胡凌 作品数:17 被引量:70 H指数:5 供职机构: 四川农业大学 更多>> 发文基金: 国家科技支撑计划 四川省教育厅青年基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
一种快速检测非洲猪瘟病毒环介导等温扩增的方法 本发明公开了一种快速检测非洲猪瘟病毒环介导等温扩增的方法,包括LAMP最佳反应体系为25μL:1μL8UBstDNA聚合酶,2.5μL10×ThermoPolbuffer缓冲液,6μL2.5mMeachdNTPs,4μL... 王印 邬旭龙 杨泽晓 姚学萍 张鹏飞 姜睿姣 肖璐 张博 刘亚东 冷伊依 胡凌 林星宇 曾相杰 罗忠永 任梅渗 蒙正群文献传递 基于TEM-PCR和基因芯片检测猪病毒性疾病的方法 本发明公开了一种基于TEM-PCR和基因芯片检测猪病毒性疾病的方法,依据靶序列富集多重PCR,采用4对特异性的套式PCR引物和探针,并在各内引物的5’端分别加上能被一对通用引物识别的标签序列。本发明克服了传统PCR方法的... 王印 彭善珍 杨泽晓 姚学萍 邬旭龙 张鹏飞 冷伊依 肖璐 任梅渗 曾相杰 罗忠永 胡凌 林星宇 张博 刘亚东 蒙正群 李桂黎 王波文献传递 一种检测猪繁殖障碍病毒的多重GeXP-PCR方法 本发明公开了一种检测猪繁殖障碍病毒的多重GeXP‑PCR方法,采用含7种猪繁殖障碍病毒靶基因的PRV,ASFV,PPV,PRRSV,CSFV,PCV2,JEV嵌合引物和通用引物以适当配比参加PCR反应,PRV,ASFV,... 王印 胡凌 杨泽晓 姚学萍 林星宇 邬旭龙 李桂黎 任梅渗 肖璐 张鹏飞 曾相杰 冷伊依文献传递 猪繁殖障碍病病原5重PCR及7重GeXP-PCR检测方法的建立 为了在一个体系中检测多种猪繁殖障碍病的病原,本文设计了两种检测方法,包括猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)、非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,AS... 胡凌文献传递 兔病毒性出血病病毒VP60蛋白基因研究进展 被引量:5 2015年 兔出血病病毒(RHDV)是引起兔病毒性出血病(RHD)的病原,严重威胁着世界养兔业的健康发展。在RHDV的感染和免疫研究方面,RHDV的衣壳蛋白VP60作为具有重要免疫原性的主要结构蛋白备受关注,论文对VP60蛋白基因的结构特征、核苷酸变异情况及在诊断方法建立和疫苗预防研究等方面进行了综述,为RHDV防控相关研究提供有用的参考资料。 李桂黎 任冉阳 胡凌 杨泽晓关键词:VP60蛋白 猪源多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及荚膜血清分型 被引量:13 2016年 为了解各血清型的多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)在四川、重庆、云南的流行情况,对2013—2014年间四川、重庆、云南等地8个规模化养殖场的125份病死猪肺炎样品进行细菌分离,并用PCR方法对分离的多杀性巴氏杆菌进行鉴定及荚膜血清分型。结果表明:从有肺炎症状病死猪的肺脏样品中共分离出11株多杀性巴氏杆菌,其中有7株为A血清型(63.6%),3株为D血清型(27.3%),1株为F血清型(9.1%),没有发现B和E血清型。表明在该区域内,猪肺疫主要是由A型Pm感染引起。另外,此次还分离出了1株较少见的F型多杀性巴氏杆菌。该结果可为上述地区巴氏杆菌病的防治提供科学材料。 林星宇 胡凌 王印 杨泽晓 姚学萍 肖璐 任梅渗 曾相杰关键词:多杀性巴氏杆菌 血清分型 猪源支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及其皮肤坏死素(DNT)粗提液的小鼠皮肤毒性试验 被引量:5 2016年 为更好地进行波氏菌病的防治,利用分离培养、生化实验、PCR鉴定和同源性分析对采自四川某规模化猪场有明显萎缩性鼻炎症状的猪鼻腔拭子进行支气管败血波氏杆菌的分离鉴定,参考经典的皮肤坏死素(DNT)粗提技术,将分离株DNT粗提原液及10和100倍稀释物分别注射于4-5、15-20和40-45d3组不同日龄的SPF鼠,进行毒力检测。结果分离到一株支气管败血波氏杆菌,其DNT毒力较强,0.2mL粗提原液可造成4-5d乳鼠皮下组织发生严重急性出血性炎症而死亡;15-20d乳鼠皮下出血,毛囊损伤,表皮层细胞结构模糊、紊乱,耐过乳鼠损伤处皮肤毛发生长受损;40-45d小鼠脱毛等轻微症状。本试验分离菌株皮肤毒性较强,DNT对不同日龄鼠的皮肤致病力有差异,可引起表皮层、真皮层和皮下组织同时损伤。 肖璐 邬旭龙 王印 杨泽晓 姚学萍 胡凌 林星宇 任梅渗 罗忠永 曾相杰关键词:支气管败血波氏杆菌 皮肤毒性 GeXP多重基因表达分析系统研究进展 被引量:5 2016年 Genome Lab Ge XP(Gene e Xpression Profiler)是由美国Beckman Coulter公司推出一个多基因分析平台。该系统采用荧光标记的通用引物和末端连接有通用引物序列的特异性嵌合引物相结合引发多重体系扩增,解决了由于PCR选择和PCR漂移引起的传统多重PCR技术的扩增偏爱性,并与毛细管电泳相结合,解决了琼脂糖凝胶电泳因分辨率不高造成的假阴性和假阳性。本文主要介绍了Ge XP多重基因表达分析系统的技术背景、基本原理、扩增优势,重点阐述了其在各方面的应用现状及发展趋势。 胡凌 林星宇 王印 杨泽晓 姚学萍 李桂黎关键词:多重PCR 猪源荚膜血清F型多杀性巴氏杆菌的分离鉴定 被引量:4 2015年 为确定导致猪细菌性感染死亡的病原,从送检病死猪肺中分离纯化出1株细菌,通过对该菌株进行培养特性观察、生化反应、药敏试验、动物致病性试验,并采用PCR对该分离菌株进行了种属及荚膜血清型鉴定。结果显示,该分离菌株革兰染色为阴性。生化试验及PCR鉴定结果显示,该分离菌株为荚膜血清F型多杀性巴氏杆菌,其对小鼠有强致病性。此次分离的这株多杀性巴氏杆菌形态结构和生化特性比较典型,毒力较强,且为较少见的荚膜血清F型多杀性巴氏杆菌。这一结果为进一步研究多杀性巴氏杆菌的致病机理奠定了基础。 林星宇 王印 杨泽晓 姚学萍 胡凌 彭善珍 邬旭龙关键词:多杀性巴氏杆菌 同时检测五种引起猪繁殖障碍的病毒的多重PCR的建立 被引量:5 2015年 为建立一种能同时检测5种引起猪繁殖障碍的病毒的多重PCR方法,分别针对各病毒的保守序列设计了4对特异性引物,其中3对分别用于扩增猪瘟病毒(CSFV)E2基因、非洲猪瘟病毒(ASFV)VP72基因、伪狂犬病病毒(PRV)gB基因的目的片段;针对NSP2基因设计的1对引物用于区分猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)。通过对反应条件的优化,建立了快速检测CSFV、ASFV、PRV、PRRSV和HP-PRRSV的多重PCR方法。敏感性试验结果显示,该多重PCR对这5种病原核酸的最低检测量分别为2.10×103(HP-PRRSV),1.30×103(PRRSV),1.09×104(CSFV),1.50×103(ASFV)和8.97×102(PRV)copies/μL。对49份临床样品的检测结果显示,它们的混合感染率为51%(25/49)。该方法对阴性样本的扩增结果均为阴性,并且无交叉反应性,表明该方法特异性良好,具有快速、灵敏且成本低等优点,能够对猪繁殖障碍病毒病的单个或混合感染的临床样品进行快速鉴别诊断,并对其流行病学调查具有深远意义。 胡凌 王印 杨泽晓 姚学萍 林星宇 李桂黎关键词:多重PCR 非洲猪瘟病毒 猪瘟病毒 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 伪狂犬病病毒