)和pET30a(+)-ibpA(45402),表达并纯化获得His-IbpA融合...
- 赵志晶曾明
- 关键词:阪崎肠杆菌克隆原核表达纯化
- IbpA的结构和功能研究进展
- 2015年
- Ibp A是小分子热激蛋白家族成员。Ibp A和Ibp B协同作用,与其他伴侣蛋白一起在热激反应中保护底物蛋白,消除凝集,产生重折叠,回复活性。概述了Ibp A在热激反应中的作用、ibp A基因表达的调控和Ibp A分子结构对其功能的影响。
- 赵志晶曾明
- 关键词:小分子热激蛋白热激反应
- 绿色荧光蛋白在细菌学研究中的应用
- 1999年
- 本文介绍了绿色荧光蛋白的基本特征及其在细菌学研究领域中的主要应用。
- 赵志晶
- 关键词:绿色荧光蛋白细菌学
- 大肠杆菌O157∶H7的基因分析及检测方法被引量:1
- 1999年
- 本文介绍了大肠杆菌O157∶H7特异性质粒、噬菌体与染色体上与其致病性有关的基因分析及检测各种方法,包括培养法、各种血清学检测与分子生物学检测方法。
- 赵志晶
- 关键词:大肠杆菌O157:H7基因分析
- 甲型副伤寒沙门氏菌Nmpc和Pagc核酸疫苗的研究
- 目的:构建甲型副伤寒沙门氏菌Nmnpc和Pagc核酸疫苗并对其免疫原性进行初步研究。方法:从甲型副伤寒沙门氏菌基因组中分别扩增出Nmpc和Pagc基因片段,以BamHI和XhoI酶切位点克隆入真核表达载体pcDNA3.1...
- 梁昊宇赵志晶王斌李娜计国欣曾明
- 关键词:甲型副伤寒沙门氏菌核酸疫苗
- 文献传递
- 绿色荧光蛋白在大肠杆菌O157:H7检测中的应用被引量:2
- 2004年
- 目的 将绿色荧光特征引入大肠杆菌E coliO15 7∶H7,用于传统检测方法的改进及目的菌的应用研究。方法 将pGFP质粒转化E coliO15 7∶H7,构建一种工程菌 (E coliO15 7∶H7 pGFP) ,并进行了选择性培养基的筛选。以E coliO15 7∶H7 pGFP对鸡肉与牛奶等食品样品进行接种与回收试验 ,同时设定不同温度模拟食品储存的不同情况。结果 pGFP质粒可以在E coliO15 7∶H7菌株中稳定存在。将E coliO15 7∶H7 pGFP接种食品样品 ,以LBan培养基平板回收发现 :较高温度存放肉类与牛奶 ,其污染的E coliO15 7∶H7菌量可在 12h增加 35 0 0 0~ 2 0 0 0 0 0倍 ,而 4℃存放可以使污染菌量缓慢下降。结论 构建了一种具有紫外灯下发出绿色荧光与氨苄青霉素抗性等特性的重组菌株———O15 7∶H7 pGFP ,并设计了适合E coliO15 7∶H7 pGFP生长的选择性培养基———LBan。该重组菌株可应用于检测方法的改进及该菌特性的研究 。
- 赵志晶刘秀梅
- 关键词:绿色荧光蛋白大肠杆菌O157:H7荧光抗体技术生物学标记
- 伤寒和甲型副伤寒沙门菌复合PCR检测被引量:5
- 2008年
- 目的建立用于快速和特异检测伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌的复合PCR方法。方法根据rfbS、rfbEf、liC和vi基因序列设计4对PCR引物,对54株沙门菌和其他菌属的菌株进行复合PCR检测。结果采用所建立的复合PCR方法可分别检测到伤寒和甲型副伤寒沙门菌的3条和2条特异性条带带型,可与其他菌株带型准确分开。结论本研究建立的复合PCR方法可用于检测伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌。
- 赵志晶王斌梁昊宇计国欣曾明辜清吾
- 关键词:伤寒沙门菌甲型副伤寒沙门菌复合PCR
- 大肠杆菌O157∶H7的致病基因与致病因子被引量:6
- 2001年
- 本文介绍了与肠出血性大肠埃希菌O157∶H7致病性有关的主要致病基因及其相应的致病因子 ,如使宿主粘膜细胞产生损伤的eae基因与intimin、由特异性噬菌体上slt基因编码的SLTs、O157∶H7特异性质粒上溶血素基因编码的溶血素 (hly)等。
- 赵志晶
- 关键词:O157:H7致病基因溶血素基因