甘小凤
- 作品数：6 被引量：8H指数：2
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- 弓形虫棒状体蛋白2家族成员研究进展被引量：5
- 2015年
- 弓形虫是引起人兽共患弓形虫病的顶复门专性细胞内寄生原虫,感染的宿主范围广泛,严重危害人类的健康及畜牧业的发展。近年来随着对弓形虫研究的不断深入,弓形虫棒状体蛋白2家族在虫体入侵、纳虫泡修饰及毒力作用方面发挥的重要作用得到进一步的证实。棒状体蛋白ROP18作为该家族的重要成员,是弓形虫重要的毒力分子,在IRGs通路中发挥着重要作用。它可以定位在PVM上,清除IRGs,从而在弓形虫入侵细胞的过程中发挥着逃避免疫细胞清除的作用。另一家族成员蛋白假性激酶ROP5与ROP18之间发挥着协同作用,可以提高激酶活性来控制弓形虫的急性毒力,保护弓形虫免于清除。本文就ROP18与ROP5等毒力因子的分子作用机制进行了综述。
- 张贤甘小凤程正阳余莉
- 关键词：弓形虫毒力
- 弓形虫ROP18重组腺病毒载体的构建及其对神经干细胞C17.2凋亡的影响被引量：3
- 2016年
- 目的构建弓形虫棒状体蛋白ROP18重组腺病毒载体,研究其对神经干细胞C17.2凋亡的影响。方法将弓形虫ROP18从PEGFP-G2-ROP18重组质粒上亚克隆至腺病毒载体pHBAd-MCMV-GFP,重组腺病毒载体pHBAd-MCMVGFP-ROP18经PCR、测序鉴定正确后,与骨架质粒pHBAd-BHG共转染HEK293细胞进行包装,收获、扩增重组腺病毒并对其滴度进行测定。以MOI=70的重组腺病毒感染神经干细胞C17.2,转染不同时间荧光显微镜观察基因的表达情况。转染48h用CCK-8法检测C17.2的增殖情况;转染24h采用Annexin V-APC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western blot法检测半胱天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)的蛋白水平。结果重组ROP18过表达腺病毒在C17.2神经干细胞内能有效表达。转染48h,与空载体对照组相比,C17.2细胞增殖活性明显降低(P<0.05);转染24h,流式细胞术检测结果显示,ROP18基因转染组C17.2细胞凋亡率明显增加(P<0.001);Western blot检测显示caspase-3活性片段的表达明显增加(P<0.05)。结论成功构建了弓形虫ROP18重组腺病毒并在神经干细胞C17.2中表达,ROP18重组腺病毒能诱导C17.2神经干细胞凋亡。
- 张贤甘小凤程正阳都建罗庆礼沈继龙余莉
- 关键词：刚地弓形虫重组腺病毒细胞凋亡
- 弓形虫抑制Wnt/β-catenin通路干扰C17.2神经干细胞的分化
- 弓形虫是一种重要的嗜中枢先天性致畸因子.然而,其对神经干细胞分化的影响及其分子机制所知甚少.本研究在优化神经干细胞系C17.2分化条件的基础上,用不同剂量的弓形虫排泄分泌抗原(excretory-secretory an...
- 甘小凤张贤程正阳沈继龙罗庆礼余莉
- 弓形虫抑制神经干细胞向神经元分化的研究
- 2014年
- 目的探讨弓形虫排泄分泌抗原(ESA)对神经干细胞分化的影响。方法分别用含5%马血清、10%胎牛血清DMEM完全培养液,无血清DMEM培养液及含2%N2的DMEM/F12培养液培养诱导神经干细胞系C17.2分化,分别于诱导分化后1、3、5d收集细胞,提取RNA,采用RT-PCR检测神经元标志蛋白βⅢ-tubulin基因的转录;用含ESA的2%N2DMEM/F12培养液培养C17.2细胞5d,收集细胞,提取总蛋白,采用Western blot检测βⅢ-tubulin蛋白水平。结果用含2%N2的DMEM/F12培养液培养5d,C17.2细胞βⅢ-tubulin基因转录水平为3.93±0.13,另两组分别为(0.08±0.34)%和0,差异有统计学意义(P<0.05);2%N2诱导分化后5d,弓形虫ESA能显著降低βⅢ-tubulin蛋白水平(P<0.05)。结论弓形虫ESA能抑制C17.2神经干细胞向神经元分化。
- 甘小凤张贤程正阳沈继龙罗庆礼余莉
- 关键词：弓形虫神经干细胞分化
- 弓形虫抑制Wnt/β-catenin通路干扰C17.2神经干细胞的分化
- 目的:弓形虫是一种重要的嗜中枢先天性致畸因子。然而,其对神经干细胞分化的影响及其分子机制所知甚少。本研究旨在探讨弓形虫排泄分泌抗原(excretory-secretory antigens,ESAs)对神经干细胞分化的影...
- 甘小凤张贤程正阳沈继龙罗庆礼余莉
- 关键词：弓形虫神经干细胞分化
- 文献传递
- 弓形虫抑制Wnt/β-catenin通路干扰C17.2神经干细胞的分化
- 目的:探讨弓形虫排泄分泌抗原（ESAs）对神经干细胞分化的影响及其机制。 方法: （1）分别用含5％马血清、10%胎牛血清的DMEM完全培养液，无血清DMEM培养液及含2%N2的DMEM/F12培养液培养诱导神经干细...
- 甘小凤
- 关键词：弓形虫排泄分泌抗原神经干细胞分化
- 文献传递
