段雪岩
- 作品数：10 被引量：23H指数：4
- 供职机构：延边大学农学院动物医学系更多>>
- 发文基金：吉林省教育厅“十二五”科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 气肿疽梭菌PCR检测方法的建立被引量：5
- 2015年
- 为建立气肿疽梭菌(Clostridium chauvoei)的快速检测方法,根据Gen Bank中气肿疽梭菌细胞毒素Cct A基因序列(登录号:JQ692583.1)设计了1对引物,以气肿疽梭菌标准株C54-1全基因组DNA为模板,建立了牛气肿疽梭菌的PCR检测方法,并进行了特异性、敏感性试验。结果表明,建立的气肿疽梭菌PCR检测方法扩增出的片段大小为501 bp,与Gen Bank上气肿疽梭菌的同源性达99.4%,且该方法与D型产气荚膜梭菌、E型产气荚膜梭菌、腐败梭菌和巴氏杆菌等病原体无交叉反应,最低检测浓度为12.30 fg/μL。结果表明,建立的PCR检测方法具有特异、敏感、高效等优点,与其他诊断方法相比更适用于气肿疽梭菌的诊断。
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- 关键词：气肿疽梭菌PCR诊断
- 气肿疽的病因分析及防治措施被引量：5
- 2015年
- 气肿疽是由气肿疽梭菌引起的一种急性、热性、败血性传染病,因其具有发病快、死亡率高的特点,给畜牧业带来了巨大的的经济损失。笔者就气肿疽的发病原因进行了深入分析,并提出了加强该病防治工作的对策措施,以期有效减少和控制该病的发生,降低气肿疽病的损失程度,提高农村养殖业的经济效益。
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- 关键词：气肿疽黑腿病病因分析
- 气肿疽梭菌胶体金诊断试纸条的研制被引量：3
- 2016年
- 为建立快速、准确、简便的检测气肿疽的胶体金免疫层析试纸条,以免疫层析法为指导,根据抗原-抗体的特性,建立了不需要再加入任何检测试剂且快速简便的检测方法。结果表明,胶体金与该单抗的最佳结合量为30μg/m L,最佳pH值为8.4,最佳NC膜为Millipore HFB1350220型。将纯化的气肿疽梭菌多抗及羊抗鼠IgG分别以1∶4和1∶8的稀释倍数喷于硝酸纤维素膜的T线和C线。对胶体金诊断试纸条进行验证,敏感度高,可检测到的最低抗原量为1×10~5CFU/m L,特异性强、无假阳性与交叉反应现象、有较好的稳定性。本研究旨在建立快速、准确、简便的检测气肿疽的胶体金免疫层析试纸条。
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- 关键词：气肿疽梭菌胶体金
- 延边地区牛气肿疽流行病学调查及CctA基因真核表达载体的构建与表达
- 气肿疽(Clostridium chauvoei infection)，病原为气肿疽梭菌，是一种急性、热性、败血性传染病。常见的典型症状为肌肉丰满部位发生炎性、气性肿胀，触压有捻发音，有一定的地区流行性、季节性，多发生在...
- 段雪岩
- 关键词：气肿疽梭菌流行病学调查真核表达
- 气肿疽梭菌细胞毒素CctA基因的克隆及生物信息学分析被引量：6
- 2015年
- 根据GenBank中气肿疽梭菌细胞毒素CctA基因的参考序列,采用PCR方法扩增细胞毒素CctA基因。在将该基因进行克隆和测序后利用生物信息学方法,对细胞毒素CctA蛋白的理化性质、结构功能域、蛋白质二级结构和三级结构及抗原表位等重要参数进行了预测和分析。结果表明:与参考序列(JQ692583)相比,存在3处突变,核苷酸序列的同源性和氨基酸序列的同源性均为99.4%;CctA蛋白的理论等电点为8.00,不存在跨膜区和信号肽序列,二级结构以β-折叠和无规则卷曲为主,主要有4个抗原表位区域。本研究为CctA蛋白功能的深入研究提供了参考,并为气肿疽梭菌单克隆抗体的制备及合成肽疫苗的研发奠定了基础。
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- 关键词：气肿疽梭菌克隆
- 延边地区牛气肿疽的流行病学调查被引量：2
- 2016年
- 本研究旨在了解吉林省延边地区气肿疽的流行情况,分别采用血涂片染色镜检法和PCR方法对延边地区4个县市的165头份牛的血液样本进行了检测,并对不同地区、不同饲养方式、不同品种、不同年龄、不同地理条件等采集的样本进行了比较。结果显示,PCR方法检测牛气肿疽的平均阳性率为15.2%(25/165),显著高于血涂片染色镜检法检测的阳性率8.5%(14/165)。统计学分析表明,牛气肿疽感染率在不同地区、不同品种之间差异性不显著(P>0.05);而不同年龄、不同地理条件气肿疽感染率差异性显著(P<0.05);在个体农户饲养方式中的阳性率显著高于规模化养殖方式(P<0.01),说明牛感染气肿疽受年龄、地理条件、饲养方式等因素的影响较大。本试验表明吉林省延边地区是牛气肿疽的流行地区,为当地的牛气肿疽的防控提供了理论依据。
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- 关键词：气肿疽流行病学调查PCR
- 气肿疽梭菌PCR检测方法的建立及初步应用
- 2016年
- 为建立气肿疽梭菌(Clostridium chauvoei)的快速检测方法,根据Gen Bank中已发表的气肿疽梭菌ATCC10092细胞毒素Cct A基因序列(登陆号:JQ692583.1)设计了一对特异性引物,并以气肿疽梭菌标准株C54-1全基因组DNA为模板,对气肿疽梭菌细胞毒素Cct A基因进行PCR扩增,经过敏感性和特异性试验对该试验方法进行验证,并初步应用于临床检测。结果表明:建立的PCR检测方法具有快速、特异、敏感、高效等优点,与其他诊断方法相比更适用于气肿疽梭菌的诊断。
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- 关键词：气肿疽梭菌PCR检测
- 气肿疽梭菌延边样的分离鉴定被引量：1
- 2015年
- 牛、羊等反刍动物的气肿疽病是由气肿疽梭菌感染引起的严重危害畜牧业发展的一种疾病,本研究从延边州延吉市采集疑似气肿疽梭菌感染的牛肝脏、脾脏、肌肉等组织进行气肿疽梭菌的分离鉴定。结果表明:经病原学检查、生化鉴定、动物试验及分子生物学鉴定,本试验成功对气肿疽梭菌进行了分离,该菌株细胞毒素、cct A基因与Gen Bank上已发表的气肿疽梭菌ATCC 10092菌株的同源性达到99.0%,此结果为该地区气肿疽病的免疫和微生态防治提供了重要的参考依据。
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- 关键词：气肿疽梭菌
- 吉林延边地区牛气肿疽病的诊断报告被引量：10
- 2015年
- 本研究旨在对吉林省延吉市三道湾镇两位农户饲养的病死黄牛进行快速诊断。本试验采集肝脏、脾脏、心脏、肌肉等组织,通过流行病学调查、临床剖检、显微镜观察、细菌培养观察、生化试验、分子生物学试验及动物试验进行气肿疽病诊断。病死黄牛的肌肉部位触压有捻发音,切面有大量血液和气泡流出,镜检可见两端钝圆、有芽孢的大杆菌,在肝片肉汤培养基中形成上清清朗、底部有松散的白色沉淀,生化试验均呈现气肿疽厌气菌所特有的产酸产气反应,PCR扩增出大小为501bp的特异性条带。结果表明延边地区两病死黄牛感染了气肿疽病,证明了该地区气肿疽梭菌的存在。本试验首次分离鉴定出气肿疽梭菌延边株,为该地区气肿疽病的诊断和防制提供了重要的参考依据,同时为进一步研究该病的药物防制和免疫防制奠定了重要基础。
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- 关键词：气肿疽剖检
- 气肿疽梭菌不同靶基因检测方法的比较被引量：1
- 2015年
- 为检测牛、羊等反刍动物的气肿疽梭菌,筛选出更为特异、敏感的PCR检测方法,分别以fli A(C)、nan A、cct A为靶基因进行PCR检测,并对其敏感性、特异性等方面进行比较。结果表明,以cct A为靶基因的PCR检测方法敏感性最高,最小检测DNA量为12.30×10^(-5)pg/μL;以fli A(C)、nan A为靶基因的PCR检测方法敏感性较低,最小检测DNA量为0.123 ng/μL;3种靶基因引物菌未扩增出D型产气荚膜梭菌、E型产气荚膜梭菌、腐败梭菌、巴氏杆菌等基因片段,具有较好的特异性。本试验为气肿疽的快速诊断提供了更为敏感、特异的检测技术。
- 云巾宴任春宇车达金清洙段雪岩司唯金鑫
- 关键词：气肿疽梭菌PCR方法
