刘良
- 作品数：5 被引量：7H指数：1
- 供职机构：上海交通大学农业与生物学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 植物病原黄单胞菌TALE效应蛋白控制植物抗(感)病性的基础研究与利用策略
- 植物病原黄单胞菌引起多种植物细菌病害,造成非常显著的经济损失。培育和种植抗病品种是防治黄单胞菌所致病害的有效措施。30年前,较早发现了辣椒斑点病菌(Xcv)无毒基因avrBs3与辣椒中Bs3对应,符合基因对基因关系。20...
- 陈功友邹丽芳Muhammad Zakria马文秀蔡璐璐刘良
- 关键词：TALEN
- 文献传递
- 烟草和水稻中水稻条斑病菌过敏反应激发子Ssb_x互作因子的鉴定被引量：1
- 2015年
- 【目的】水稻条斑病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzicola)中单链DNA结合蛋白(single-stranded DNA-binding protein,SsbX)通过病原菌III型分泌系统(type-III secretion system,T3SS)分泌,在非寄主植物烟草上产生过敏反应(hypersensitive response,HR),研究旨在明确SsbX激发烟草产生HR的机理。【方法】将水稻条斑病菌RS105菌株注射水稻和烟草叶片,应用CreatorTM SMARTTM cDNA文库构建试剂盒构建水稻和烟草cDNA文库,借助pGADT-Sfi AB载体上特殊酶切位点SfiⅠ,酶切检测水稻和烟草cDNA文库质量;以SsbX为诱饵,通过酵母双杂交技术(Y2H)从水稻和烟草cDNA文库中筛选在SD/-Ade/-Leu/-Trp/-His培养基上能够生长的阳性克隆;并利用β-gal试验验证阳性克隆;序列测定后,使用MEGA 4序列分析软件,并利用邻位相连法(neighbor-joining,NJ)对筛选获得的互作因子进行同源序列和系统进化树分析;利用荧光双分子互补试验(BiFC)于488 nm处黄色激发光和520—550 nm透射光、20×物镜下,在激光共聚焦显微镜(Leica TCS SP5-II)观察SsbX与烟草和水稻中互作因子的互作位点。【结果】水稻和烟草cDNA文库构建和质量检测结果显示,随机挑选20个克隆中水稻来源的cDNA插入在pGADT-Sfi AB载体上,平均片段大小1.0kb;随机挑选20个克隆中烟草来源的cDNA均插入在pGADT-Sfi AB载体上,平均片段大小1.2 kb,说明水稻和烟草的cDNA文库构建质量较好;Y2H和β-gal试验结果显示,SsbX可与烟草和水稻的ADF2(actin-depolymerization factor 2)蛋白互作,使酵母AH109能够在SD/-Ade/-Leu/-Trp/-His平板上生长,并且β-gal染色显示为蓝色。水稻Os ADF2编码139氨基酸,蛋白质分子量为15.9 k D,而烟草Nb ADF2编码137氨基酸,蛋白质分子量为15.kD,两者同源性达69.02%。同源性以及系统进化树分析显示,植物中ADF2广泛存在,同源性高达60%以上。双子叶植物烟草和拟南芥的ADF2同源性最高,相似性达69.05%;单子叶禾本科植物水稻和狗尾草的
- 孙玉静马文秀蔡璐璐刘良邹丽芳陈功友
- 关键词：水稻条斑病菌肌动蛋白解聚因子过敏反应
- 西甜瓜果斑病菌avrRxo1同源基因激发玉米Rxo1抗性产生的研究被引量：1
- 2017年
- 生物信息学分析发现西(甜)瓜果斑病菌(Acidovorax citrulli,Ac)基因组中存在水稻条斑病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzicola,Xoc)avrRxo1的同源基因avrRxo1_(Ac)。为了揭示avrRxo1_(Ac)是否能够激发玉米R基因Rxo1介导的过敏反应(Hypersensitive response,HR),本研究克隆了avrRxo1_(Ac)基因;氨基酸同源性分析结果显示:AvrRxo1_(Ac)与AvrRxo1的同源性为53.16%。将avrRxo1_(Ac)置于Xoc的avrRxo1突变体中,发现其不能恢复该突变体在含有Rxo1玉米上激发HR反应的能力;借助农杆菌瞬时表达体系发现AvrRxo1A,也不能在Rxo1玉米上激发HR反应。这些结果表明avrRxo1_(Ac)-Rxo1互作不表现为基因-对-基因关系,暗示Rxo1抗病基因转入西甜瓜中,将不能起到抗西(甜)瓜细菌性果斑病的作用。
- 葛宗灿刘良马文秀邹丽芳陈功友
- 关键词：水稻条斑病菌
- 植物病原黄单胞菌TALE效应蛋白控制植物抗(感)病性的基础研究与利用策略
- 植物病原黄单胞菌引起多种植物细菌病害,造成非常显著的经济损失.培育和种植抗病品种是防治黄单胞菌所致病害的有效措施.30年前,较早发现了辣椒斑点病菌(Xcv)无毒基因avrBs3与辣椒中Bs3对应,符合基因对基因关系.20...
- 陈功友邹丽芳Muhammad Zakria马文秀蔡璐璐刘良
- 关键词：TALEN
- 7种检疫性植物病原黄单胞菌Ⅲ型分泌系统和效应蛋白编码基因的差异性分析被引量：5
- 2016年
- γ-变形菌纲（γ-Proteobactefia）的黄单胞菌属（Xanthomonas）的大多数种类可引起植物病害，多数是我国检疫对象。与其他革兰氏阴性植物病原细菌一样，植物病原黄单胞菌可通过高度保守的Ⅲ型分泌系统（type-Ⅲsecretionsystem，T3SS）分泌效应蛋白（T3SS-secreted effectors，T3SEs）进入植物细胞，在非寄主植物和抗病寄主植物上产生过敏反应（hypersensi-tive response，HR）以及在感病寄主植物上具有致病性。尚不清楚哪些种类的黄单胞菌具有T3SS和缺少哪些T3SE是否可作为检疫的依据。搜集7种检疫性植物病原黄单胞菌，通过PCR和Southern杂交试验结果发现：香蕉细菌性青枯病菌（X．campestrispv．musacearum）的ICMP287和ATCC49084菌株、甘蔗流胶病菌（X．axonopodispv．vasculorum）ATCCl3901菌株、洋葱细菌性叶枯病菌（X．axonopodispv．allii）的LMG576和LMG578菌株中不含有tale基因，并且ATCCl3901菌株既不含有T3SS基因也不含有hpal和xopQ基因；菜豆细菌性疫病菌（X．campestrispv．phaseoli）ATCC49119菌株不含有hpal基因。相应地，推测含有2～12个tale基因的黄单胞菌有：大豆斑疹病菌（X．axonopodispv．glycines）ICMP5732和ATCC43911菌株、豌豆细菌性疫病菌（x．axonopodispv．vignicola）ATCCll648菌株、棉花细菌性角斑病菌（X．campestrispv．malvacearum）ATCCl2131和（X．campestrispv．phaseoli）ATCC49119菌株。大豆细菌性斑疹病菌ATCC43911菌株尽管含有hpal、xopQ和hrcC基因，但在非寄主烟草上不能激发HR反应；而甘蔗流胶病菌ATCCl3901菌株不含有助al、xopQ和hrcC基因，却激发烟草产生HR反应。这些结果对于分析比较不同植物病原黄单胞菌的致病性因子和设计特定的植物检疫靶点提供了科学线索．
- 刘良马文秀邹丽芳陈晓斌陈功友
- 关键词：黄单胞菌过敏反应
