赵敏洁
- 作品数：26 被引量：69H指数：6
- 供职机构：浙江大学生物系统工程与食品科学学院更多>>
- 发文基金：浙江省重大科技专项基金浙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学农业科学化学工程更多>>
- 中链脂肪酸在鸡养殖中的应用研究进展被引量：7
- 2016年
- 中链脂肪酸（MCFAs）是指含有6～12个碳原子的饱和脂肪酸，具有碳链短、分子较小、极性和水溶性较高等特点。其在动物体内的消化、吸收、转运、氧化等都具有特点，可以起到迅速供能、改善脂肪沉积、抑菌及调整肠道菌群和结构等作用。文章简要介绍了MCFAs及其在鸡养殖中的研究进展和应用现状，为其应用研究提供理论基础。
- 刘梦芸赵豪斌邓伶俐赵敏洁张辉冯凤琴
- 关键词：肉鸡蛋鸡
- 疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶在毕赤酵母中的高效表达和性质鉴定被引量：1
- 2018年
- 通过密码子优化改造编码sn-1,3位置专一性疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶(TLL)基因,同时通过重叠PCR技术合成该基因,并将其克隆到巴斯德毕赤酵母的表达载体p PIC9K中。结果表明,TLL脂肪酶被高效胞外表达,在摇瓶中发酵168 h得到的发酵液的上清脂肪酶表达量达到0.1 mg/m L,对应的p NPP水解酶活达到312.72U/m L。与对应的原始编码基因重组菌酶活(179.42 U/m L)相比,密码子优化后酶活提高74.29%,表明密码子优化策略成功提高了TLL在巴斯德毕赤酵母中的重组表达。比较毕赤酵母来源的重组TLL与商业化的米曲霉酶学性质发现它们具有相似的最适p H和温度耐受范围。另外,它们在有机溶剂耐受性、表面活性剂和金属离子效应以及位置选择性方面均较为相似,表明毕赤酵母来源的重组TLL同样具有商业化应用的潜力。
- 蔡海莺张婷Dumba Trish赵敏洁李杨童志超毛建卫张辉冯凤琴
- 关键词：密码子优化毕赤酵母
- 微生物脂肪酶资源挖掘研究进展被引量：13
- 2018年
- 脂肪酶广泛分布于动物、植物和微生物中,工业化脂肪酶主要来源于微生物。脂肪酶制剂的进一步工业化应用受限于生产成本和脂肪酶的温度和pH值耐受性、活性、专一性和溶剂耐受性等酶学性质,虽然微生物脂肪酶基因和蛋白相关资源信息已经非常丰富,但适合食品、药品和能源等工业应用的脂肪酶制剂品种依然较少,研究者仍然在为新型和理想的脂肪酶制剂资源的挖掘而努力。本文重点综述了微生物脂肪酶资源挖掘的主要研究方法,主要包括通过环境筛选和宏基因组筛选挖掘新的具有优良特性的脂肪酶;脂肪酶微生物生产菌株的改良、脂肪酶基因在重组工程菌株中的重组表达和优化、蛋白质工程方法对脂肪酶蛋白进行改造、脂肪酶固定化和催化工艺的改良等。
- 蔡海莺王珍珍张婷张婷李杨赵敏洁李杨
- 关键词：微生物脂肪酶资源挖掘蛋白质工程
- 癸酸单甘油酯在制备缓解便秘的药物或功能食品中的应用
- 本发明公开了癸酸单甘油酯在制备缓解便秘的药物或功能食品中的应用，属于医药技术领域。所述药物或功能食品的活性成分为癸酸单甘油酯，本发明首次公开癸酸单甘油酯具有缓解便秘方面的功能，动物研究表明，癸酸单甘油酯具有促进小肠蠕动能...
- 赵敏洁冯凤琴沈飞张峻珲杨梦雨颜恒王晶蔡海莺
- 毕赤酵母重组菌高密度发酵产疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶被引量：5
- 2018年
- 疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶TLL是一种热稳定、具有位置专一性等良好属性和应用前景的脂肪酶,已成功在多种宿主中实现重组表达。本研究构建含前导肽的TLL脂肪酶毕赤酵母重组工程菌,在摇瓶水平对该重组工程菌的培养和诱导条件进行优化,通过单因素试验,得到的最佳发酵条件:1.5%(体积分数)甲醇,pH 7.0,质量分数0.5%玉米油和0.1%阿拉伯胶,该条件下摇瓶发酵最高酶活为2 265.3 U/mL。以甲醇为唯一碳源进行高密度发酵,202 h后菌体OD600值达到最高282,对应发酵上清液的最高酶活为22 561.4 U/mL。参考摇瓶优化结果,采用辅助碳源与甲醇共诱导高密度发酵,培养和诱导208 h后,最终菌体OD600值达到362,对应发酵上清液的最高酶活为24 522.6 U/mL,较以甲醇为唯一碳源的对应值分别提高了28.37%和10.87%。另外,最高酶活较摇瓶水平发酵的最高酶活2 265.3 U/mL提高10.83倍,表明高密度发酵和共诱导是大幅提高酵母表达重组TLL蛋白的重要手段。
- 蔡海莺Dumba Trish张婷来佳赵敏洁李杨于林凯张辉冯凤琴
- 关键词：高密度发酵毕赤酵母
- 混合益生菌对大口黑鲈生长性能、肉品质及肠道健康的影响
- 2024年
- 本试验旨在探究混合益生菌(凝结芽孢杆菌、植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌,活菌数≥1.75×10^(9) CFU/g)对大口黑鲈生长性能、肉品质及肠道健康的影响。选择990尾初始体重为(36.17±1.52)g大口黑鲈,随机分为3组,每组3个重复,每个重复110尾。各组分别饲喂基础饲料中添加0(对照组,CON组)、0.1%(MP-0.1%组)和1.0%(MP-1.0%组)的混合益生菌。试验期130 d。结果表明:1)各组之间生长性能和形体指标无显著差异(P>0.05)。2)与CON组相比,MP-0.1%和MP-1.0%组的肌肉纤维直径显著降低(P<0.05),MP-1.0%组的肌肉密度显著升高(P<0.05)。3)与CON组相比,MP-1.0%组的肌肉硬度、胶黏性和咀嚼性显著升高(P<0.05)。4)与CON组相比,MP-1.0%组的肌肉水分含量显著降低(P<0.05),肌肉粗蛋白质、风味氨基酸(鲜味氨基酸、甜味氨基酸)、多不饱和脂肪酸、omega-3脂肪酸及omega-6脂肪酸含量显著升高(P<0.05);MP-0.1%组的肌肉多不饱和脂肪酸和omega-3脂肪酸含量显著升高(P<0.05),而肌肉单不饱和脂肪酸含量显著下降(P<0.05)。5)与CON组相比,MP-0.1%和MP-1.0%组的肌肉中土臭素和2-甲基异莰醇含量均显著降低(P<0.05)。6)与CON组相比,MP-1.0%组的胃蛋白酶和胰蛋白酶活性均显著升高(P<0.05)。7)与CON组相比,MP-0.1%组的肠道绒毛宽度显著升高(P<0.05)。8)与CON组相比,MP-1.0%组的肠道异戊酸和总酸含量显著升高(P<0.05)。9)3组之间的肠道鲸杆菌属(Cetobacterium)和消化链球菌属(Peptostreptococcus)相对丰度具有显著差异(P<0.05),且MP-0.1%和MP-1.0%组的肠道菌群相似度更高,明显不同于CON组。由此可见,饲料中添加混合益生菌可改善大口黑鲈的肉品质及肠道健康。本试验条件下,大口黑鲈饲料中混合益生菌的适宜添加水平为1.0%。
- 周秀珍刘滔张毅王扬赵敏洁王旭堂黄菊冯凤琴
- 关键词：肉品质肠道健康大口黑鲈
- 月桂酸单甘油酯对小鼠肠道菌群调节作用的时间依赖效应被引量：6
- 2021年
- 本文主要研究月桂酸单甘油酯(GML)对正常小鼠糖、脂代谢和系统性炎症反应的影响以及GML对肠道菌群调节作用的时间依赖效应。结果表明:GML对血脂4项、葡萄糖、胰岛素和炎症相关指标均无显著影响,然而可显著增加小鼠的体质量和采食量,降低血清低/高密度脂蛋白胆固醇的比值。高通量测序结果显示,与对照组相比,GML处理5周和17周,均显著降低小鼠粪便菌群的alpha多样性。在门水平上,GML处理5周,显著改变肠道菌群的组成,而在17周时菌群组成的差异消失。在属水平上,由于时间因素对对照组菌群的影响程度大于对GML处理组菌群的影响,因此在第5周和第17周,2组间部分菌群的变化趋势不一致。GML对巴恩斯氏属、颤杆菌属和梭菌属XIVb族等有益菌的促进作用和对厌氧支原体属的抑制作用比时间的影响更显著,提示GML不仅有助于维持肠道菌群的稳定性,还能优化菌群结构。本研究结果说表明GML显著提高α-防御素和闭合蛋白的表达,增强了黏膜屏障功能,并且这种增强效果与GML对菌群的调节作用密切相关。
- 莫秋芬邓伶俐李杨赵敏洁冯凤琴
- 关键词：月桂酸单甘油酯血脂水平炎症反应肠道菌群
- 米黑根毛霉脂肪酶基因的酵母重组表达和Kex2位点改造被引量：1
- 2019年
- 米黑根毛霉脂肪酶(RML)具有较高的合成活性、热稳定性、溶剂耐受性以及sn-1,3位置专一性等一系列适合工业化推广的特点。本研究通过密码子优化改造RML编码基因,并将其克隆、转化到毕赤酵母GS115菌株,经诱导发酵156 h,酶活达到3.77 U/mL。为了进一步改善RML脂肪酶的重组表达,通过定点突变的方式去掉潜在的Kex2酶切位点,结果显示:RML突变体表达量均显著低于野生型的RML脂肪酶,表明"-Arg196-Arg197-"序列并不影响RML的重组表达。通过对RML蛋白结构分析,Kex2酶切位点的肽键被包埋在蛋白内部,这表明该位点区域的折叠在进入分泌途径时已基本完成。本研究对异源蛋白的酵母重组表达具有一定参考价值。
- 蔡海莺沈灵智赵敏洁赵敏洁李杨毛建卫
- 关键词：毕赤酵母密码子优化
- 疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶基因、工程菌及其应用
- 本发明公开了一种疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶基因、工程菌及其应用，该疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶基因的碱基序列如SEQ？ID？NO.2所示。本发明在不改变现有的疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶氨基酸序列和蛋白结构的基础上，通过避免稀有密码子和...
- 冯凤琴蔡海莺赵敏洁李杨张辉
- 文献传递
- 脂肪酶的酵母细胞表面展示及其应用被引量：1
- 2017年
- 脂肪酶是一类在工业上应用广泛的酶制剂。传统的脂肪酶生产过程操作复杂,投资较大,使得脂肪酶的价格一直居高不下。脂肪酶的表面展示技术直接将脂肪酶固定在宿主细胞表面,其优点是:1)省去复杂的分离纯化和固定化过程,降低生产成本;2)表面展示技术为脂肪酶的蛋白工程研究提供新的高通量筛选途径;3)部分研究表明展示的脂肪酶作为全细胞催化剂比传统的自由酶以及固定化的脂肪酶具有更高的酶学活性和更好的温度稳定性、有机溶剂耐受性等优良特性,应用前景良好。根据宿主不同,研究较多的脂肪酶表面展示系统可分为噬菌体、细菌和酵母3类。凭借成熟的基因工程操作技术和对真核蛋白良好的加工修饰能力,酵母细胞在脂肪酶表面展示上的应用越来越多。本文将简要介绍脂肪酶酵母表面展示系统的组成,影响因素及其在高通量筛选、全细胞催化剂和蛋白共展示技术等方面的应用前景。
- 赵敏洁蔡海莺李杨来佳张辉冯凤琴
- 关键词：脂肪酶酵母细胞高通量筛选
