李春凤
- 作品数：10 被引量：63H指数：5
- 供职机构：山东大学第二医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生一般工业技术政治法律农业科学更多>>
- 基于新型固态荧光碳量子点的微生物快速检测技术研究及应用
- 目的: 基于新型纳米荧光材料——固态荧光碳量子点(solid-state fluorescent carbonnanodots，SCDs)，结合免疫层析技术和生物成像技术，实现现场条件下快速的微生物特异性检测与总菌监测...
- 李春凤
- 关键词：微生物检测
- 文献传递
- 基于上转换发光技术的尿液中吗啡及甲基苯丙胺快速定量检测方法研究被引量：12
- 2015年
- 目的利用上转换发光免疫层析技术（UPT-LF）建立一种尿液中吗啡（MOP）及甲基苯丙胺（MET）快速定量检测方法并对其进行系统评价。方法以上转换发光纳米颗粒（UCP-NPs）作为生物示踪物,竞争模式免疫层析作为检测平台,建立可对尿液中MOP及MET进行定量检测的UPT-LF,即MOP-UPT-LF、MET-UPT-LF。以MOP-UPT-LF为代表,评价UPT-LF对痕量毒品检测极限,通过系列浓度标准品测定,评价定量检测能力。根据常规检测阈值,调整MOP-UPT-LF及MET-UPT-LF检测敏感性及线性范围,并评价其定量检测能力。以LC-MS、GC-MS分别作为MOP、MET检测的金标准,以胶体金免疫层析作为对照,对执法现场收集尿样进行检测,确定UPT-LF定性检测性能。对系列浓度MOP模拟阳性样本同时进行LC-MS及MOP-UPT-LF定量检测,对系列浓度MET模拟阳性样本同时进行GC-MS及MET-UPT-LF定量检测,评价UPT-LF定量检测性能。结果在痕量检测条件下,MOP-UPT-LF敏感性可达1ng/m L,线性范围为1~5000ng/m L（r=-0.98172,P〈0.0005）。在常规检测条件下,MOP-UPT-LF敏感性为50ng/m L,线性范围调整为50~3000ng/m L（r=-0.98464,P〈0.0005）;MET-UPT-LF敏感性为100ng/m L,线性范围为100~5000ng/m L（r=-0.99964,P〈0.0005）。就定性检测而言,MOP-UPT-LF及MET-UPT-LF均较优,灵敏度及特异度均为100%,与胶体金结果一致。就定量检测而言MOP-UPT-LF及MET-UPT-LF与定量确证方法LC-MS及GC-MS无显著差异。结论本研究建立MOP-UPT-LF、MET-UPT-LF方法,在满足快筛试剂快速简便的基础上,进一步实现了现场快速定量检测,为尿液中毒品的现场快速定量检测提供了技术保障。
- 刘晓林承喜张平平杨笑熳赵勇李春凤孙崇云邱景富杨瑞馥周蕾
- 关键词：法医毒物学免疫层析吗啡甲基苯丙胺快速定量检测尿液
- 基于上转发光免疫层析技术的常见食源性致病菌快速检测方法研究与评价被引量：16
- 2015年
- 目的研制针对4种常见食源性致病菌：甲型副伤寒沙门菌（Salmonella paratyphi A）、乙型副伤寒沙门菌（Salmonella paratyphi B）、大肠埃希菌O157∶H7（Escherichia coli O157∶H7）、副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）的基于上转发光免疫层析技术（UPT-LF）的快速定量检测试纸,并对其检测性能进行评价。方法以上转发光纳米颗粒（UCP-NPs）作为示踪物,基于双抗体夹心检测模型,研制针对上述4种靶标菌的UPT-LF试纸;以4种靶标菌的系列浓度标准菌悬液作为标准样品,评价试纸的敏感性、特异性、线性和精密性,并进行模拟染菌食品的检测,评价模拟样品阳性检出率。结果针对4种靶标菌的UPT-LF试纸均具有良好的线性,相关系数r为0.985-0.996;检测敏感性达10^5-10^6CFU/ml,与其他近缘菌株无交叉反应;对乳制品、饮料、小食品、水产、肉类等细菌污染的食品检出率较高。结论该研究建立的对4种常见食源性致病菌进行快速检测的UPT-LF,简便快速,具有良好的敏感性、特异性和线性定量能力,操作性能可满足食品安全检测的要求。
- 李春凤赵勇王晓英张平平刘晓孙崇云杨瑞馥王成彬周蕾
- 关键词：食源性致病菌甲型副伤寒沙门菌副溶血弧菌
- 基于上转发光免疫层析技术快速检测单核细胞增生李斯特菌被引量：4
- 2014年
- 目的建立可快速检测单核细胞增生李斯特菌（Listeria monocytogenes,LM）的上转发光免疫层析技术（up-converting phosphor technology based lateral flow assay,UPT-LF）,即LM-UPT-LF。方法针对LM特异的p60蛋白制备单克隆抗体,并与上转发光纳米颗粒（up-converting phosphor nanoparticles,UCP-NPs）共价偶联作为结合物,采用双抗体夹心免疫层析模式建立LM-UPT-LF,并对其敏感性与特异性进行评价。结果建立了可快速检测LM的LM-UPT-LF平台,在样本〈10 cfu、10~99 cfu、100~1000 cfu绝对LM污染量条件下可分别在培养20、18、16 h检出阳性。其他13种食源性致病菌在高浓度（109cfu/ml）时无非特异性交叉。结论所建立的LM-UPT-LF操作简便快速,具有良好的敏感性和特异性,适用于一线病原调查与检测。
- 刘旭李春凤王晓英冯娜杨瑞馥王成彬周蕾
- 关键词：单核细胞增生李斯特菌
- 血清miR-374a在宫颈癌患者中的表达变化及其与临床病理特征的关系被引量：5
- 2018年
- 目的探讨宫颈癌患者血清中miR-374a的表达变化及其与临床病理特征的关系。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测68例宫颈癌患者和36例健康体检者血清中miR-374a的表达水平,并探讨其与宫颈癌患者临床病理特征的关系。结果宫颈癌患者血清miR-374a表达水平较健康体检者升高(P<0.05)。宫颈癌患者血清miR-374a表达水平与临床分期、病理分级、是否存在淋巴结转移密切相关(P均<0.05);与患者年龄、宫颈癌组织学类型、是否HPV感染、肿瘤直径无关(P均>0.05)。结论血清miR-374a表达水平在宫颈癌患者中升高,并与临床分期、病理分级、淋巴结转移等临床病理特征密切相关。
- 亓颖芝郎晓艳周静李春凤李静芦鑫
- 关键词：宫颈肿瘤临床病理特征
- 基于上转发光免疫层析技术的鼠疫耶尔森菌、炭疽杆菌芽孢、布鲁菌快速检测方法研究与对比评价被引量：6
- 2015年
- 目的研制基于上转发光免疫层析技术（UPT-LF）检测鼠疫耶尔森菌（简称鼠疫菌）、炭疽杆菌芽孢、布鲁菌的试纸，与BioThreatAlert免疫层析（BTA）试纸的检测和操作性能进行对比。方法以上转发光纳米颗粒作为生物示踪物，采用双抗体夹心模式分别研制检测鼠疫菌、炭疽杆菌芽孢、布鲁菌的uPT．LF试纸。分别配制10^10、10^9、10^8、10^7、10^6、10^5、0CFU／ml系列浓度的鼠疫菌、炭疽杆菌芽孢、布鲁菌标准品以及10^9CFU／ml系列浓度的27种特异性评价菌株菌液，采用UPT-LF试纸对其进行检测，对3种UPT-LF试纸的敏感性、精密性、线性和特异性进行分析评价。配制模拟阳性样品，分别采用uPT-LF和BTA试纸对10^7、10^6、10^5、0CFU／ml系列浓度的标准品以及模拟阳性样品进行检测，比较UPT-LF和BTA试纸的检测时间、敏感性以及鼠疫菌、炭疽杆菌芽孢、布鲁菌的检出率。结果鼠疫菌UPT—LF、炭疽杆菌芽孢uPrr—LF、布鲁菌UPT-LF试纸的敏感性均达到10^5CFU／ml，各系列浓度检测带信号／质控带信号（T／C）值的变异系数均≤15％，lg[T／C值-临界值（cut—off值）]与lg（标准品浓度）的相关系数分别为0．996、0．998、0．999（F=1647．57、743．51、1822．17，P值均〈0．001）。鼠疫菌UPT-LF和布鲁菌UPT-LF试纸检测特异性评价菌株时，均无非特异性交叉反应，炭疽杆菌芽孢UPT—LF试纸检测枯草芽孢杆菌分离株2#芽孢、蜡样芽孢杆菌分离株1#芽孢存在非特异交叉反应，检测其他特异性评价菌株均无非特异性交叉反应。UPT-LF试纸检测鼠疫菌、炭疽杆菌芽孢、布鲁菌样品的时间分别为33、36、37min，BTA为115、115、111min；UPT-LF和BTA试纸检测0CFU／ml标准品的阴性率均为5／5；UPT-LF试纸检测炭疽杆菌芽孢、鼠疫菌、布鲁菌的敏感性均达到10^5CFU／ml，BTA试纸分别为10^6、10^6、10^5CFU／ml；模拟样品检测中，UP
- 李春凤张平平王晓英刘晓赵勇孙崇云王成彬杨瑞馥周蕾
- 关键词：耶尔森菌鼠疫免疫层析
- 发光碳量子点的合成与应用研究进展被引量：9
- 2015年
- 碳量子点自2004年被发现以来,因其荧光强度高、耐光漂白、激发波长广、发射峰形较窄等优良的光学性能以及突出的生物相容性,成为研究热点。主要综述了碳量子点不同的合成方法、光学性能以及表征技术,并对其在多领域的应用进行了讨论,重点论述了不同方法合成碳量子点的优劣以及不同领域的应用前景,为碳量子点的进一步研究提供参考。
- 李春凤王成彬刘星元杨瑞馥周蕾
- 关键词：纳米材料光谱
- 基于上转发光免疫层析技术快速检测致病性沙门氏菌的研究与评价
- 目的:建立一种可以同时对7种沙门氏菌直接进行现场检测的上转发光免疫层析快速检测方法,即Salm-UPT-LF.方法:以UCP颗粒作为标记物,采用双抗体夹心法建立Salm-UPT-LF.以系列浓度的标准菌悬液确定方法的敏感...
- 李春凤冯娜王晓英刘旭张平平赵勇林长青杨瑞馥王成彬周蕾
- 脑梗死与脑出血患者的血栓弹力图结果比较及其临床意义被引量：12
- 2019年
- 目的探讨脑梗死与脑出血患者血栓弹力图检测指标的变化以及与传统凝血功能检测结果的相关性。方法选择2018年3月至2019年3月山东大学第二医院收治的73例脑梗死病例和46例脑出血病例作为研究对象,同期在我院体检的健康人群20例作为健康对照组,检测血栓弹力图(TEG)的5项主要指标:凝血反应时间(R值)、凝血形成时间(K值)、血凝块形成速率或α角(Angle)、血栓最大幅度(MA)、凝血综合指数(CI)和传统凝血功能指标:凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原浓度(FIB)、D二聚体(D-Dimer)以及血小板数量(PLT)。结果3组的K值、Angle、MA值、CI的结果差异有统计学意义,R值无明显差异;脑出血组的Angle、MA值、CI均低于健康对照组,而脑梗死组患者的Angle、MA值、CI均高于健康对照组,脑出血组的K值高于脑梗死组(P<0.05);脑出血组的PLT低于脑梗死组(P<0.05);凝血功能检测结果显示,脑出血组的APTT低于脑梗死组,PT、D-Dimer高于脑梗死组,差异均具有统计学意义,而两组的FIB、TT无明显差异;血栓弹力图的R值与APTT,K值与PT,Angle、MA和CI与FIB、PLT均呈正相关;而K与FIB、PLT,MA与PT、TT,CI与PT、APTT均呈负相关(P<0.05)。结论脑梗死与脑出血在急性发病期凝血状态复杂,传统凝血功能检测存在片面性和不及时性,而采用血栓弹力图可以更加直观、准确地反映患者真实的凝血状态,以指导临床提高诊治效率。
- 李春凤李静赵学英朱玉芳亓颖芝邱霞张敏周中民郎晓艳芦鑫
- 关键词：脑梗死脑出血凝血功能血栓弹力图输血治疗
- 基于上转发光免疫层析技术快速定量检测类鼻疽伯克霍尔德菌方法的建立被引量：3
- 2015年
- 目的建立能够对类鼻疽伯克霍尔德菌（类鼻疽菌）进行现场快速定量检测的上转发光免疫层析（Bps—UPT-LF）方法。方法以上转发光材料（UCP）作为标记物，采用双抗体夹心法制备用于类鼻疽菌检测的Bps—UPT—LF试纸。采用分别由类鼻疽菌及与其近缘或传播途径类似的菌株配制的系列浓度标准菌悬液，评价Bps—UPT—LF试纸条的敏感度、准确度、精密度及特异度等检测性能后，采用纯生物化学试剂和模拟样本分别对其进行单因素干扰因子和实际样品的耐受性评价，通过调整该方法的液体量取体积评价其对操作误差的耐受性。结果整个检测流程20min内可完成，Bps-UPT—LF试纸的敏感度达10^4CFU／ml，定量范围为10^4～10^7CFU／ml，跨越了4个数量级。浓度为10^7和10^8CFU／ml高浓度的类鼻疽菌近缘或传播途径近似菌株对检测特异度均无影响。Bps—UPT—LF试纸除能在高浓度的酸碱物质（pH 1～12）、盐（≤2mol／L的NaCl和KCl的混合物）、黏性物质（≤50g／L的聚乙二醇20000、≤20％的甘油）、生物基质（≥400g／L的牛血清白蛋白、≥80g/L的干酪素）等单因素样本的干扰下保证检测特异度及敏感度外，还能对浓度≥400g／L的奶粉、面粉、果珍、新鲜和腐败脏器以及浓度≤200g／L的腻子粉、蔗糖、味精和土壤等各种动物、环境、粉末之类的实际样本进行直接检测。-50％～200％的样品体积偏差、-22％-44％样品处理液体积偏差、-30％～30％的上样混合物体积偏差等操作误差对检测特异度和敏感度无影响。结论本研究建立的基于Bps—UPT—LF技术检测类鼻疽菌的方法从检测性能、耐受性等方面均可满足自然疫源地监测和生物反恐对类鼻疽菌进行现场快速定量检测的需求。
- 华菲张平平王晓英周蕾赵勇刘晓李春凤杨瑞馥于爱莲
- 关键词：类鼻疽
