张青云 作品数:75 被引量:403 H指数:9 供职机构: 北京大学肿瘤医院 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 北京市自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 自动化与计算机技术 更多>>
北京地区13336例成人空腹血脂水平分析 被引量:54 2007年 目的通过检测健康查体者空腹血脂水平来了解北京地区人群血脂水平现状及其血脂异常患病率。方法应用日立7 170全自动生化分析仪检测北京地区13 336例成人空腹血脂,血脂指标包括甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),比较不同性别和年龄组间血脂水平差别及血脂异常患病率的差异。结果总体血脂异常患病率59.9%,男性71_6%,女性47.2%。男性 TC 平均(4.89±0.87)mmol/L、LDL-C 平均(3.33±0.84)mmol/L、HDL-C平均(1.28±0.30)mmol/L、TG 中位数1.32 mmol/L;女性 TC 平均(4.79±0.94)mmol/L、LDL-C平均(2.99±0.89)mmoL/L、HDL-C 平均(1.53±0.34)mmoVL、TG 中位数0.9mmol/L。男性和女性4种血脂成分异常患病率均随年龄增加而增高(P<0.01)。TC、LDL-C、TG 水平随年龄增加而增高(P<0.01),HDL-C 水平随年龄的增加有降低趋势(P<0.01)。TC 在25~44岁问男性高于女性(P<0.01),在55岁以上女性显著高于男性(P<0.05)。LDL-C 在18~44岁间男性高于女性(P<0.01),在45~74岁女性显著高于男性(P<0.01)。HDL-C 水平各年龄组女性明显高于男性(P<0.01)。TG 在18~54岁男性显著高于女性(P<0.01),在55~64岁组两性间无差异,64岁以上女性高于男性(P<0.05)。结论北京地区成人中血脂异常患病率较高,并且随年龄增大而增高,男女性别间血脂异常患病率差异有统计学意义。 王琼 张青云 刘娟关键词:胆固醇 低密度脂蛋白胆固醇 患病率 一个人肝癌相关基因及其编码产物与应用 本发明公开了一个人肝癌相关基因及其编码产物,该基因为是下列核苷酸序列之一:1)序列表中的SEQ ID №:1;2)编码序列表中SEQ ID №:2或SEQ ID №:3蛋白质序列的多核苷酸;3)与序列表中SEQ ID №... 周柔丽 张青云 张页 邵根泽 刘歆荣 刘军建 林明 张莎文献传递 肿瘤标志物临床检测技术现状及发展趋势 被引量:29 2006年 肿瘤标志物(TM)对肿瘤的诊断、判断疗效及预后至关重要。TM检测技术的合理应用和结果是否准确,会直接影响肿瘤诊断和治疗效果。仅此对目前临床上TM的检测,如酶联免疫吸附试验、化学发光、电化学发光等技术特点和现状,TM检测新技术,如生物芯片、飞行质谱的研究进展和发展趋势进行简要探讨。 张青云关键词:肿瘤标志物 荧光定量PCR检测血清微小RNA-21方法的建立及对乳腺癌诊断的初步应用 被引量:9 2011年 目的 建立一种SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测血清miR-21方法,并初步探讨其对乳腺癌诊断的应用价值.方法 用Trizol试剂提取血清总RNA.用茎环引物将miR-16(作为miR-21内参基因)与miR-21分别逆转录成相应cDNA.再用SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR对cDNA进行扩增、检测.然后,通过信噪比(signal to noise ratio,SNR)分析试验的准确性;通过熔解曲线评价试验的特异性;通过标准曲线的R2评估试验的精确性;通过批内和批间差异计算试验的稳定性.另外,用自建方法检测33例乳腺癌患者、18例乳腺良性疾病和49名健康人群血清miR-21和miR-16水平,并根据乳腺癌组与健康对照组中miR-21相对表达量确定临界值,以评价其对乳腺癌诊断的敏感度、特异度.结果 通过PCR退火与延伸在温度和时间上的优化,本试验所建立方法SNR≥99.36%;熔解曲线为单峰;标准曲线R3=0.994 8;批内CV< 1.5%,批间CV< 4%.以miR-16为内参,用自建SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测乳腺癌组、良性疾病组与健康对照组血清miR-21的相对表达量分别为20.83±18.18、20.86±10.11和9.33±4.44,经Kruskal Wallis检验,3组间表达量差异有统计学意义(x2=16.92,P<0.001),且健康对照组与乳腺癌组、健康对照组与良性疾病组间的差异均有统计学意义(Z值分别为-2.58、-4.42,P均≤0.01),而乳腺癌组与良性疾病组血清miR-21表达量差异无统计学意义(Z=-0.51,P=0.608).以miR-21相对表达量18.32为临界值,其对乳腺癌诊断的敏感度为51.5%(17/33),特异度为93.9%(46/49).结论 建立了一种较敏感、特异、稳定的SYBRGreen Ⅰ荧光定量PCR检测血清miR-21方法,该方法对乳腺癌的诊断可能有一定价值. 李雪峰 徐建军 张青云关键词:聚合酶链反应 微小RNAS 一个人肝癌相关基因及其编码产物与应用 本发明公开了一个人肝癌相关基因及其编码产物,该基因为是下列核苷酸序列之一:1)序列表中的SEQ ID №:1;2)编码序列表中SEQ ID №:2或SEQ ID №:3蛋白质序列的多核苷酸。可以将本发明的蛋白质做为肝癌早... 周柔丽 张青云 张页 邵根泽 刘歆荣 刘军建 林明 张莎文献传递 实时荧光定量PCR方法检测乳腺癌患者外周血中uPA基因表达水平及其临床意义 2009年 目的探讨人外周血中尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase-type plasminogen activator,uPA)基因表达水平与乳腺癌临床分期和转移的关系,评价其对乳腺癌辅助诊断及判断预后的临床意义。方法采用实时荧光定量PCR方法检测71例正常人和90例乳腺癌患者外周血中uPA mRNA表达水平。结果97.8%的乳腺癌病人外周血中有uPA基因表达,在正常人外周血中的表达率为40.8%;基因表达水平与临床分期和肿物转移情况相关,P值均<0.05;在患者年龄、肿瘤组织学类型及肿瘤大小分组中,uPA基因表达未发现显著性差异。结论乳腺癌患者外周血中uPA基因表达水平明显增高,并且与肿瘤细胞的转移和病理分期有关。应用实时荧光定量PCR的方法检测外周血中uPA基因表达水平对乳腺癌的辅助诊断及判断预后具有一定的意义。 刘俊泽 张青云 王雅明 徐建军关键词:尿激酶型纤溶酶原激活物 乳腺癌 荧光定量PCR法 细胞因子Midkine融合蛋白的表达及其单克隆抗体的制备与应用 被引量:3 2005年 目的:克隆细胞因子midkine(MK)基因,表达其融合蛋白,制备抗MK单克隆抗体(mAb)并检测MK在肿瘤细胞中的表达。方法:利用MK基因的特异性引物,通过RT-PCR从人肾癌组织mRNA中扩增人MKcDNA分子。将其定向克隆于原核表达载体中,在大肠杆菌中表达MS2-MK融合蛋白。以纯化的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,用传统的杂交瘤技术,进行细胞融合、筛选、克隆化并制备mAb腹水。用ELISA法分析其Ig亚类,用免疫细胞化学染色法检测MK在肿瘤细胞中的表达。结果:成功地克隆出MK基因并表达了MS2-MK融合蛋白。通过免疫和筛选,获得2株分泌小鼠抗人MKmAb的杂交瘤细胞,其分泌的mAb的Ig亚类分别为IgG1和IgG2a。免疫细胞化学染色显示,2株mAb与人胃癌细胞株MGC803和胃癌组织呈强阳性反应。结论:在原核细胞中获得MS2-MK融合蛋白的表达,并制备出抗MK的mAb,为研究MK的生物学活性提供了条件。 张青云 杨敏 王雅明 徐建军关键词:RT-PCR MIDKINE 单克隆抗体 免疫细胞化学染色 鼠抗人天冬酰胺合成酶(ASNS)单克隆抗体的制备与肿瘤表达检测 2011年 目的:通过制备抗天冬酰胺合成酶(ASNS)单克隆抗体(mAb),检测ASNS在不同肿瘤中的表达,探索其表达的意义。方法:诱导表达融合蛋白MS2-ASNS,以纯化的MS2-ASNS蛋白免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/0融合,以融合蛋白MS2-ASNS和MS2-PAI通过间接ELISA双筛和有限稀释克隆化,获得稳定分泌抗ASNS mAb的杂交瘤细胞株。间接ELISA和Western blot方法对抗ASNS mAb效价、特异性及亲和力进行鉴定。IHC技术检测ASNS在肿瘤细胞株及肿瘤组织中的表达。结果:获得2株能高效分泌特异性抗ASNS mAb的杂交瘤细胞株F4-15、F4-16,亚类均为IgG2a。间接ELISA结果表明制备的抗体有很好的特异性,抗体效价均达到1∶5×105。Western blot鉴定抗ASNS mAb能特异性识别肿瘤细胞株中的ASNS。IHC技术检测天然ASNS在胃癌细胞株SGC-7901和肝癌细胞株SMMC-7721、BEL-7402、HepG2及肺癌、食管癌组织中均为胞质表达。结论:制备的抗ASNSmAb特异性强,可检测ASNS在多种肿瘤中的表达,为进一步研究ASNS在特定肿瘤如中线鼻/鼻型NK/T细胞淋巴瘤中的表达奠定了基础。 史薇 张青云 贾战生 徐建军 王雅明 勇威本关键词:单克隆抗体 WESTERN BLOT IHC 乳腺癌患者外周血中MnSOD基因表达检测及其临床意义的研究 2010年 目的探讨锰超氧化物歧化酶(manganese superoxide dismutase,MnSOD)在乳腺癌患者和正常人外周血中的表达差异及其临床意义.方法采用实时荧光定量PCR方法检测218例乳腺癌患者和77例正常女性外周血中MnSOD基因表达水平,并进行分析.结果乳腺癌患者外周血中MnSOD基因表达水平为4.38±0.74,正常女性外周血中MnSOD基因表达水平为4.16±0.64,P〈0.001,有统计学意义.淋巴转移患者组和临床早期患者组与正常女性组比较,P〈0.001.结论淋巴转移和临床早期乳腺癌患者外周血中MnSOD基因表达水平显著低于正常女性,提示MnSOD的低表达与肿瘤的发生和发展有关.应用荧光定量PCR方法检测外周血MnSOD基因水平对监测乳腺癌有一定意义. 刘俊泽 张青云 徐建军 王雅明关键词:MNSOD 乳腺癌 实时荧光定量PCR 肿瘤患者铜绿假单胞菌分布及耐药性分析 被引量:5 2015年 目的分析本院2010—2013年住院的肿瘤患者铜绿假单胞菌分布及其对常用抗生素的耐药情况。方法分析临床送检标本中分离出的571株铜绿假单胞菌的分布情况,统计其对14种常用抗生素的耐药率。结果 571株铜绿假单胞菌中,痰标本检出354株(62.0%),气管吸出物标本检出113株(19.8%),血液、分泌液、穿刺液等标本共检出104株(18.2%);肿瘤外科检出322株(56.4%),肿瘤内科检出150株(26.3%),ICU检出99株(17.3%);38株(6.7%)对多种抗生素耐药;对头孢曲松和头孢替坦的耐药率均>94.0%,对左氧氟沙星、庆大霉素、环丙沙星、头孢他啶、头孢吡肟、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、妥布霉素和阿米卡星的耐药率均<10.0%。结论了解本院铜绿假单胞菌分布情况及其对常用抗生素的耐药性,对临床治疗肿瘤患者铜绿假单胞菌感染有重要作用。 刘琳娟 陈咪未 李琪 张青云关键词:肿瘤 铜绿假单胞菌 耐药性