王雪云
- 作品数：6 被引量：25H指数：2
- 供职机构：河南农业大学牧医工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 河南省部分地区鸡大肠杆菌的分离鉴定及耐药性研究被引量：17
- 2015年
- 为了解河南省鸡场大肠杆菌的流行情况,对采自周口、商丘、安阳等6个地区的腹泻鸡病料进行病原的细菌学检验和药敏试验,经分离培养、形态染色镜检、生化试验、血清学试验和动物试验,共分离鉴定出11株鸡大肠杆菌,有5种血清型,分别为O14、O15、O24、O143、O157。动物试验结果表明,分离鉴定出的这5种血清型大肠杆菌均有致病性,且毒力不同,其中从周口、开封、鹤壁分离的菌株毒力强,死亡率均为100%。药敏试验结果表明,大部分菌株对链霉素、阿莫西林/棒酸敏感,对头孢唑啉、强力霉素、氨苄西林、磷霉素、呋喃妥因均存在不同程度的耐药现象,其中对强力霉素、氨苄西林、头孢唑啉严重耐药。
- 张彬韩志霞马金玉王雪云许兰菊李克宇
- 关键词：大肠杆菌耐药性
- 鸡源志贺菌IpaC基因表达载体构建及其在毕赤酵母中的表达
- 志贺菌是肠道致病菌，感染后可以引起成年人和儿童腹泻。以前人们一直认为志贺菌不能使畜禽致病，实际上，大量国内外相关报道显示志贺菌可以感染多种动物，例如猪、狐狸、猕猴、牛、鸡、鸭等，感染后可引起腹泻、腹痛严重者甚至导致死亡。...
- 王雪云
- 关键词：毕赤酵母真核表达
- 鸡源志贺菌IpaC基因表达载体的构建及其在毕赤酵母中的表达
- 2016年
- 为使IpaC基因表达产物保持天然的生物学活性,实现在酵母表达系统中高效表达,本研究在不改变IpaC蛋白氨基酸序列的情况下,根据酵母密码子偏爱性优化合成IpaC#基因,分别构建真核表达载体pGAPZαA-IpaC和pGAPZαA-IpaC#,然后将线性化重组质粒电转化至毕赤酵母X-33中,对阳性转化子用SDS-PAGE及Westernblot检测其表达产物。结果表明,经SDS-PAGE及Westernblot检测,仅在pGAPZαA-IpaC#/X-33重组菌表达产物菌体沉淀中检测到大小为70ku的目的蛋白,实现了鸡源志贺菌IpaC#基因在毕赤酵母中的胞内表达,从而验证毕赤酵母表达系统与外源基因序列的相关性,为进一步提高鸡源志贺菌IpaC基因在毕赤酵母中的高效表达提供科学依据,对研究该病的发病机制具有重要意义。
- 韩志霞马金玉王雪云蒋大伟刘芳许兰菊李克宇
- 关键词：毕赤酵母真核表达
- 鸡源志贺菌不同分离株的血清型鉴定
- 蒋大伟苗银萍李克宇张彬王雪云许兰菊
- 关键词：细菌抗原凝集试验血清型
- 鸡源志贺菌IpaC基因变构体重组酵母表达载体的构建及初步表达被引量：1
- 2015年
- 为使IpaC基因表达产物保持天然的生物学活性,实现在酵母表达系统中高效表达,本研究首先采用反向PCR将IpaC基因358～360位和361～363位酵母菌低频密码子突变为偏嗜性密码子,并进一步构建了克隆载体pMD18-T-IpaC＊和酵母表达载体pPICZαA-IpaC＊,然后将线性化重组质粒pPICZαA-IpaC＊电转化至毕赤酵母X-33中,对阳性转化子进行诱导表达,并用SDS-PAGE检测其表达产物。结果表明SDS-PAGE在大约63 000处检测出目的条带,实现了鸡源志贺菌IpaC基因在毕赤酵母中的初步表达。这为进一步研究IpaC生物学功能奠定了基础。
- 李克宇刘一尘蒋大伟张春杰许兰菊张彬王雪云马金玉韩志霞
- 关键词：毕赤酵母
- 鸡肠上皮细胞原代培养与鉴定被引量：7
- 2015年
- 为了探讨鸡肠上皮细胞体外分离培养方法,进一步研究鸡源志贺菌Ipa C毒力蛋白在鸡肠上皮细胞上的受体蛋白分子,试验分别无菌取14,16,18日龄鸡胚肠组织,用300 U/m LⅪ型胶原酶和0.1 mg/m LⅠ型中性蛋白酶混合搅拌消化25 min,用壁差法纯化鸡肠上皮细胞,贴壁时间差为3 h,分别种植于20%FBS包被过的和未包被过的一次性塑料细胞培养瓶中,在倒置显微镜下观察细胞生长状态,透射电镜下对培养细胞进行鉴定。结果表明:采用16日龄鸡胚肠组织用Ⅺ型胶原酶和Ⅰ型中性蛋白酶联合消化25 min,可获得较多的肠隐窝单位,肠上皮细胞在20%FBS包被过的一次性细胞培养瓶中贴壁效果良好,细胞生长状态良好;透射电镜下可见鸡肠上皮细胞的微绒毛,鉴定为鸡肠上皮细胞。
- 王雪云刘芳蒋大伟韩志霞马金玉李克宇张彬许兰菊
- 关键词：鸡胚
