杨成龙 作品数:39 被引量:104 H指数:5 供职机构: 海南大学 更多>> 发文基金: 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 贵州省科学技术基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 轻工技术与工程 金属学及工艺 更多>>
拟南芥中与植物生长和耐寒相关的miRNA表达载体的构建 被引量:3 2010年 本研究通过PCR方法从拟南芥基因组序列中分离了3个理论推断与耐寒相关的miRNA片段(miRNA402,miRNA319和miRNA393)和1个与植物生长相关的片段miRNA172。利用重叠延伸PCR技术将miRNA172小分子,以及3个与耐寒相关的miRNA402,miRNA319和miRNA393小分子串连在一起分别导入植物表达载体pVKH-35S-GUS-pA,取代表达载体中的GUS基因,构建了pVKH-35S-mir172-pA和pVKH-35S-mir31+402+393-pA融合表达载体。经PCR和双酶切及测序鉴定,pVKH-35S-mir172-pA和pVKH-35S-mir319+402+393-pA构建成功,为后续利用基因工程手段,miRNA转化木薯,提高木薯生长和木薯耐寒相关研究奠定基础。 蔡杰 杨成龙 段瑞军 郭建春关键词:MIRNA 双酶切 海马齿甜菜碱醛脱氢酶基因在大肠杆菌中表达 被引量:2 2014年 本研究利用从海马齿中克隆到的甜菜碱醛脱氢酶基因构建到高效表达载体p GEX-4T-1上,构建重组载体p GEX-4T-Sp BADH,并对GST-Sp BADH融合表达的IPTG诱导浓度、诱导不同温度、不同菌液浓度和诱导时间等条件进行优化。研究结果表明:随诱导时间增长GST-Sp BADH融合蛋白表达量提高,在37℃时,OD为0.6左右,诱导5 h GST-Sp BADH融合蛋白的表达量达到最大,在0.2 mmol/L IPTG浓度下,可以有效诱导GST-Sp BADH融合蛋白的表达。本研究结果以期解析Sp BADH基因的功能以及在海马齿抗盐过程中的作用机理。 杨成龙 刘姣 周扬 李瑞梅 段瑞军 符少萍 胡新文 郭建春关键词:海马齿 甜菜碱醛脱氢酶 原核表达 薏苡种质资源收集、保存与创新利用研究进展 被引量:4 2019年 薏苡是传统药食兼用经济作物,具有极高的营养价值和药用价值。薏苡原产地为东南亚的热带或亚热带地区,而中国西南部是薏苡属植物的起源、演化和迁移的初生中心之一。薏苡在中国南北各地均有种植,由于地理环境、气候及栽培条件的差异,使中国蕴藏着丰富多样的薏苡资源,但对薏苡种质资源的研究水平还比较低。中国经多年调查和收集薏苡种质资源至今,目前共收集到五百多份资源,由于薏苡属于小杂粮,对其研究不够重视,在薏苡种质资源的收集、整理、保存和育种等方面做得很少。由于各种繁多的项目开发,野生及水生野薏苡资源的原生地破坏也相当严重,所以,薏苡资源的保护已十分必要与紧迫。本综述通过对薏苡种质资源收集、保存与创新利用进行了系统的概括和归纳,简要评述了薏苡种质资源研究中存在的问题并展望其应用前景,以期为促进薏苡种质资源的收集和利用提供参考。 李志芳 付瑜华 黎青 杨成龙关键词:薏苡 种质资源 一种薏苡旱坡地保墒、抗旱、抑杂草的栽培方法 本发明公开了一种薏苡旱坡地保墒、抗旱、抑杂草的栽培方法,该方法采用保湿性较强的黄色黏土包裹种子可以减少种子萌发时候种仁水分蒸发,当下雨的时候可以充分吸收土壤中的水分,增强种子抗旱能力。同时,本发明中种子采用侧膜覆盖可以有... 敖茂宏 刘益彪 张华 王选国 罗凯 彭杨 刘竹梓 杨成龙 付喻华 蒙秋伊 周详 班秀文 周明强 申刚文献传递 贵州省山地木薯高产创建栽培技术 被引量:3 2018年 为了促进贵州省木薯(Manihot esculenta Cran)产业发展,对筛选出在贵州表现较好的GR3、GR911、SC5等品种进行贵州省山地木薯高产创建栽培技术研究,对木薯品种、种植密度、尿素施用量、钙镁磷肥施用量、硫酸钾施用量5因素4水平进行正交试验。结果表明,影响木薯产量的主要因素是密度、品种和尿素用量,最优水平为GR3、种植密度12 000株/hm^2,施尿素900 kg/hm^2、钙镁磷肥900 kg/hm^2、硫酸钾900 kg/hm^2;影响木薯淀粉含量的主要因素是品种,最优水平为GR911、种植密度18 000株/hm^2,施尿素0 kg/hm^2、钙镁磷肥450 kg/hm^2、硫酸钾600 kg/hm^2;综合考虑产量和淀粉含量,最佳施肥组合为尿素600kg/hm^2、钙镁磷肥450~900 kg/hm^2、硫酸钾600 kg/hm^2。 周明强 班秀文 杨成龙 李志芳 黎青 欧珍贵关键词:淀粉含量 栽培技术 薏苡组织培养快繁方法 本发明公开了一种薏苡组织培养快繁方法,该方法包括如下步骤:选取薏苡外植体进行消毒处理,将消毒处理过的薏苡外植体放入薏苡愈伤分化培养基中进行培养分化;培养出薏苡愈伤组织后,再通过薏苡愈伤继代培养基进行加强薏苡愈伤继代培养;... 王健 罗凯 杨成龙 周明强 蒙秋伊 韩树全文献传递 薏苡地方品种的提纯复壮及新品种选育的方法 本发明公开了一种薏苡地方品种的提纯复壮及新品种选育的方法,包括以下步骤:(1)原始种的选择;(2)第一年:选种圃;(3)第二年:家系圃;(4)第三年:鉴选圃;(5)第四年:测产圃;(6)第五年:种子扩繁;经逐年鉴选并测产... 杨成龙 付瑜华 王健 罗凯 周明强 蒙秋伊 刘凡值 杨小雨 敖茂宏 李志芳 黎青 班秀文 周祥文献传递 一种薏苡宽窄行侧膜垄沟双播高产栽培方法 本发明公开了一种薏苡宽窄行侧膜垄沟双播高产栽培方法。涉及旱作农业技术领域。包括以下步骤:划行;起垄;土地消毒;种子处理;播种并施用底肥;覆膜;田间管理和采收。本发明覆盖抑蒸、集膜面集雨、垄沟种植技术为一体,将地面蒸发降到... 周明强 杨成龙 班秀文 李志芳 杨小雨 王健 罗凯 付瑜华文献传递 海马齿甜菜碱醛脱氢酶基因克隆、高效表达及酶学特性分析 被引量:1 2016年 在许多渗透调节剂中,甜菜碱是最理想的有机小分子渗透调节物质。甜菜碱在植物体内大量积累不会带来危害,同时能提高植物对环境胁迫的抗性。将海马齿中克隆到的甜菜碱醛脱氢酶基因构建到表达载体p ET-28a(+)上,获得重组载体p ET-Sp BADH并将其成功地转化到BL21(DE3)中得到重组工程菌,经IPTG诱导能高效表达55 k D目的蛋白,表达量可以达到301μg m L–1。酶学特征分析表明,该蛋白最适p H值为7.2,在偏碱条件下能维持较高的催化活性;Sp BADH蛋白对高温敏感,且温度对催化活性影响较大,超过55℃时酶活性只有20%,最适酶催化活性温度为37℃;而有机小分子醇类对酶的催化活性有保护作用,可以通过自身特征维持酶催化活性的微环境。 喻时周 杨成龙 郭建春 段瑞军关键词:海马齿 甜菜碱醛脱氢酶 原核表达 酶活测定 盐生植物海马齿SpCBL10基因的克隆及结构预测 被引量:3 2014年 本研究以盐生植物海马齿总RNA为模板,采用RT-PCR和RACE技术,获得海马齿SpCBL10基因。生物信息学分析表明:海马齿SpCBL10基因全长1 575bp,其中CDS序列长度为759 bp,编码252个氨基酸,含有4个典型的结合钙离子的结构域,即EF手臂;SpCBL10蛋白的理论分子量为28.92 kD,等电点为4.74,是一种亲水性的稳定蛋白;该基因编码的蛋白含有一个跨膜区;其蛋白质二级结构中,α-螺旋占52.38%,β-折叠占7.54%,无规则卷曲占32.54%;同源性比对发现它与拟南芥CBL家族中的AtCBL10的相似性最高,达到66.15%,推测其在功能上与AtCBL10类似。本研究结果可为进一步研究SpCBL10基因的功能以及研究海马齿耐盐SOS途径提供理论参考。 周扬 胡艳平 杨成龙 段瑞军 符少萍 胡新文 郭建春关键词:海马齿 基因克隆