目的体外震波治疗能促进缺血组织的血管新生和加速侧支循环建立,但其具体作用机制尚不明确。探讨0.09 m J/mm2的体外震波对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)变化的影响。方法实验分为实验组和对照组,对照组试管置于震波仪器中但不进行震波处理,实验组以0、0.03、0.09、0.18、0.24 m J/mm2震波能量冲击,每孔加CCK8溶液,用酶标仪测定在波长450 nm处的A值。对体外培养的HUVECs细胞株施予0.09 m J/mm2能量的震波处理,CCK8比色法检测细胞增殖情况,Real-time PCR法和流式细胞术分别检测低能量超声波处理后细胞因子VEGF、IL-8 mRNA表达和蛋白质的变化。结果 1CCK8比色法检测结果显示实验组中只有0.09 m J/mm2能量A450值与对照组比,差异有统计学意义(0.70±0.04 vs0.54±0.09,P<0.05),而其他能量与对照组比,差异无统计学意义(P>0.05);2RT-PCR结果显示0.09 m J/mm2能量时HUVECs VEGF、IL-8 mRNA的表达(7.93±0.90、7.34±1.67)均较对照组(1.07±0.40、1.00±0.09)明显升高(P<0.01)。3流式细胞术检测结果显示与对照组相比,0.09 m J/mm2能量时HUVECs VEGF、IL-8蛋白表达(39.89±4.79、31.33±5.61)均较对照组(20.98±3.30、22.60±3.76)明显升高(P<0.05)。结论体外低能量震波可促进HUVECs增殖和增加VEGF、IL-8的表达,VEGF、IL-8的表达增加可在体外震波促进血管新生机制中起重要作用。
目的:观察体外震波治疗对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖、细胞周期及细胞间黏附因子-1(ICAM-1)表达的影响。方法:将体外培养的人脐静脉内皮细胞分组,实验部分分别给予0.03、0.09、0.18、0.24 m J/mm2能量震波500击处理(分别设定为0.03、0.09、0.18、0.24 m J/mm^2能量组),对照组不给予震波处理。细胞计数试剂盒(CCK)比色法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期,实时定量聚合酶链反应(PCR)及蛋白质印迹方法(Westen blot)分别检测低能量震波处理后ICAM-1信使核糖核酸(m RNA)和蛋白的表达水平。结果:CCK比色法检测结果显示:只有0.09 m J/mm2能量组与对照组比能促进HUVECs增殖,且差异有统计学意义(P<0.05),而其他能量组与对照组比,差异均无统计学意义(P>0.05)。不同能量组与对照组比较,0.09 m J/mm^2能量组G0/G1期细胞比例明显减少(P<0.05),S期和G2/M期细胞比例明显增加(P<0.05),0.03 m J/mm2能量组仅增加G2/M期细胞比例(P<0.05),而其他能量组与对照组比差异均无统计学意义(P>0.05)。实时定量PCR检测显示:0.09m J/mm^2能量组ICAM-1 m RNA表达均较对照组明显增高(9.27±0.95 vs 1.02±0.27,P<0.001),0.03 m J/mm2能量组ICAM-1 m RNA表达均较对照组亦增高(7.08±0.60 vs 1.02±0.27,P<0.01)。Westen blot检测显示:0.09 m J/mm^2能量组ICAM-1蛋白表达较对照组明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:体外震波治疗,特别是0.09 m J/mm^2能量的体外震波能加速HUVECs细胞周期由G0期/G1期向S期和G2/M期的转换,促进细胞增殖,并且提高ICAM-1的表达,这在体外震波促进血管新生机制中起重要作用。
