蒋斯
- 作品数：3 被引量：19H指数：2
- 供职机构：广西医科大学附属肿瘤医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 雌二醇诱导子宫内膜癌细胞产生的VEGF、bFGF对PI3K/AKT通路的影响被引量：5
- 2015年
- 目的:探讨雌二醇(E2)诱导子宫内膜癌Ishikawa细胞生成的血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)通路的主要基因蛋白的影响。方法:(1)以不同浓度E2作用于Ishikawa细胞30min后,采用蛋白印迹法检测p-AKT蛋白水平。(2)实验设3组:1对照组;2E2组;3抑制剂+E2组(包括BIBF1120+E2组、Ponatinib+E2组和LY294002+E2组),用荧光定量PCR和蛋白印迹法分别检测子宫内膜癌细胞内VEGF、bFGF、PI3K、AKT基因及蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞周期的变化,Transwell检测细胞迁移能力。结果:(1)不同浓度(分别为0.01,0.1,1,10,100μmol/L)的E2作用30min后Ishikawa细胞中p-AKT蛋白的表达水平均高于对照组(P<0.05),且E2浓度为1μmol/L时其表达水平最高;(2)E2组中VEGF、bFGF、PI3K、AKT mRNA及VEGF、bFGF、p-PI3K、p-AKT蛋白活化水平均高于对照组(均P<0.05)。BIBF1120+E2组、Ponatinib+E2组、LY294002+E2组细胞中PI3K、AKT基因及p-PI3K、pAKT蛋白的表达均低于E2组(均P<0.05);(3)E2组与对照组相比,G1期细胞比例减少,S期细胞比例增加(均P<0.05),迁移穿过微孔的细胞增加(均P<0.05)。LY294002+E2组、BIBF1120+E2组、Ponatinib+E2组分别与E2组相比,G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少(均P<0.05),迁移穿过微孔的细胞减少(均P<0.05)。结论:E2通过非基因转录效应产生VEGF、bFGF可以激活PI3K/AKT通路,促进子宫内膜癌的发生和转移。
- 蒋斯陈海燕张洁清宋红林李力
- 关键词：子宫内膜癌PI3K/AKT通路VEGFBFGF
- 雌二醇诱导子宫内膜癌细胞产生的VEGF和bFGF对MAPK通路的影响被引量：14
- 2014年
- 目的 探讨雌二醇诱导子宫内膜癌细胞系Ishikawa细胞生成的血管内皮生长因子（VEGF）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对有丝分裂原活化蛋白激酶（MAPK）通路中主要基因蛋白的影响.方法 实验分为4组：雌二醇组（E2组,加入1 μmol/L的雌二醇作用30 min）,抑制剂组[包括Bibf1120组：加入10 μmol/L的VEGF受体抑制剂——Bibf1120; Ponatinib组：加入2.5 μmol/L的bFGF受体抑制剂——Ponatinib; U0126组：加入10μmol/L的MAPK激酶（MEK）特异性抑制剂——U0126.各组均预处理1 h],抑制剂＋E2组（包括Bibf1120＋E2组、Ponatinib＋E2组和U0126＋E2组,各抑制剂预处理1h后,加入1μmol/L的雌二醇作用30 min）;对照组（仅加入无血清DMEM培养基）.（1）以不同浓度（分别为0.01、0.1、1、10、100μmol/L）雌二醇作用于Ishikawa细胞后,采用蛋白印迹法检测磷酸化细胞外信号调节激酶1/2（p-ERK1/2）蛋白活化水平.（2）采用荧光定量PCR技术检测各组细胞中VEGF、bFGF、MEK1/2、ERK1/2mRNA的表达,蛋白印迹法检测各组细胞中VEGF、bFGF蛋白的表达及磷酸化NEK1/2（p-MEK1/2）、p-ERK1/2蛋白活化水平,流式细胞仪检测各组细胞的细胞周期比例,体外穿膜实验检测各组细胞的迁移能力.结果 （1）不同浓度（分别为0.01、0.1、1、10、100 μmo1/L）的雌二醇作用30 min后Ishikawa细胞中p-ERK1/2蛋白的活化水平分别为0.16±0.03、0.10±0.03、0.41±0.04、0.19±.0.03、0.19±0.03,均明显高于对照组的0.05±0.00 （P＜0.05）,且雌二醇浓度为1μmol/L时其活化水平最高.（2）E2组细胞中VEGF、bFGF mRNA及蛋白的表达水平均高于对照组,分别与对照组比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）;Bibf1120＋E2组细胞中VEGF mRNA及蛋白的表达水平分别与E2组比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）.E2组MEK1/2、ERK1/2mRNA及p-MEK1/2、p-ERK1/2蛋白活化水平均显著高于对照组（P＜0.05）;Bibf1120＋E2组、Ponatinib＋E2�
- 卢燕琼蒋斯张洁清宋红林李力
- 关键词：子宫内膜肿瘤血管内皮生长因子A成纤维细胞生长因子2丝裂原激活蛋白激酶类
- 雌激素诱导子宫内膜癌细胞产生VEGF、bFGF激活MAPK信传导通路的研究
- ：探讨雌激素诱导子宫内膜癌细胞生成VEGF、bFGF激活有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中相关基因的表达及对子宫内膜癌细胞生物学功能的影响. 方法：western blot检测不同浓度雌二醇作用子宫内膜癌...
- 张洁清卢燕琼陈海燕蒋斯
- 关键词：雌激素有丝分裂原活化蛋白激酶成纤维细胞生长因子
