肖玲 作品数:15 被引量:29 H指数:3 供职机构: 中国医学科学院北京协和医学院输血研究所 更多>> 相关领域: 医药卫生 化学工程 更多>>
人凝血因子X单克隆抗体的研制及鉴定 被引量:3 2002年 目的 用于提取高纯度凝血因子X(FX)和制备缺乏FX血浆 ,以及建立FX抗原的ELISA检测方法等 .方法 用较高纯度的FX免疫Balb/C小鼠 ,经过 2次基础免疫 ,1次加强免疫 ,3d后取其脾细胞与骨髓瘤SP2 /0 Ag14细胞在PEG作用下进行细胞融合 ,经间接ELISA法筛选杂交瘤细胞株 ,通过免疫印迹试验、交叉反应试验、相加试验和二价金属离子依赖性试验等 ,对单克隆抗体进行鉴定 .结果 经 3~ 4次克隆化后获得了 10株能稳定分泌FX单克隆抗体 (FXMcAb)的杂交瘤细胞株 ,Ig亚类均为IgG1型 ,小鼠腹水效价均在 10 6以上 ,FXMcAb只与FX抗原起特异性反应 ,FXMcAb与FX抗原的结合不同程度地依赖于二价金属离子Zn2 + .结论 所筛选出的FXMcAb为高纯度FX的提取和缺乏FX血浆的制备以及FX抗原的ELISA检测方法的建立 ,提供了试剂准备 . 林方昭 肖小璞 黄淑 周昌华 肖玲 周宇 赵青蓉 李湘关键词:凝血因子X 抗原 单克隆抗体 杂交瘤细胞 正常凝血质控血浆质量考察 被引量:8 2007年 目的考察自制冻干正常凝血质控血浆的性能。方法测定连续3批自制血浆各凝血因子活性等指标,以考察制备工艺的稳定性与可靠性;以活化的部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)和pH为测定指标,评价正常凝血质控血浆的批内均一性和稳定性;同时以新鲜混合血浆为对照,将自制产品与进口试剂进行比较。结果连续3批自制血浆的APTT、PT、TT均在正常值范围内,pH值稳定,各凝血因子的活性均>0.80IU/ml。变异系数APTT为0.6%(n=20),PT为0.8%(n=20),TT为2.2%(n=20)。血浆复溶后,4℃冰箱和室温下放置,8 h内血浆的APTT、PT、TT及pH均保持了较好的稳定性,其中变化最大的APTT极差为2.26s。冻干血浆4℃及-20℃存放条件下,30个月内血浆的APTT、PT、TT及pH亦保持了较好的稳定性,其中变化最大的APTT极差为3.29s。以新鲜混合血浆为对照,自制的正常凝血质控血浆与新鲜混合血浆其APTT均值相差0.52s,TT均值相差1.0s,PT无明显差别;德国DADE BEHRING正常凝血质控血浆与新鲜混合血浆其APTT均值相差6.82s,TT均值相差3.2 s,PT无明显差别。结论自制的正常凝血质控血浆具有正常凝血特性,产品的稳定性和批内均一性良好,可满足作为凝血试验质控血浆的要求。 黄淑 孙小成 杨显福 肖玲 林方昭 赵青蓉 肖小璞关键词:凝血试验 质控血浆 S/D处理纤维蛋白原制品灭活病毒后去除S/D的方法研究 被引量:1 1997年 以低温乙醇法从人血浆中分离的组分I(Cohn’s组分I)为原料,采用有机溶剂/表面活性剂(S/D)法进行病毒灭活处理,并用乙醇沉淀法去除S/D。实验结果证明:用S/D处理的Cohn’s组分I经8%的乙醇2次沉淀后,其Tween80残留量<20μg/ml,TNBP残留量<10μg/ml。用醋酸纤维薄膜电泳法测定,纤维蛋白原纯度为92.75%,可凝固蛋白含量为95.52%,相对回收率为87.46%(n=3);S/D处理前后纤维蛋白原的凝固活力分别为8.06±0.08和8.94±0.70。SDS-PAGE、IE电泳和分子筛凝胶层析(FPLC)显示无变性的纤维蛋白原存在,提示:乙醇低温条件下沉淀去除S/D,不仅能保持纤维蛋白原的生物活性和天然结构基本不变,且可使制品进一步纯化。 焦丽华 刘文芳 景明 肖玲 赵菁蓉关键词:病毒灭活 成分输血在抢救产科弥漫性血管内凝血中的应用 被引量:5 2008年 目的探讨成分输血在抢救产科DIC中有效合理应用。方法对本院38例产科DIC临床资料进行回顾性分析,将38名DIC患者分为成分输血组(20例)和输全血组(18例),并比较两组输血后血液学指标的变化。结果成分输血组及输全血组输血后血液学指标比较,红细胞压积(Hct)、凝血酶原时间(PT)无统计学差异(P(0.05),而Plt?APTT及FGB比较有统计学差异(P值分别(0.01、(0.05、(0.05)。结论产科DIC的抢救应以血液学指标检测为依据制定成分输血方案,合理使用各种成分血液制品有助于提高抢救成功率。 图强 肖玲 王雅洁关键词:成分输血 产科 弥漫性血管内凝血 人血浆凝血因子Ⅶ单克隆抗体的制备与应用初探 被引量:1 2011年 目的制备能稳定分泌人凝血因子Ⅶ(FⅦ)单克隆抗体的杂交瘤细胞株,纯化人FⅦ单克隆抗体并初步应用。方法 1)以纯化的人血浆FⅦ为抗原免疫BALB/c小鼠,用杂交瘤技术筛选出能分泌人FⅦ单克隆抗体的细胞株,用体内诱生法制备小鼠腹水,经硫酸铵沉淀、DEAE-affi-gel-blue凝胶层析纯化单克隆抗体;鉴定抗体的纯度和亚类、抗体与FⅡ、FⅨ、FⅩ的交叉反应性、二价金属离子对抗原抗体结合的影响等特性。2)将人FⅦ单克隆抗体连接到GoldMag-@磁微粒表面,检测连接效率;将磁微粒连接的抗体与FVⅡ反应,并用含有二价金属离子的缓冲液进行洗脱,探索用磁微粒-单克隆抗体免疫亲和吸附法纯化FⅦ的方法和可行性。结果 1)成功制备出22株分泌人FⅦ单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为HFⅦ001~022;所选取的HFⅦ002、0040、050、130、140、21等6株细胞制备的纯化的抗体,其重链的亚类均为IgG1,除与FⅦ反应外,均不与FⅡ、FⅨ、FⅩ发生交叉反应,其中HFⅦ005可以抑制血浆FⅦ的凝血活性,HFⅦ0020、040、05与FⅦ的结合明显受Zn2+的抑制。2)上述6株细胞抗体与磁微粒的连接率为24.0%~94.7%,HFⅦ0020、050、13等3株细胞抗体连接磁微粒后可以结合FⅦ,对其中1株磁微粒连接抗体(HFⅦ005)进行试验显示:其结合的FⅦ在有Zn2+存在时能解离下来。结论制备出能分泌人血浆FⅦ单克隆抗体的杂交瘤细胞株并纯化出单克隆抗体;应用磁微粒-单克隆抗体免疫亲和吸附法,可以分离纯化人FⅦ。 徐世洲 肖玲 肖小璞 赵青蓉 侯玉香 林方昭关键词:单克隆抗体 杂交瘤细胞株 纯化 纤维蛋白原检测试剂的质量考察与评价 被引量:1 2004年 目的 考察自制纤维蛋白原检测试剂质量。方法 用自制和进口纤维蛋白原检测试剂测定标准曲线及两种试剂对样品纤维蛋白原含量、不同稀释度正常参比血浆凝固时间的测定结果加以比较并考察自制试剂稳定性。结果 自制与进口试剂测定标准曲线相关系数r >0O - 0 .990O(P <0 .0 1 ) ,测定样品纤维蛋白原含量差异无显著性意义 (P >0 .0 1 )。同批或连续 3批试剂测定不同稀释度正常参比血浆凝固时间的变异系数 (CV) <5 %。稳定性试验显示 :试剂 4℃存放 2 .5年 ,37℃存放 1 0d相关指标无明显变化 ;试剂溶解后 4℃存放 1 4d ,2 2℃存放 8d和 37℃存放 8h ,凝血酶凝固活性无明显变化。 林方昭 肖小璞 孙小成 黄淑 杨显福 吕福洪 赵青蓉 肖玲关键词:纤维蛋白原 试剂 紫外分光光度法测定纤维蛋白原制品中可凝固蛋白含量 被引量:2 1997年 紫外分光光度法测定纤维蛋白原制品中可凝固蛋白含量610081中国医学科学院中国协和医科大学输血研究所焦丽华肖玲卢传兰郑世荣景明纤维蛋白原可凝固蛋白含量测定,《中国生物制品规程》称纯度测定且规定用凯氏定氮法测定,但该法操作较繁琐,不利于快速检测中间产品... 焦丽华 肖玲 卢传兰 郑世荣 景明关键词:光度法 纤维蛋白原 血液制品 红细胞在感染免疫中的作用研究进展 2024年 红细胞作为血液中数量最多的细胞,逐渐被发现不仅有运送氧气和二氧化碳的功能,还以多种途径参与机体免疫调节。近期有多项研究发现红细胞可通过TLR9在正常生理和感染状态下参与免疫调节,确定红细胞可通过表面的糖蛋白介导参与机体免疫应答,证实红细胞通过表面补体受体和结合细胞因子参与感染性疾病的进展和免疫调节。我们将总结红细胞通过以上几种分子在感染免疫应答中作用的研究进展,以增加对红细胞在感染免疫中作用的全面认识和理解。 肖玲 田力关键词:红细胞 感染免疫 从Cohn氏法组分Ⅲ沉淀纯化人凝血因子Ⅶ 被引量:2 2006年 目的探索从Cohn氏法组分Ⅲ(组分Ⅲ)沉淀中纯化人凝血因子Ⅶ(FⅦ)的方法并对纯化产物进行鉴定。方法将组分Ⅲ沉淀溶解,经柠檬酸钡吸附、洗脱、硫酸铵沉淀、2次DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析和Sephadex G-100凝胶过滤纯化人FⅦ。结果从400g组分Ⅲ沉淀中最终得到10.1mg纯化的FⅦ,活性为1775.8U/mg,FⅦ被浓缩了近6000倍,总活性回收率为17.6%,SDS-PAGE电泳鉴定只有1条主条带。结论组分Ⅲ沉淀中有很高FⅧ活性;建立了从组分Ⅲ沉淀中纯化人FⅦ的方法。 徐世洲 赵青蓉 林方昭 肖玲 肖小璞关键词:纯化 用国产和进口血浆分离器采集的血浆质量对比研究 血浆单采机用进口血浆分离器。即一次性塑料离心杯及管路系统(以下简称耗材)价格较高,增加了血液制品的生产成本,加重了企业的负担。而国产血浆分离器价格较低,采用国产耗材,可降低血液制品的生产成本,提高血液制品生产厂家的经济效... 焦丽华 贾振琴 肖玲关键词:血浆分离器 文献传递