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李艳凤
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1
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供职机构:
北京协和医学院基础医学院医学分子生物学国家重点实验室
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发文基金:
国家重点基础研究发展计划
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
朱大海
北京协和医学院基础医学院医学分...
许家林
北京协和医学院基础医学院医学分...
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2011
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心肌锚定重复序列蛋白基因心脏特异敲除小鼠模型构建与鉴定
2011年
目的构建心肌锚定重复序列蛋白(CARP)基因心脏特异敲除小鼠模型,为研究CARP基因与心脏疾病的关系奠定基础。方法构建CARP基因条件打靶载体pL253-CARP-LoxP电转入小鼠胚胎干细胞(ES)细胞,G418和GANC药物筛选阳性细胞克隆,Southern blot确定CARP基因条件打靶载体转染成功。胚胎注射ES细胞入小鼠囊胚,获得嵌合体小鼠与心脏特异启动子Cre小鼠(α-MHC-Cre)杂交。结果得到6只嵌合体小鼠,与α-MHC-Cre小鼠杂交获得CARP基因心脏特异敲除小鼠(CARP-KO),半定量RT-PCR和Western blot确定CARP基因在CARP-KO小鼠心脏缺失。该小鼠早期胚胎发育和个体生长、心脏发育正常,但心肌肥厚标志基因β-MHC和ANF显著升高(分别为2.25±0.04和1.45±0.03)(P<0.05)。结论成功构建CARP基因心脏特异敲除小鼠,CARP基因缺失对小鼠胚胎发育、个体生长和心脏发育没有显著影响。
许家林
李艳凤
朱大海
关键词:
基因打靶
心肌肥厚
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